マウス線維芽細胞

l細胞同定

ジェネリック認証に合格しました

l細胞由来

国家リポジトリ

l細胞背景

1948年3月にNCTC clone 929（マウス結合組織）、細胞系Lのクローンを構築した。細胞株Lは最初に確立された連続培養細胞株の1つであり、clone 929は最初のクローン株である。100日齢の雄C 3 H/anマウスの正常皮下疎結合組織から脂肪組織に親細胞系Lを構築した。第95世代の細胞系Lは毛細管法を用いて単細胞を分離してclone 929を構築した。検出によりマウス天然痘ウイルスは陰性であった。

l細胞特性

疎結合組織及び脂肪品系：C 3 H/an、

2）形態：線維芽細胞、壁貼り成長、

3）含有量：>1 x 106細胞数、

4）規格：T 25本または1 mL凍結保存管包装、

5）用途：科学研究用のみ。

l培養条件

1）MEM（推奨awcell−0012）培地の準備、馬血清（推奨：awcell-002 b）10%、2対抵抗、1%。この細胞は胎牛血清で培養することはできない。

2）培養条件：気相：空気、95%、二酸化炭素、5%。温度：37℃、培養箱の湿度は70%〜80%である。

l注意事項

壁貼り細胞の継代については、以下の方法を参照することができる：

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.0.25%（w/v）トリプシン−0.53 mM EDTAを培養瓶に入れ（T 25瓶1−2 mL、T 75瓶2−3 mL）、37℃培養箱に入れて1−2分間消化し（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり脱落すると、速やかに操作台に戻し、培養瓶を軽くたたいた後、3−4 mlの10�S含有培地を加えて消化を停止した。

3.軽く均等にしてから吸引し、1000 RPM条件下で3-5 min遠心分離し、上清を捨て、1-2 mLの培養液を補充してから均等に吹き付ける。細胞懸濁液を1：2の割合で新しいT 25瓶に分け、説明書の要求に従って配置された新しい*培地を6-8 ml添加して細胞の成長活力を維持し、その後の継代は実際の状況に基づいて1：2 ~ 1：5の割合で行った。

3）細胞凍結保存：細胞を受け取った後、前3世代の培養時に細胞種子を凍結保存し、後続の実験に備えることを提案する。

l輸送形態

低温：（1）1 mL凍結保存管包装ドライアイス輸送、受け取った後-80度冷蔵庫で一晩保存した後、液体窒素に転入するか、直接回復してドライアイスが揮発してきれいになり、凍結保存管キャップが脱落し、破損し、細胞が汚染されていることを発見したので、すぐに私たちに連絡してください。

常温：（2）T 25瓶で回復した生存細胞を常温出荷し、受け取った後に細胞受信後の処理方法に従って操作する。

l生物安全

1.すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があると見なし、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、保護に注意して、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから捨てることができる必要がある。

2.凍結保存細胞を回復する際には、保護手袋、衣類、保護マスクを着用することを推奨します。注意：凍結貯蔵管が液体窒素に浸漬すると漏れ、徐々に液体窒素が充満する。解凍時、液体窒素が気相に転化すると、容器が爆発したり、危険力で蓋を吹き飛ばしたりする可能性があり、舞い上がった屑が発生して人的被害を与える可能性がある。