アルカリホスファターゼ（AKP/ALP）活性測定キット説明書

びりょうほう 100トン/48秒

本測定前に必ず取る 2-3 個の予想差異の大きいサンプルを予測決定する測定意義：

AKP/ALP 亜鉛含有糖プロテアーゼであり、アルカリ性環境中で各種天然及び人工合成されたリン脂質モノエステル化合物を加水分解することができる。

AKP/ALP 人体の各臓器に広く分布し、肝臓を主とする。

測定原理：

アルカリ性環境では、AKP/ALP 触媒リン酸フェニル二ナトリウムによる遊離フェノールの生成、フェノールと 4-アミノアンチピリンとフェリシアンhuaカリウムは赤色亜キノン誘導体は、 510ナノメートル特徴的な光吸収、測定による 510 nm吸光度増加率を計算する正義と発展党活性。

アルカリホスファターゼ活性測定キットエステラーゼシリーズ

構成：

試薬四：液体×1 ボトル、4℃遮光保存は、青緑色にならないまで使用できます。標準品：液体×1 支（EP チューブ内）、2 μmol/ml フェノール標準液、4℃保存します。

自己準備機器と用品：

可視分光光度計/酵素スケール、微量石英比色皿/96 オリフィスプレート、卓上遠心分離機、水浴釜、可変ピペット、蒸留水。

具体的な製品のパラメータは製品説明書を受け取ったパラメータを基準とする

粗酵素液抽出：

1. 組織：組織品質（グラム）：試薬一体積（ml）ために 1：5~10のスケール（約定を取ることを提案する 0.1 g組織する 1mlしやく一）氷浴の均質化を行い、4℃、8000グラム遠心 10分、上清液を取って測定する。

2. 細菌または細胞：細菌または細胞数（104 個）：試薬一体積（ミリリットル）ために 500~1000：1 のスケール（提案 500 万細胞添加 1ml試薬一）、氷浴超音波破砕細胞（電力 300w、超音波 3 秒、間隔 7 秒、合計時間 3分）；そして 8000グラム，4℃、遠心分離 10分、上清を取って氷上に置いて測定する。

3. 血液は直接測定することができ、または適切に希釈して測定することができる。

測定手順：

1. 分光光度計/ 30分、波長を 510 ナノ、蒸留水をゼロに調整する。

2. 試薬3セット 37℃水浴中予熱 30 分。

3. ブランク管：取るEP チューブ、追加 4μl 蒸留水、40μl 試薬二、40μl 試薬3、混合後に置く 37℃水浴中保温 15分；試薬を入れる4 120マイクロリットル、ブレンド後 510ナノメートル吸光度を測定し、A.空管

4. 標準パイプ：取るEP チューブ、追加 4μl 標準品、40μl 試薬二、40μl 试剂三，混匀后置于 37℃水浴中の保温 15分；

試薬を入れる4 120マイクロリットル、ブレンド後 510ナノメートル 测定吸光度，记为A. 標準管

5. 照合管理：取るEP チューブ、追加 4μl 上清液、40μl 蒸留水、40μl 試薬3、混合後に置く 37℃水浴中の保温 15分；試薬を入れる4 120マイクロリットル、ブレンド後 510ナノメートル吸光度を測定し、A.測定管

6. 測定管：取るEP チューブ、追加 4μl 上清液、40μl 試薬二、40μl 試薬3、混合後に置く 37℃水浴中の保温 15分；

試薬を入れる4 120マイクロリットル、ブレンド後 510ナノメートル 吸光度を測定し、A. 測定管その中で標準管と空白管は1管を作るだけで、測定管と対照管はすべて行う必要がある。

注意：空管と標準管は1回測定するだけでよい。

AKP/ALP 活性計算：

1. 血液中AKP/ALP 活力計算

活性単位の定義：37℃中1ミリリットル当たりの血液は毎分触媒産生する 1μmol 1 個の酵素活性単位。

AKP/ALP 活力（μmol/min /ml）= C 標準品A. そくていかんA. 照合管理)÷（A） ひょうじゅんかんA. くうかん五、 反総] ÷五、 様

÷T=6.8×（A そくていかんA. 照合管理)÷（A） ひょうじゅんかんA. くうかん)

2. 組織、細菌、または細胞中AKP/ALP かっせいけいさん

（1）蛋白質濃度で計算

活性単位の定義：37℃中の1 mg当たりのタンパク質の1分当たりの触媒産生 1μmolフェノールとは 1 個の酵素活性単位。 アルカリホスファターゼ/アルカリホスファターゼ（μmol/min/mg prot）=[C 標準品A. そくていかんA. 照合管理)÷（A） ひょうじゅんかんA. くうかん五、 反総]÷（Cpr×V様)÷T=6.8×（AそくていかんA.照合管理)÷（A）ひょうじゅんかんA.くうかん)÷Cpr

（2）サンプル品質に基づいて計算

活性単位の定義：37℃中の組織グラム当たり毎分触媒生成 1 μ モル フェノールとは 1 個の酵素活性単位。

AKP/ALP(μmol/min/g 鮮重C 標準品A. そくていかんA. 照合管理)÷（A） ひょうじゅんかんA. くうかん五、 反総]÷（W×V 様÷Vサンプル)÷T=6.8×（AそくていかんA.照合管理)÷（A）ひょうじゅんかんA.くうかん)÷W

（3）細菌または細胞数に基づいて計算する

活性単位の定義：37℃の各関数 10⁴ 個の細菌または細胞が毎分触媒産生する 1μmolフェノールとは 1 個の酵素活性単位。AKP/ALP（μmol/min/10）⁴ 細胞)=C 標準品A. そくていかんA. 照合管理)÷（A） ひょうじゅんかんA. くうかん五、 反総]÷(細胞数五、 様÷V サンプル)÷T=6.8×（AそくていかんA.照合管理)÷（A）ひょうじゅんかんA.くうかん) ÷細胞数

C 標準品：2μmol/ml；五、 反総：反応系総体積（ミリリットル），205μl=0.205ml； 心肺蘇生術：粗酵素液蛋白質濃度（米グラム/mアルファベットl（英語アルファベットの12番目のアルファベット）），別途測定が必要であり、自社製のものを使用することを推奨している。（1）：（2）：（3）：（3）：（3）（3）（3）（3）（3）（3）（3）（3） 商業信用分析タンパク質含有量測定キット、W ：サンプル品質、五、サンプル：反応系中の上清液体積（ミリリットル），0.004ml；五、サンプル合計：抽出液体積、1ミリリットル；T：反応時間（分），15分。

注意事項：

1. 試薬2、試薬3、試薬4はいずれも光を避けて保存する必要がある。

2. 試薬は青緑色になってから使用することはできません。

3. 試薬4を添加した後、すぐに混和しなければならない。そうしないと発色が悪くなる全（ぜん）。

アルカリホスファターゼ活性測定キットエステラーゼシリーズ