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アドレス
上海市松江区長塔路465号3棟3階
製品分類
上海安為生物科学技術有限公司
概要
ヒト単核細胞白血病細胞THP−1 STR同定は、1978年に再発した急性単核細胞白血病（AML）の1歳男児の末梢血から確立された。この細胞は乳汁ビーズと活性化赤血球を飲み込むことができ、表面と細胞質免疫グロブリンはない。仏ポリオールTPAを用いて単核細胞分化を誘導することができる。
製品詳細
1、形態と機能特徴：ヒト初代単核細胞に類似した形態と機能特徴を有し、細胞分化マーカーを含む。それらは単核/マクロファージへの分化を誘導することができ、従って炎症と免疫方向を研究する細胞モデルとしてよく用いられる。
2、分化誘導：特定の化学誘導剤、例えば仏波エステル（PMA）によりマクロファージに分化することができる。さらなる分極は、リポ多糖（LPS）およびIFN−γ（誘導M 1型マクロファージ）またはIL−4、IL−13（誘導M 2型マクロファージ）を添加することにより達成することができる。M 1型マクロファージは炎症反応に関与し、M 2型マクロファージは炎症抑制作用と組織修復に関与する。
3、炎症モデル：由来のM 1型マクロファージは典型的な炎症モデルであり、M 2型マクロファージは炎症後期の組織修復と再建過程を模擬する。また、アテローム性動脈硬化の慢性炎症モデルをシミュレートするために、酸化型低密度リポ蛋白質（ox−LDL）によって泡細胞の形成を誘導することもできる。
4、遺伝子編集：遺伝子編集を行う理想的なモデルであり、特にCRISPR/Cas 9技術を結合して、免疫と炎症の過程における特定の遺伝子の作用を研究するために、効率的に遺伝子ノックアウトまたはノックアウトを行うことができる。
5、培養特性：実験室で培養と増幅しやすく、安定した遺伝子背景を持ち、しかも個体差性問題が存在せず、これは実験結果の再現性に有利である。
ヒト単核細胞白血病細胞THP−1 STR同定
| ヒト単核細胞白血病細胞THP−1 【THP 1、O-THP-1、東北病院小児科-1】 | |
| l細胞同定 |
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| l細胞由来 | 国家リポジトリ |
| l細胞背景 | 1978年に再発した急性単核細胞白血病（AML）の1歳男児の末梢血から確立した。この細胞は乳汁ビーズと活性化赤血球を飲み込むことができ、表面と細胞質免疫グロブリンはない。仏ポリオールTPAを用いて単核細胞分化を誘導することができる。 注意：NRAS突然変異はPubMed＝9379676においてp.Gly 12 Serと誤って指示された。 |
| l細胞特性
| 1）出所：急性単核細胞白血病、単核細胞 2）形態：単核細胞、懸濁 3）含有量：>1 x 106細胞数 4）規格：T 25本または1 mL凍結保存管包装 5）用途：科学研究用のみ |
| l培養条件 | 1）RPMI−1640（推奨awcell−0002）培地の準備、0.05 mMβ−qiu基エタノール（細胞培養レベル推奨：awcell−8211）、2対抵抗、1%。 2）参考継代比：継代時に細胞密度を2-4×105 cell/mLに制御し、細胞が8-10×105 cell/mLに成長した時に継代する。 3）参考液交換周波数：継代時の液交換。 4）培養条件：気相：空気、95%、二酸化炭素、5%。温度：37℃、培養箱の湿度は70%〜80%である。 5）凍結保存液：＊培養液95%、DMSO 5%（この凍結保存液を使用した後、当倉庫の経験に従って生存率約50%を回復し、回復後に成長を回復するために7-10日追加培養する必要がある） |
| l注意事項
| 【注意事項】：
1.提供された15 mlの遠心管で出荷された細胞を受け取った後、遠心分離で細胞を収集しないでください。まず2つの新しいT 25培養瓶を用意して、それから細胞を均一に混合してから2つの新しいT 25培養瓶に移して、培地を10 mlに補充します。37℃培養箱に入れます。 2.受け取ったのはT 25培養瓶で出荷された細胞で、まず遠心分離によって細胞を収集してから、説明書の要求に従って配置された*培地に12 ml再懸濁して均等に吹き付けた後、2つの新しいT 25培養瓶に移して培養すればよい。 3.thp−1懸濁細胞。この細胞は培養時に温和に処理するのが好きで、培養時にできるだけ細胞に遠心処理を行って細胞にダメージを与えることを少なくします。液交換時に全培地を交換しないで、【半液交換法】を用いて継代し、細胞を希釈して密度を維持するために細胞培地を添加することをお勧めします。 4.細胞は血清の質に敏感であり、当ライブラリは輸入ブランドの良質な血清を用いて培養することを提案します。FBSは不活化しないで、細胞の成長が遅い場合は他のFBSを使用するか、一時的にFBS濃度を20%に増加させてみてください
