高圧滅菌器による滅菌効果の検証

高圧滅菌器による滅菌効果の検証

微生物実験室では欠かせない実験機器の一つが滅菌器であり、一般的な実験室でよく使われるのは高圧蒸気滅菌器である。規程は実験設備に定期的に検査及び/又は検定（マーク貼付）、メンテナンス及びメンテナンスを行い、作業性能と操作安全を確保することを要求する。あなたの滅菌器は似たような校正や検証をしたことがありますか。具体的な方法はどうでしょうか。次に、高圧蒸気滅菌器による滅菌効果の検証について見ていきましょう。

高圧滅菌器による滅菌効果の検証一般的には化学指示剤法、留点温度計法、自製測温管法、生物指示剤法があり、各方法の原理は類似しており、主に滅菌時の滅菌器内の温度が要求に達するかどうかを検証することによって。私たちは自分の実験室の具体的な状況に基づいて1つ以上の方法を選択して検証することができます。

一、化学指示剤法の原理：

化学指示剤は一定の温度と作用時間で、熱によって変色したり変形したりすることがあり、この特徴に基づいて必要な滅菌パラメータに達するかどうかを判断する。一般的な実験室でよく使われているのは3 M圧力滅菌指示テープで、この指示テープは滅菌前後のテープの色の変化を利用して滅菌効果を判断する。それは感熱化学物質と発色剤と塗料添加剤からインクを製造し、そしてインクをストライプ状に特製の片面テープに印刷して製造した。指示テープは直接包装外に貼り付けることができ、長さは5 cm以上で、粘着性と包装効果を高めるためにテープを軽く押してください。121℃で20 minまたは130℃で4 min継続すると、テープに印刷された斜行の白い指示線が黒くなり、黒い線になります。変色が不均一であれば、この包みは滅菌条件に合わないと考えられる。

二、留点温度計法の原理：

留点温度計法は水銀温度計の還流しない特性を利用し、その原理は伝統的な体温計と似ており、滅菌器が滅菌過程で最高温度に達したことを示すことができる。検証時に水銀温度計を水を入れる大三角瓶に入れ、滅菌時に三角瓶を滅菌器の上部と下部に置き、滅菌が終わったら水銀温度計の温度と要求温度が一致するかどうかを見る。この方法は温度を検証することしかできず、滅菌時間が要求に達しているかどうかを指示することはできないので、滅菌器検証の比較的低い基準である。

三、自作測温管法の原理：

いくつかの化学薬品が熱溶融されてから冷却され、結晶の外形が異なる特性を利用して、化学薬品を小さなガラス管に密封し、滅菌時に滅菌器に入れ、滅菌後に結晶の形状を観察すれば、温度が基準を達成したかどうかを判断することができる。一般的な試薬は安息香酸で、安息香酸の融点は121-123℃で、私たちが要求している滅菌器の滅菌温度と基本的に一致しているので、滅菌時に固体安息香酸を小さなガラス管に密封して滅菌器に入れ、滅菌が終わると安息香酸の状態を観察して滅菌器が要求温度に達したかどうかを検証することができる。この方法の限界は留点温度計法と同じで、滅菌時の温度を指示するしかなく、滅菌時間が要求に達しているかどうかは判断できない。

四、生物指示剤法の原理：

指示菌として非病原性の好熱脂肪桿菌の芽胞を用いて、熱間滅菌の効果を測定した。好熱脂肪桿菌の芽胞は熱に対する耐性が強く、その耐熱能力は病原微生物肉毒クロストリジウム芽胞と似ており、これを指示菌として、滅菌器が滅菌要求に達するかどうかを検証する。生物学的指示剤は、芽胞懸濁液、芽胞菌片、菌片、培地混合指示管の3種類に分けられる。一般的に滅菌容器に置かれる5つの点：下層の前、中、後と上層、中層の中央点。滅菌後、指示剤を用いてブロモクレゾール紫−グルコサミンペプトン水に接種し、55−60℃で2−7日間培養し、培地が澄みきり、色に変化がなければ芽胞が殺され、滅菌器の滅菌効果が良好であることを示した。培地が黄色に濁っている場合は、芽胞が殺菌されておらず、滅菌器の滅菌効果が不合格であることを示している。芽胞懸濁液と芽胞菌片の検証方法はいずれもそうだ。

現在、実験室ではよく商品化された生物指示管が用いられており、その原理は芽胞懸濁液と芽胞菌片と同じであり、指示管には好熱脂肪芽胞菌芽胞と培養液ガラス小管があり、指示管を滅菌容器内の各点に置き、高圧滅菌後、管中の培養液を入れたガラス管を押しつぶし、培養液は内部の小管から放出され、56℃培養箱に入れて培養し、同時に陽性対照を行った。滅菌器の滅菌効果が不合格であれば、管内の芽胞が復活すると生長が変化することを指示する肉汁の色は肉汁が黄色になること、滅菌器の滅菌効果が良好であれば管内芽胞は不活性化されて成長せず、肉汁は元の紫色のままである。滅菌器の効果検証については、現在、関連基準の厳格な要求検証の頻度はないが、実験室は自ら検証頻度規定を制定し、厳格に要求に従って行わなければならない。操作性と検証結論の2つの方面から出発して、編集者は指示テープと生物指示管の使用を推薦して、この2つの方法は操作が簡単で、滅菌効果に対して全面的な検証を行うことができるためです。

付属：滅菌時の注意事項（一部の輸入の全自動滅菌鍋は排気を考慮しなくてもよい）

高圧蒸気滅菌器を使用する場合、まず蒸気を開放すると同時に、滅菌器内の冷気を排除することに注意しなければならない。排気孔を閉じるには、器内の冷気をすべて取り除く必要があります。もし滅菌器内に空気の一部が残っている場合、圧力計はある圧力値に達しているが、器内の温度はまだ相応の度数に達していない。残っている空気が多ければ多いほど、両者の差も大きくなり、器内の温度が不足し、滅菌効果が影響を受ける。