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アドレス
北京市海淀区
北京ノボラード科技有限公司
北京市海淀区
ノボライドDNA Quick Ligation Kit T 4原理ベクターその他
DNA高速接続キット
42110
ディレクトリ番号 |
ほうそうたんい |
42110-20 |
20回 |
42110-60 |
60回 |
コンコンポーーネント |
42110-20 |
42110-60 |
2 xラピッド接続緩衝液 |
100 米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
300 米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
Q 4 DNAリガーゼ、5 U/米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
100 U |
300 U |
製品保管:-20°C保存し、繰り返し凍結融解回数が多すぎることを避ける。
具体的な製品のパラメータは製品説明書を受け取ったパラメータを基準とする
製品の説明:本キットは室温(22°C)10分間の条件下で、DNA断片の接着端または平坦端接続反応を迅速に完了した。結合生成物は直接変換することができる。DNA断片クローン、ライブラリー構築、TAクローン、Linker接続などに使用できます。
特徴:高速、簡単、接着端平端はいずれも10分以内に接続反応を完了することができる。
操作手順:
1. C反応は以下のシステムで行った:
5 米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
2 xラピッド接続緩衝液 |
米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
ベクターDNA(30〜60 ng) |
米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
Insert DNA(担体モル数の3倍量、挿入および担体モル比3:1) |
米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
無菌水 |
1 米l(Weiss単位5個/米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
Q 4 DNAリガーゼ |
さいしゅうたいせき |
10米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット) |
一般的には最後にT 4 DNA Ligaseを加え、十分に混合し、瞬時に遠心分離して液体を管底まで収集することができる。
2. 22°C接続は10分間(一般的にはPCR機器で行うことができる)。
°C接続は5〜10分間、>3 kb長フラグメント接続は30分間に延長することができる。30分を超えることは推奨されず、超えると形質転換子の数が減少する可能性がある。
3.氷の上で冷却し、そのまま-20に転化または保存する°C
°C,転化する前に氷の上に置いて再び溶解し、十分に混ぜてから転化しなければならない。
説明:
1. 変換前にT 4 DNA ligaseを熱的に不活性化しないでください。そうしないと、変換効率が低下します。
2. DNA断片の体積は4より大きい米lの、2 xQuick Ligation Bufferを増加することができ、総反応体積は対応して20まで増加することができる米l,これにより、連結系により大きな体積のDNA断片を加えることができる。
DNA Quick Ligation Kit T 4原理ベクターその他