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アドレス
広州市越秀区先烈中路69号東山広場3002、3003、3011室
概要
RiboNAT迅速無菌検査キット。$r$n注射用薬の安全性検査では、多国籍薬局方が規定する無菌検査法は少なくとも14日間培養する必要がある。しかし、いくつかの細胞治療は生産後数日以内に患者に注入しなければならず、これにより、投与前に無菌検査を完了することが困難になり、これにより、より迅速に結果を提供することができる無菌検査方法の需要が日増しに増加し、患者の安全性を向上させることができるようになった。
製品詳細
RiboNAT™ 迅速無菌検査キット
注射用薬の安全性検査では、多国籍薬局方が規定する無菌検査法は少なくとも14日間培養する必要がある。
RiboNAT™ 核酸増幅検査（NAT）技術を用いた高速無菌検査キットであり、わずか7時間で検査を完了でき、従来の方法に比べて検査時間を大幅に短縮した。従来のNAT検出による微生物のみを対象としたゲノムDNAとは異なり、RiboNAT™検出されたのはリボソームRNA（rRNA）である。微生物中のrRNAの含有量が高いため、検出がより鋭敏になる。同時に、伝統的な方法は死菌残留DNAや環境及び材料中の汚染DNAにより偽陽性を招きやすいが、RiboNAT™ 効果的にこの問題を減らし、検査の正確性を高めた。
◆特徴
●検査当日に結果を得ることができる（約7時間）
●rRNAリアルタイム逆転写PCR法（RT-rt PCR）を用いて検査し、感度（9 CFU/mL）はgDNA検査より高い
・多種類の細菌（好気性と嫌気性）と真菌を一度に同時に検出できる
◆実験フロー
◆検査キット規格
◆キット組成
◆感度検出
図1.検出感度
薬局方規定の6種類の微生物に対して、濃度9 CFU/mLの微生物懸濁液を調製した。RiboNATを利用する™これらの懸濁液からRNAを抽出し、リボソームRNA（rRNA）を検出した。
図2.細胞懸濁液サンプルにおける検出感度
薬局方規定の6種類の微生物に対して、濃度9 CFU/mLの微生物懸濁液を調製し、それぞれ0.25×106 cells/mLのHEK 293細胞を混合した。RiboNATを利用する™混合懸濁液からRNAを抽出し、rRNAを検出した。すべての微生物のrRNAの検出に成功し、Ct値は35未満であった。
また、6株すべてが以下の条件で検出された（データは示されていない）：
・間葉性幹細胞（MSC）：0.5×106細胞
・T細胞：1.0×106細胞
◆より感度の高い検出法
■菌濃度：2 CFU/mL
■インキュベーション時間：3 ~ 15時間
図3.より感度の高い検出方法
ブラジルアスペルギルス（Aspergillus brasiliensis）、クロストリジウムスポロゲン（Clostridium sporogenes）及びアクネプロピオン酸桿菌（Cutibacterium acnes）に対して、濃度：2 CFURiboNATは™通常の操作手順で規定されているインキュベーション時間は3時間であるが、この実験はインキュベーション時間を3〜15時間に遅延させた。インキュベーション終了後、RiboNATを使用™RNAを抽出し、rRNAを検出します。その結果、厳格な嫌気菌（クロストリジウム産生）と成長が遅い細菌（アクネプロピオン酸桿菌）を含む3種類の菌株は、14時間以上のインキュベーション後にすべて検出に成功し、Ct値はいずれも35未満であった。
◆偽陽性を下げる
RiboNAT™ 死菌DNA不活化剤及びDNase処理工程を含み、サンプル中の残留DNAによる偽陽性リスクを効果的に低減することができる。
図4.偽陽性の低減
市販の無菌PBSを試験サンプルとして用いて、細菌核酸検出（NAT）を行った。もう1組の実験（下図）、RiboNATを使用™RNAを抽出し、その後リアルタイム逆転写蛍光定量PCR検査を行った。DNAベースの方法では6本の増幅曲線が観察されたが、RiboNATを用いて™増幅信号は検出されなかった。
◆製品リスト
