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北京通州区馬駒橋聯東U谷景盛南四街15号85 A 3階
北京索雷宝科技有限公司
北京通州区馬駒橋聯東U谷景盛南四街15号85 A 3階
α-ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ(α-KGDH)活性検出キット説明書
びりょうほう
注意:本製品の試薬は変動しているので、注意して厳格にこの説明書に従って操作してください。
品番:BC0715
仕様:100トン/96秒
製品構成:使用前に試薬の体積と瓶内の体積が一致しているかどうかを真剣にチェックして、疑問があれば直ちにソレボスタッフに連絡してください。
| 試薬名 | 仕様 | 条件の保存 |
| 試薬1 | 液体110 mL×1本 | 2-8℃保存 |
| 試薬二 | 液体0.6 mL×2本 | -20℃保存 |
| 試薬3 | 液体28 mL×1本 | 2-8℃保存 |
| 試薬四 | 液体0.5 mL×1本 | 2-8℃保存 |
| 試薬5 | ふんまつざい×2支(し) | 2-8℃保存 |
| 試薬6 | ふんまつざい×2支(し) | -20℃保存 |
| ふんまつざい×2支(し) | -20℃保存 | |
| 試薬8 | ふんまつざい×2支(し) | -20℃保存 |
溶液の調製:
試薬二:揮発性試薬のため、使用後はできるだけ早く密封し、-20℃で保存する。
試薬五:使用直前に試薬五を1本採取し、添加1mL試薬三、十分に溶解し、使い切れない試薬2-8℃保存4週;
試薬六:使用直前に試薬六を1本採取し、添加1.5mL試薬三、十分に溶解し、使い切れない試薬-20℃分装保存4
試薬7:使用直前に試薬7を1本採取し、添加1mL試薬三、十分に溶解し、使い切れない試薬-20℃分装保存4週間、繰り返し凍結融解を避ける(1本の粉剤を溶解した後に行うことができる100トン、使用時間を延長するために、この製品は1支剤)、
0.4ミリリットル蒸留水、十分に溶解し、使いきれない試薬-20℃分割保存4周、繰り返し凍結融解を避ける、
作動液の調製:使用直前に8.05を順次取るmL試薬三、0.2 ミリリットル试剂四、1ミリリットル試薬五、1.25ミリリットル試薬六、0.5ミリリットル(共11ミリリットル、約55T)、十分に混合して使用し、現在使用しています。
製品の説明:
α-KGDH(EC 1.2.4.2)動物、植物微生物及び培養細胞のミトコンドリアに広く存在し、トリカルボン酸循環制御キー酵素の一つであり、触媒α-酮戊二酸氧化脱羧生成琥珀酰辅*A.。
α-KGDH触媒α-ケトグルタル酸、ニコチンアミドアデニン二ヌクレオチド+A.、二酸化炭素、ない,ないに340ナノメートル特徴的な吸収ピークがあり、ないの生成レート表現α-KGDH活性。
サンプル吸光値が測定範囲内にない場合は、希釈またはサンプル量を増やして測定することをお勧めします。
持参する機器と用品:
紫外分光光度計/酵素スケール、水浴釜/恒温培養箱、卓上遠心分離機、可変式ピペット、微量石英比色皿/96穴紫外線プレート、すり鉢/ホモジナイザー、氷、蒸留水。
操作手順:具体的な操作手順の詳細は「製品資料」添付ファイルを参照
測定中にすべての試薬とサンプルを氷の上に置いて、変性と不活性化を防ぐ。
比色皿中の反応液の温度は37℃または25℃、ビーカーを取って一匹に一定量の37℃または25℃蒸留水、このビーカーを入れて37℃または25℃反応中に比色皿を反応液とともにビーカーに入れた。
2人で同時にこの実験をして、1人で色を比べて、1人で時間を計って、実験結果の正確性を保証することができます。
測定管のΔA値は0.01-0.25間、測定管のΔAより大きい値0.25、サンプルを希釈する必要があります。
抽出液には一定濃度のタンパク質(約1 mg/mL)が含まれているため、サンプルタンパク質濃度を測定する際に抽出液自体のタンパク質含有量を差し引く必要がある。
実験例:
0.1 gのヒエを採取してサンプル処理を行った、上清を2倍希釈した後測定手順に従って操作し、微量石英比色皿を用いて測定した計算ΔA測定=A4-A3=0.3243-0.3115=0.0128,ΔA空白(くうはく)=A2-A1=0,サンプル品質に基づいて酵素の生存率を計算する:
α-KGDHかっせい(U/g質量)=1488.5×(ΔA測定-ΔA空白(くうはく))÷幅×2(希釈倍率)=381.056 U/g品質。
マウス肝臓0.1 gを採取してサンプル処理を行い、4℃11000 g遠心分離10分、上清を取った後計算ΔA測定=A4-A3=1.2123-0.9623=0.2500,ΔA空白(くうはく)=A2-A1=0,サンプル品質に基づいて酵素の生存率を計算する:
α-KGDHかっせい(U/g質量)=1488.5×(ΔA測定-ΔA空白(くうはく))÷W=3721.25 U/g品質。
建雲 岳昌健 杜静 四半期等.抑制 α−ケトグルタル酸デヒドロゲナーゼ活性は植物の不定根成長に影響する 楊木via 変化 GABA分流プランター。2018年7月、
Xiao Li、Qi趙、Jianni Qi、et al.lnCRNA FtxはPPARγ経路を通じて肝細胞癌における有酸素酵母解と腫瘍進展を促進した。国際腫瘍学雑誌。2018年5月、(3.571の場合)
参考文献:
Park LC H、Caligasan NY、Sheu KFR、等.脳切片と培養細胞中のα−ケトグルタル酸脱水素酵素活性の定量染色[J]。
関連シリーズ:
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