ヒト胚腎細胞293 T

HEK-293 Tヒト胚腎細胞

ねえ、293 T'293 T'。

l細胞同定

l細胞由来

国家リポジトリ

l細胞背景

HEK-293 T細胞は293 T（293 tsa 1609 neo）細胞系（ATCC CRL-11268）の誘導体である。細胞はSV 40抗原を持続的に発現し、この細胞はトランスフェクション実験によく用いられ、トランスフェクション効率が高い。（トランスフェクションは一般的に50%密度で敷かれ、細胞が皿壁に貼り付けられた直後（一般的に8〜10時間）、トランスフェクション操作を行うことができる）

l細胞特性

1）出所：ヒト胚性腎臓

2）形態：上皮細胞様、壁貼り成長、壁貼り能力が弱い

3）含有量：>1 x 106細胞数

4）規格：T 25本または1 mL凍結保存管包装

5）用途：科学研究用のみ

l培養条件：

1）DMEM（推奨awcell−0001）培地の準備、良質の子牛血清、10%、L−グルタミン（2 mM）1%、NEAA 1% ；ダブルアンチエイリアス1%

2）培養条件：気相：空気、95%、二酸化炭素、5%。温度：37℃、培養箱の湿度は70〜80%である。

l注意事項：

この細胞は懸濁および軽微な壁貼り細胞であり、継代は以下の方法を参照することができる：

1.収集：培養ビン中の懸濁した細胞を遠心管中に収集する。カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回洗浄した。細胞壁が堅固でないPBSは洗浄後に細胞が脱落するため、PBSも遠心管に回収しなければならない。

2.0.25%（w/v）トリプシン−0.53 mM EDTAを培養瓶（T 25瓶1−2 mL、T 75瓶2−3 mL）に入れて37℃培養箱で1−2分間消化し（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞が大きく丸くなり、脱落したら速やかに操作台に戻し、培養瓶を軽くたたいた後、3−4 mlの10�S含有培地を加えて消化を停止した。

3.収集した懸濁細胞、pbs洗浄液中の細胞と消化した壁貼り細胞を1000 rpmlで5分間遠心分離し、上清を捨て、1-2 mL培養液を補充した後、再懸濁混和した後、細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25瓶に分け、6-8 mlを明細書の要求に従って配置した新しい*培地を添加して細胞の成長活力を維持し、後続継代は実際の状況に基づいて1:2 ~ 1:5の割合で行った。

l輸送形態：

低温：（1）1 mL凍結保存管包装ドライアイス輸送、受け取った後-80度冷蔵庫で一晩保存した後、液体窒素に転入するか、直接回復し、もしドライアイスが揮発してきれいになり、凍結保存管キャップが脱落し、破損し、細胞に汚染があることを発見したら、すぐに私たちに連絡してください。

常温（2）T 25瓶で蘇生した生存細胞を常温出荷し、受け取った後は細胞受信後の処理方法に従って操作する。

l生物安全：

1.すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があると見なし、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、保護に注意して、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから捨てることができる必要がある。

2.凍結保存細胞を回復する際には、保護手袋、衣類、保護マスクを着用することを推奨します。注意：凍結貯蔵管が液体窒素に浸漬すると漏れ、徐々に液体窒素が充満する。解凍時、液体窒素が気相に転化すると、容器が爆発したり、危険力で蓋を吹き飛ばしたりする可能性があり、舞い上がった屑が発生して人的被害を与える可能性がある。