組織固定液FM Fix

組織形態と抗原安定性を維持し、優れた染色性を備えた

組織固定液FM Fix

組織固定は生物サンプルを保護する重要なステップであり、サンプルの自己分解や腐敗による分解を効果的に防止し、組織を構成するタンパク質などの成分を安定的に維持することができる。組織固定において、ホルマリン固定は顕微鏡標本などの科学研究や病理検査などのシーンに広く応用されているが、一部のタンパク質の立体構造や抗原安定性に影響を与え、染色性の低下などの問題を引き起こす。

FUJIFILMワコは名古屋大学腎臓内科古橋和拡教授が開発した技術に基づいて、組織形態と抗原安定性を維持でき、組織染色性に優れた固定液FM Fixを開発した。

◆組織固定液の役割と問題

組織固定方法の中で、ホルマリン固定は顕微鏡標本、科学研究及び病理検査などの場面に広く応用されているが、この方法は部分蛋白質の立体構造と抗原安定性に影響を与え、染色性の低下を招く。そのため、実験目的に応じて固定液を選択する必要がある。

◆製品概要

FM Fixは組織形を維持し、抗原安定性を維持し、組織染色性に優れた固定液である。本製品は様々な目的の組織固定に適用される。

◆組織固定用FM Fix（L）

本製品は組織形態、蛋白質立体構造及び組織染色性の維持に優れた固定液である。組織が固定化されると、タンパク質の立体構造が維持されやすくなり、補体などの抗原を安定して検出することもできる。また、その特性にはGFPなどの蛍光タンパク質信号が弱まりにくいことも含まれているため、組織の透明化に適している。

特徴

・補体蛍光免疫染色において、凍結後にアセトン固定を超える染色効果がある

●固定後、GFPなどの蛍光タンパク質信号が弱まりにくい

●組織透明化技術への適用SeeDB 2の組織固定

●insituハイブリダイゼーション（ISH）技術によるRNA検出に適した固定

じっけんデータ

▼マウス大腿骨の免疫組織染色

＜データ提供＞名古屋大学大学院医学系研究科病態内科学腎臓内科古橋教授

マウスに蛍光標識抗Sca 1抗体とIsolectin GS-IB 4を静注注射し、1時間後にFM Fix（L）を用いて灌流固定を行い、その後大腿骨を取り出した。採取したサンプルはFM Fix（L）固定液により4°C、遮光条件下で2日間固定した。最後に薄いカットを行い、骨格構造全体を観察します。

◆組織固定用FM Fix（s）

本製品は最適化された、針吸引生検などの小型組織サンプル及び浸透性の良い組織に専用の固定液である。

特徴

●針吸生検査などの小型組織及び透過性の良好な組織への適用

●組織形態や抗原安定性を維持でき、染色性に優れている

●本製品を固定して凍結保存した組織は、解凍後にPeriodic Acid Schiff（PAS）染色、Periodic Acid-Methenamine-Silver（PAM）染色及びMasson-Trichrome（MT）染色に用いることができる。

データの適用

▼ヒト腎生検の組織染色（HE、MT、PAM、PAS染色）

16 G生検zhenを用いて腎組織を採取し、FM Fix（s）を用いて4°Cで1日固定した。その後、パラフィン包埋、フレークを行った後、蘇木精−伊紅（HE）染色、Periodic Acid Schiff（PAS）染色、過ヨウ素酸六アミン銀（PAM）染色及びMasson−Trichrome（MT）染色を順次行った。

【結果】

10%中性ホルマリンに比べて、FM Fix（s）は組織の構造をより良く維持している

▼CX3CR1-GFPマウス腎肝臓蛍光免疫組織染色

＜データ提供＞名古屋大学大学院医学系研究科病態内科学腎臓内科古橋教授

CX 3 CR 1-GFPマウスにIsolectin GS-IB 4 Alexa Fluor 30µgを静注^®647、30分後に腎臓を摘出した。その後、腎臓をシェービングブレードで約2 mmの小塊に切断し、本製品を用いて固定した（24時間、4°C、遮光）。固定後の組織を30%ショ糖溶液で置換し、O.C.T.包埋剤で包埋した後、−30°Cで保存した。その後、冷凍スライサーで薄く切り、1時間風乾燥し、0.1%トリトンで洗浄した。最後に錠剤をDAPIで封止し、顕微鏡下で観察した。

*Alexa Fluor^®Invitrogenの登録商標です

【結果】

FM Fix（s）固定液では、GFPタンパク質の蛍光信号は弱まらず、抗GFP抗体を使用する必要もなく、直接GFP信号を検出することができる

◆製品リスト