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北京市海淀区
北京ノボラード科技有限公司
北京市海淀区
酸性ホスファターゼ(自動コントロールパネル)活性測定キット説明書
びりょうほう 100トン/48秒
自動コントロールパネル 酸性条件下でリン酸モノエステルの加水分解を触媒することは無機リン酸と呼ばれ、マクロファージの溶存酵素体内によく見られる。自動コントロールパネル 前立腺癌の補助診断によく用いられる。
酸性環境では、ACP 触媒p-ニトロベンゼンリン酸二ナトリウム加水分解生成 4-ニトロbenフェノール、405ナノメートル 特徴的な光吸収、測定に合格する定(てい)405ナノメートル吸光度増加率を計算する自動コントロールパネル活性。
製品名 |
DB6006-100T/48S |
ストレージ |
試薬一:液体 |
60ml×2 |
4℃ |
試薬二:液体 |
50ml |
4℃ |
試薬三:液体 |
50ml |
4℃ |
取扱説明書 |
ひとつ |
|
自己準備機器と用品:
酵素スケール、96 オリフィスプレート、卓上遠心分離機、水浴釜、可変ピペット、蒸留水。
具体的な製品のパラメータは製品説明書を受け取ったパラメータを基準とする
1. 組織:組織品質(グラム):試薬一体積(ml)ために 1:5~10 のスケール(約定を取ることを提案する 0.1 g 組織する 1ml しやく一)氷浴の均質化を行い、4℃、10,000 g遠心 10分、上清液を取って測定する。
2. 細菌または細胞:細菌または細胞数(104 個):試薬一体積(ミリリットル)ために 500~1000:1 のスケール(提案 500 万 1ml 試薬一)、氷浴超音波破砕細胞(電力 300w、超音波 3 秒、間隔 7 秒、合計時間 3 分);そして 10,000 g,4℃、遠心分離 10分、上清を取って氷上に置いて測定する。
3. 血液は直接測定することができ、または適切に希釈して測定することができる。
1. 酵素スケール予熱 30 分、波長を 405 ナノ。
2. に EP チューブに以下の試薬を加える
試薬名(μL) |
そくていかん |
照合管理 |
サンプル |
10 |
10 |
||
試薬1 |
90 |
990 |
||
試薬二 |
900 |
|||
30℃遮光保温 30 分 | ||||
試薬3 |
400 |
400 |
||
かき混ぜる 200µL 加入 96 オリフィスプレートには、405 ナノ 下に各管の吸光値を測定した。ΔA=A そくていかんA. 照合管理
注意:測定管ごとに1つの照合管理を行う必要があります。
ひょうじゅんきょくせん y =7.3336x +0.0179;R2 =0.9996;X は標準品濃度(μmol/ml),y 吸光値ΔA。
1. 血液中自動コントロールパネル かっせいけいさん
活性単位の定義:30℃中1ミリリットル当たりの血液は毎分触媒産生する 1μmol 4-ニトロbenフェノールは 1 個の酵素活性単位。
自動コントロールパネル 活力(μmol/min/ml)=(ΔA-0.0179)÷7.3336 五、 反総÷T÷V 様
= 0.4545 ×(ΔA-0.0179)
2. 自動コントロールパネル かっせいけいさん
(1)蛋白質濃度で計算
活性単位の定義:30℃中の1 mg当たりのタンパク質の1分当たりの触媒産生 1 μmol 4-ニトロbenフェノールは 1 個の酵素活性単位。
自動コントロールパネル 活力(μmol/min/mg タンパク質)= (ΔA-0.0179)÷7.3336 ×五、 反総÷T÷(V 様×Cpr)
=0.4545 ×(ΔA-0.0179)÷Cpr
(2)サンプル品質に基づいて計算
活性単位の定義:30℃中の組織グラム当たり毎分触媒生成 1 μ モル 4-ニトロbenフェノールは 1 個の酵素活性単位。
自動コントロールパネル 活力 (μmol/min/g 鮮重)=(ΔA-0.0179)÷7.3336 五、 反総÷T÷(W×V 様÷V サンプル)
= 0.4545 ×(ΔA-0.0179)÷W
(3)細菌または細胞数に基づいて計算する
活性単位の定義:30℃の各関数 104 1 μ mol 4-ニトロbenフェノールは 1 個の酵素活性単位。
自動コントロールパネル 活力(μmol/min/104 バッテリ)=(ΔA-0.0179)÷7.3336 五、 反総÷T÷(細胞数五、 様÷V サンプル)
=0.4545 ×(ΔA-0.0179)÷細胞数
五、反総:反応系総体積(ミリリットル),1ml; W :サンプル品質、グラム; 五、 サンプル:反応系に添加したサンプル体積(米アルファベットl(英語アルファベットの12番目のアルファベット)),
0.01ミリリットル;五、 サンプル合計:抽出液体積、1ml;T:反応時間(分),30 分;500:細胞または細菌の総数、500 万です。
自動コントロールパネル 不稳定,尤其在 37℃和pH値 より大きい 7 の条件下で活力喪失が速いため、酸性ホスファターゼサンプルは一般的に当日準備する必要がある、血清サンプルに、血清1ミリリットル当たり 10mgクエン酸水素二ナトリウム又は 5mg硫酸水素ナトリウムpH値 6.5 以下、または 5ml血 30%酢酸溶液 2~3 ドロップ 4℃保存可能 1 週。