分子実験分子相互作用：EMSAゲル移動阻止実験

一、技術概要

DNA／RNA結合タンパク質とそれに関連するDNA／RNA結合配列との相互作用を研究するためのEMSA技術、すなわちゲル移動度または電気泳動移動度実験、

二、技術原理

精製されたタンパク質または細胞粗抽出液を標識DNAまたはRNAプローブと共にインキュベートし、非変性ポリアクリルアミドゲル電気泳動において、DNAまたはRNAタンパク質複合体の移動度が非結合プローブより遅いことにより、活性化されたDNAまたはRNAに結合されたタンパク質転写または調節因子を検出した。

三、応用シーン

1.遺伝子発現制御研究：転写因子とDNAの結合部位と結合特性を確定し、遺伝子発現の制御メカニズムを研究する。

2.疾病メカニズムの研究：疾病関連遺伝子の発現制御異常を分析し、疾病の発生発展メカニズムを探索する。

3.薬物標的の発見：疾病に関連するDNA結合蛋白を選別し、鑑定し、薬物開発に標的を提供する。

4.信号通路の研究：信号通路におけるDNA結合タンパク質の活性変化及び下流遺伝子への影響を研究する。

四、技術優勢

1.実験操作は比較的簡単であり、実験条件に対する要求は厳しくない。

2.多種の核酸分子の大きさと構造及び広範な蛋白質の大きさ範囲を検査することができ、単一反応系において異なる蛋白質と異なる核酸分子の結合情況を検査することができる。

3.ビオチン標識プローブは安定、安全、正確で親和性が高い。

五、サンプルタイプ

新鮮な細胞（壁貼り細胞／懸濁細胞）、凍結保存細胞、凍結保存組織、細胞核タンパク質サンプルまたは精製された転写因子、一部の実験では組換え発現されたタンパク質を使用することもできる。

六、サンプル需要

細胞サンプル：約1×10 ^ 7個（10 cm皿1個、または懸濁細胞の形で遠心管に保存するか、T 75本1個）、

凍結保存組織：約400 mg、

植物組織：約2 g、細胞核蛋白、精製転写因子、組換え発現蛋白など：1枚の膜に少なくとも50 ulを提供し、濃度は0.5 mg/ml以上である。

七、サンプル準備&輸送

生細胞サンプル：距離が近いものは皿/T 75本/遠心管内に養生された新鮮な細胞サンプルを常温宅配便（遅くとも翌日到着）で輸送することができ、本市内ではフラッシュまたは直接配達することができ、距離が遠いものは-80℃で凍結保存された細胞をドライアイス輸送することができる、

組織サンプル&その他の液体サンプル：-80℃凍結保存ドライアイス輸送。

八、提供する試薬

結合蛋白特異性抗体は50 ul以上、濃度は0.5 mg/mlより大きい。

九、実験周期

2～3週間

十、その他

プローブ配列、例えばプローブ配列がない場合は、DNA結合タンパク質に関する情報または関連文献を提供してください。