MTS細胞増殖検査キット

MTS細胞増殖検査キットMTSは新しいテトラゾール塩であり、生細胞ミトコンドリア内のコハク酸脱水素酵素によって水に溶解した生成物であるフォルマッサンに還元することができる。メチルアミンは490 nmで特異的に吸収されるので、490 nmでの吸光度を測定することで細胞増殖を反映することができる。細胞増殖が速いほど吸光度値が高くなる。
一般的なMTTキットと比較して、本キットは既存の培地を除去する必要はなく、また別途溶媒を用いてメチルアミンを溶解する必要もなく、使用はより便利であると同時に、培地を除去する際にメチルアミンの一部を持ち去ることによる実験誤差を回避することができる。本キットは非常に柔軟に使用されており、検査後もインキュベーションを続けて、より良い発色結果を得ることができます。また、本キットは線形範囲が広く、感度が高く、使用が安全であるなどの利点もある。
製品構成要素：

実験操作：
1、MTS作動液の調製：
MTS SolutionとPMS Solutionを20：1の割合で混ぜるとMTS作動液になります。
注意：MTS SolutionとPMS Solutionは光を見ても分解しやすいので、調製中も使用中も光を避ける必要があります（錫紙で包むことができます）。頻繁に使用する必要がある場合は、本キットを4°Cに保存したい場合は、検査前に毎回MTS作動液を調製しなければならない。調製された未使用のMTS作動液は-20°Cで遮光保存する必要がある。
2、細胞培養：
細胞をウェルプレートなどの適切な容器に接種する。96ウェルプレートについては、1ウェル当たり100 uL培地を添加することを提案するとともに、1ウェル当たり5〜100×10の接種を提案する3個の細胞。実験設計に基づいて興味のある薬物で実験群の細胞をしばらく処理することができ、その際に空白群（培地のみ含む）と対照群（培地、細胞と薬物溶媒を含む）を別途設立する必要がある。
注意：具体的な1ウェル当たりの接種細胞数は、具体的な細胞種に応じて調整することができる。

各ウェルに20 uLのMTS作動液を添加し、その後細胞培養箱に入れて1〜4時間インキュベートした。
注意：MTSインキュベーション時間は具体的な実験に基づいて調整することができる。
4、検査：
490 nmの酵素スケールを用いて吸光度（A）を測定した。490 nmフィルタがなければ、450〜540 nmフィルタを選択して使用することができる。
5、データ分析：
細胞生存率の計算式は以下の通りである
細胞生存率（%）＝[（A実験グループA.ブランクグループA.対照群A.)] ×100

1、細胞を長時間培養すると、96ウェルプレートの縁孔に液体蒸発の問題が発生しやすい。96ウェルプレートの周囲を1周捨て、無菌水、培地またはPBSを改加することを提案する。同時に96ウェルプレートを培養箱の水源に近い場所に置くことができる。
2、MTS SolutionとPMS Solutinは低温で凝固するので、使用前に室温または37℃の水浴に約10 min戻してwanが完全に融解するまで使用してください。
3、MTS SolutionとPMS Solutionは光照射に敏感で、4°Cで保存すると溶液の色が少し変化する可能性があり、この変化は本底の吸光度値を上昇させる可能性があるが、最終的な実験結果には影響しない。
4、適時に検査できなければ、ステップ3のインキュベーション終了後に各ウェルに25 uLの10%SDS停止反応を添加することができる。SDS処理後のオリフィスプレートは設置可能
培養箱に18 hを超えないように遮光保存した。

キットを-20°Cで保存し、光と水分から離れて1年間安定させた。頻繁に使用する場合、このキットは4°Cで光を避けて湿気を防ぎ、6週間安定して保管することができる。