ジウレット法タンパク質含有量測定キット説明書

びりょうほう 100トン/96秒

注意：本測定前の選択 2-3 個の予想差異の大きいサンプルを予測し、蛋白質濃度が 1～10mg/ml 範囲を選択して設定できます。

測定意義：

試料可溶性タンパク質含有量はしばしば酵素活性計算に用いられる。また、可溶性タンパク質含有量は食品などの品質分析にも用いられる。

測定原理：

強アルカリ性溶液中では、ジウレタンと りゅうさんどう4 紫色錯体を形成する、タンパク質分子量及びアミノ酸成分は無関係であるため、タンパク質含有量の測定に用いることができる。この方法の測定範囲は 1~10mg タンパク質、タンパク質濃度の高いサンプル、特に動物材料に適しています。

ビウレア法タンパク質含有量測定キット−常備現品

構成：

標準品：液体 1ml×1 ボトル、5 mg/ml，4℃保存します。

機器や用品を持参する：

遠心分離機、可視分光光度計/酵素スケール、微量石英比色皿/96

具体的な製品のパラメータは製品説明書を受け取ったパラメータを基準とする

サンプル中の可溶性蛋白質抽出：

1、液体サンプル：無色液体試料は直接測定することができることを明らかにした。

2、組織サンプル：組織品質（g）：抽出液体積（ml）ために 1：5~10 のスケール（約定を取ることを提案する 0.1 g 組織する 1ml抽出液（自己準備、必要に応じて酵素抽出緩衝液又は蒸留水又は生理食塩水））

氷浴の均質化、8000グラム、4℃遠心 10min，上清を取る、すなわち測定液を待つ。（動物サンプルはしばしば希釈が必要である）

3 、細菌、真菌：細胞数（104）：抽出液体積（ml）ために 500～1000：1の割合（提案 500万細胞加入 1ml 電力 300w、超音波 3 秒、間隔 7 秒、合計時間 3分）そして 8000グラム

4℃、遠心分離 10分、上清を取って氷上に置いて測定する。

測定操作：

1. /酵素スケール予熱 30 分、波長を 540 ナノ、蒸留水をゼロに調整する。

2. ブランク管：取る 0.5mL EP チューブ、追加 40μl 蒸留水、200マイクロリットル 試薬一、混合後の室温静置 15 分，取る 200マイクロリットル 微量にガラス比色皿/96 オリフィスプレート、540ナノメートル 比色、と記すA. 空管

3. 取る 0.5mL EP チューブ、追加 40μl 標準液、200マイクロリットル 試薬一、混合後の室温静置 15 分，取る マイクロガラス比色皿比色、と記す A標準管。

4. 測定管：取る 0.5mL EP チューブ、追加 40μl 測定液、200マイクロリットル 試薬一、混合後の室温静置 15 分，取る 200マイクロリットル 微量に/96 オリフィスプレート、540ナノメートル 比色、と記すA. 測定管

注意：空管と標準管は1回測定するだけでよい。

サンプル中の蛋白質濃度計算式:

C 測定対象（mg/ml）=C ひょうじゅんかんA. 測定管−A. くうかん)÷（A） 標準パイプ-A. くうかん)

=5×（A 測定管−A. くうかん)÷（A） 標準パイプ-A. くうかん)

注意事項:

1. サンプルタンパク質濃度は 1～10mg/ml範囲内、未満 1mg/mlこの方法を使ってはいけない、より高い したがってプリセット用 1～2サンプルを用いて事前実験を行い、蛋白質濃度が 1～10 mg/mlの範囲内である。

2. 測定対象サンプルのタンパク質抽出は、生理食塩水、二重蒸水、またはタンパク質を含まない 公共放送サービス 抽出。この方法は硫酸アンモニウム、トリメチロールアミノメタン 緩衝液干渉、引上げ取液中にこれらの物質を含まないこと。その他の場合はBCAタンパク質含有量測定キット。

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