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概要
多重免疫グループ化染色原理：抗原と抗体の特異的結合の原理を利用して、一抗を組織または細胞中の標的抗原と結合させる、HRP標識の二抗を添加して、それは一抗と特異的に結合することができて、“抗原-一抗-HRP標識の二抗”の複合体を形成して、カゼイン蛍光染料を添加して、HRPと*の存在の下で、カゼインは活性化されて抗原の近くの蛋白質残基と共有結合して、大量の蛍光素は抗原-抗体結合部分に堆積して、信号を増幅させて、何度も上記のステップを繰り返して、毎回異なる一抗と対応するカゼイン蛍光染料を使用することによって、複数の標的に対して
製品詳細
実験手順
サンプルの準備：パラフィン切片、凍結切片または細胞這片などの処理、例えば固定、抗原修復、内因性ペルオキシダーゼの遮断などを含む。
一抗インキュベーション：抗体希釈液で希釈した一抗を滴下し、遮光湿潤箱内で一定時間インキュベーションする。
二抗孵化：洗浄後、一抗に対応する種属のHRP標識二抗を添加し、遮光室温で孵化する。
TSA蛍光染料染色：カゼイン蛍光染料を滴下し、室温反応後に洗浄する。
抗体溶出：次のマーカーを行うために、前のラウンドの抗体を熱修復または抗体溶出液などの方法で溶出する。
繰り返し標識：上記の手順を繰り返し、異なる1抗と蛍光染料を使用して、多重標識を実現する。
再染色細胞核及び封止シート：DAPIなどの核染料で細胞核を再染色し、抗蛍光クエンチ封止剤封止シートを滴下する。
鏡検写真：蛍光顕微鏡などの設備の下で観察し、画像を収集する。
注意事項
抗体の選択と最適化：特異性が高く、検証された抗体を選択し、抗体の濃度とインキュベーション時間などの条件を最適化する。
エピトープマスキング問題：抗体の染色順序に注意し、エピトープマスキング現象を回避し、抗体順序を調整するか、他の方法で解決することができる。
実験対照設定：試験結果の正確性と信頼性を確保するために、陽性対照と陰性対照を設定する。
信号増幅倍数の制御：具体的な実験需要と蛍光信号強度に基づいて、TSA増強剤を添加するかどうかなどの手段を合理的に選択して信号増幅倍数を制御する。
