汎用TベクターコロニーPCR同定キットT 4原理ベクター

汎用TベクターコロニーPCR同定キット

汎用TベクターコロニーPCR同定キットT 4原理ベクター

ディレクトリ番号：42015

キット組成、保管、安定性：

保管：-20 ℃ 保存。

製品紹介：

コロニーポリメラーゼ連鎖反応鑑定YesTベクタークローン接続後に陽性クローン（挿入フラグメントを含む）があるかどうかを確認するためのzui便利で迅速な方法。しかし市販のコロニーはポリメラーゼ連鎖反応鑑定キットはすべてT3、T7またはSP6とう特異Tキャリアプライマー、特定の用途にのみ使用可能Tベクター結合陽性クローンの同定。使用が異なる場合T担体は、複数の鑑定キットを同時に購入する必要があり、使用コストが大幅に増加します。当社は汎用を採用しているTキャリアプライマー開発の共通Tベクターコロニーポリメラーゼ連鎖反応キットを鑑定し、キットを1種類購入するだけで、市販のすべての一般的なTキャリア(含むpGEM，pUC，pBluescriptシリーズ)接続陽性クローンの同定。また、T3、T7またはSP6做引物的菌落ポリメラーゼ連鎖反応キットプライマーを同定する距離は挿入部位からの距離が非常に短いため、同定100ベーシスポイントプライマー二量体のストリップを陽性増幅ストリップと見なし、偽陽性を引き起こすことが多い。逆に偽陰性を引き起こす。本キット共通T断片が挿入されていない場合のキャリアプライマーの距離は、少なくとも150 bp偽陽性または偽陰性を回避し、正確性を大幅に向上させた。当社が開発した携帯用チューブPCR MasterMix予混合システムでは、各成分を1つずつ加える必要はなく、直接単コロニーを選別する必要があり、1時間ほどのポリメラーゼ連鎖反応反応と電気泳動検査は組換えコロニー同定の結果を得ることができる。

予想される増幅フラグメント：

注意事項：

1. 組換えコロニーの鑑定時、単コロニーを採取する前に、まず標識をしっかりと行い、鑑定後の使用に便利である。

2. コロニーを採取する際は、影響を与えないように、単一コロニーを選択しなければならない。ポリメラーゼ連鎖反応結果。

3. 設定PCRプログラムの場合は、挿入クリップのサイズが1 kb以下、延長時間30-45

操作手順（25米アルファベットl（英語アルファベットの12番目のアルファベット）システムの例として、お客様も採用できます20米アルファベットl（英語アルファベットの12番目のアルファベット）システム）：

C1. プライマーを含む1 x Taq MasterMix反応液

2. 一晩培養した平板上のコロニーを番号付けした後、滅菌したガンヘッドを用いて単コロニーの一部を採取して上記反応液に加え、吹付け混和してコロニーを反応液中に十分に分散させた。

実験結果の分析を容易にするために、コロニーを添加しない陰性対照を1本多く設置することができる。

3. 将（しょう）ポリメラーゼ連鎖反応チューブを熱循環器に配置し、以下の条件で反応を開始します。推奨条件は次のとおりです。

94℃10分

94℃30秒

55℃30秒30～33サイクル

72℃0.5～1分

72℃5分

事前変性時間が10分、主にコロニーを分解し、放出するためにデオキシリボ核酸テンプレート。

反応終了後、5-10米アルファベットl（英語アルファベットの12番目のアルファベット）直接サンプリング電気泳動検出。

注：細菌が分解しにくい場合、または不純物が多偽陰性である場合、次の方法を試して、分解放出デオキシリボ核酸後に実行します。

1. コロニーを採取して加える 50米l dd水（または10米l dd

2. 99度、10分で菌液中の酵素を不活化し、放出するデオキシリボ核酸。

3. 12000回転/分遠心1分で細胞の破片を除去する。

4. 上清を取るポリメラーゼ連鎖反応，25米l PCRシステム5米アルファベットl（英語アルファベットの12番目のアルファベット）上清（開始）50米l dd水）、または1米アルファベットl（英語アルファベットの12番目のアルファベット）上清（開始）10米l ddテンプレートを作る。

汎用TベクターコロニーPCR同定キットT 4原理ベクター