β−qiu基エタノールの安定性は限られており、β−qiu基エタノールを*培地に添加して長期保存し、継代または液体添加のたびにβ−メルカプトエタノールを添加してはならない。 β−qiu基エタノール（2−qiu基エタノール）は、培地で使用されるFBSではアミノ酸システインの供給が不足しているのに対し、システインが多いため、リンパ球または他の細胞培養物に添加される。T細胞のような細胞の中には、システインを細胞質に輸送することができず、システインに変換しなければならないものもあります。β−qiuエタノールは、システインを細胞輸送可能な形態に還元し、その後、細胞成長に必要なシステインに変換する。β−qiuエタノールは還元剤でもあり、培養中の細胞から発生する多くの有毒代謝物を分解し、細胞周辺の環境を改善することができる。 6.この細胞は細胞密度に敏感であり、培養、継代の際に細胞密度を適切な範囲に保つことに注意してください（具体的には細胞説明書を参照してください）。 7.当該細胞は凍結保存後の回復率が低いので、凍結保存時に適宜細胞量を高めてください 8.細胞の全交換液は、通常、増殖中の細胞に＊培地を添加することによって細胞の成長を維持することができ、7日ごとに細胞を新たに配合された培地に遠心分離して再懸濁することができる。 ATCCによるthp-1細胞の細胞活力維持に関する説明 デバイス=モード （頻繁な細胞計数はthp−1を監視する最良の方法である。これらの細胞は、フラスコに少量の新鮮な培地（条件付き培地を有するように）を簡単に加えることにより、2〜3日ごとに培養すべきである。毎回細胞を遠心分離して再継代する必要はありません。私たちの実験室で培養すると、2日目までに細胞は通常、より多くの培地を持つより大きなフラスコに増幅することができます。細胞密度が8×105生細胞/mlに達すると継代が必要である。細胞密度が1×10（6）生細胞/mlを超えることは許されない。） 1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。 2.0.25%（w/v）トリプシン−0.53 mM EDTAを培養瓶に入れ（T 25瓶1−2 mL、T 75瓶2−3 mL）、37℃培養箱に入れて1−2分間消化し（消化しにくい細胞は適切に消化時間を延長することができる）、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり脱落すると、速やかに操作台に戻し、培養瓶を軽くたたいた後、3−4 mlの10�S含有培地を加えて消化を停止した。 細胞懸濁液を1：2の割合で新しいT 25瓶に分け、説明書の要求に従って配置された新しい*培地を6-8 ml添加して細胞の成長活力を維持し、その後の継代は実際の状況に基づいて1：2 ~ 1：5の割合で行った。 3）細胞凍結保存：細胞を受け取った後、前3世代の培養時に細胞種子を凍結保存し、後続の実験に備えることを提案する。 4）輸送用の培地（灌液培地）は細胞の培養には使用できません。説明書の細胞培養条件に従って新たに調製した＊培地と交換して細胞を培養してください。細胞を受け取った後、最初の継代提案T 25培養瓶1：2継代。 |
| l輸送形態 | 低温：（1）1 mL凍結保存管包装ドライアイス輸送、受け取った後-80度冷蔵庫で一晩保存した後、液体窒素に転入するか、直接回復し、もしドライアイスが揮発してきれいになり、凍結保存管キャップが脱落し、破損し、細胞に汚染があることを発見したら、すぐに私たちに連絡してください。 常温：（2）T 25瓶で回復した生存細胞を常温出荷し、受け取った後に細胞受信後の処理方法に従って操作する。 |
| l生物安全 | 1.すべての動物細胞は潜在的な生物危害性があると見なし、二級生物安全台内で操作しなければならない。そして、保護に注意して、すべての廃液とこの細胞に接触した容器は滅菌してから捨てることができる必要がある。 2.凍結保存細胞を回復する際には、保護手袋、衣類、保護マスクを着用することを推奨します。注意：凍結貯蔵管が液体窒素に浸漬すると漏れ、徐々に液体窒素が充満する。解凍時、液体窒素が気相に転化すると、容器が爆発したり、危険力で蓋を吹き飛ばしたりする可能性があり、舞い上がった屑が発生して人的被害を与える可能性がある。 |
