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概要
原位杂交检测的基本原理是利用核酸分子单链之间互补的碱基序列，将有放射性或非放射性的外源核酸（即探针）与组织、细胞或染色体上待测DNA或RNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。
製品詳細
FISH実験方法及び手順
一.プローブ変性
プローブを75 oC恒温水浴中で5分間インキュベートし、直ちに0 oC、5〜10分間放置し、二本鎖DNAプローブを変性させた。
二.ひょうほんへんせい
②ガラス片標本を取り出し、70〜75 oCの体積分率70%ホルムアミド／2×SSCの変性液に浸して2〜3 min変性した。
③直ちに順に標本を体積分率70%、体積分率90%、体積分率100%氷エタノールシリーズを経て脱水し、毎回5分間、その後空気乾燥した。
三.ハイブリダイゼーション
変性または予備焼鈍されたDNAプローブ10μLを変性および脱水されたガラス標本上に滴下し、18×18カバーガラスをかぶせ、Parafilmでシールし、湿潤カセット中に37 oCハイブリダイゼーションを一晩（約15〜17 h）放置した。ハイブリダイゼーション液が少なく、ハイブリダイゼーション温度が高く、持続時間が長いため、標本の湿潤状態を維持するために、このプロセスはウェットボックスで行われる。
四.ようり
このステップは、非特異的に結合されたプローブを除去するのに役立ち、バックグラウンドを低減する。
（1）ハイブリダイゼーション翌日、標本を37 oC温箱から取り出し、ブレードでカバーガラスを軽くはがす。
（2）ハイブリダイゼーションされたガラス片標本を予熱42〜50 oCの体積分50%ホルムアミド／2×SSC中に3回放置し、毎回5分間洗浄する。
（4）室温で、ガラス片標本を2×SSCで軽く洗います。
（5）ガラス片を取り出し、自然乾燥する。
（6）200μLの複染溶液（PI/antifadeまたはDAPI/antifade染液）を採取してガラスサンプルに滴下し、カバーガラスを被せる。
五.蛍光顕微鏡観察FISH結果
