分子相互作用試験：IP/CO-IP免疫共沈殿

一、技術概要

IP（免疫沈殿、Immunoprecipitation）とCo−IP（免疫共沈殿、Co−IMMUnoprecicipitation）は蛋白質の機能と相互作用を研究する核心技術であり、分子生物学と細胞生物学の分野に広く応用されている。

二、技術原理

IPは特異的抗体と標的蛋白質を通じて結合し、抗体を用いて標的蛋白質（すなわち抗原）を分離し、ある蛋白質の発現状況を検出する; CO-IPはIPに基づいて、タンパク質間の相互作用を検証する。1つのタンパク質（餌タンパク質）を捕捉し、それに結合する相互作用タンパク質（標的タンパク質）を検出することにより、したがって特異的濃縮に関する研究の目的タンパク質、さらに複合体において既知のタンパク質と相互作用するタンパク質を研究する。

三、応用シーン

• IP：質量分析（IP-MS）、抗体特異性の検証のために低濃度蛋白質を濃縮する。

• Co-IP：転写因子複合体、キナーゼ-基質相互作用を研究し、既知の相互作用を検証し、または信号経路複合体などの新しい相互作用パートナーを発見する。

四、技術優勢

• IP：高い特異性を持ち、抗体−抗原の特異的結合に依存する。

• 柔軟性：支持体はオプションの磁石ビーズ（操作が簡単、自動化互換性）またはアガロース（高結合容量）。

• コバルト-IP：体内真実性：研究したのは体内の自然状態における蛋白質相互作用であり、比較的真実な蛋白相互作用を反応することができる。

五、サンプルタイプ

新鮮細胞（壁貼り細胞／懸濁細胞）、凍結保存細胞、凍結保存組織、溶解液サンプル。

六、サンプル需要

• 細胞サンプル：約5×10 ^ 6個（6 cm皿2個、または懸濁細胞の形で遠心管に保存するか、T 25本2個）、

• 凍結保存組織：約40 mg、溶解液サンプル：蛋白濃度は2 mg/mg以上、蛋白総量は3 mg以上。

七、サンプル準備&輸送

• 生細胞サンプル：距離が近いものは新鮮なサンプルを提供することができ、皿/T 25本/遠心管内に培養された新鮮な細胞サンプルを常温速達（遅くとも翌日到着）で輸送することができ、本市内ではフラッシュまたは直接配達することができ、距離が遠いものは、-80℃で凍結保存された細胞をドライアイス輸送することができる、

• 組織サンプル&溶解液サンプル：-80℃凍結保存ドライアイス輸送。

八、提供する試薬

検出用IB抗体とIP抗体

九、実験周期

1～2週間（質量分析を含まない）

十、その他

Western blot/蛋白質スペクトルの後続検出