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アドレス
上海市浦東新区新浩路58号申江科創園18棟
CTF-LTM 2 D蛍光細胞の活力検出キット
| 製品説明 | ||||||||||||||||
| 記述 |
細胞活性検出には、染料排除、ATP濃度変化、酵素活性変化などの様々な方法がある。細胞検出は時に細胞毒性のメカニズム研究及び/又は内参対照の設立を必要とし、それにより多重(multiplex)分析需要を発生し、即ち同一サンプルに対して多種の分析方法で検出し、互いに検出メカニズムが異なり、互いに干渉しない、このように相関比較を行うことができ、それにより細胞毒性のメカニズムを明らかにし、或いはシステムの違いを排除することができる。海外のCellTiter Fluor(CTF)クラスの製品は、このような原理に基づいて設計されています。当社は独自に同類の蛍光細胞活力測定キット(Fluorescent Cell Viability Assay Kit)を開発し、性能面では海外ブランド品と明らかな差はなかった。本製品は生きた細胞内のプロテアーゼによるポリペプチド−蛍光基基質生成物の分解に基づいて、蛍光信号を生成する。細胞膜の完全性が損なわれると、このプロテアーゼは基質の分解活性を失い、蛍光信号を生成しない。CTF-L商標ルシフェラーゼキットの検出原理と異なり、検出方法も異なり、その検出感度はルシフェラーゼ法に劣るが、より早期の軽微な細胞障害を検出することができ、2つの検出は適合性がよく、multiplex検出を行うことができる。
製品の特徴: 1、性能 検出信号、Window,感度と特異性は海外ブランドの同類製品と類似している。 2.互換性 CTGなどの常用分析試薬と適合し、相互影響を形成しない。 3、特徴 細胞早期膜損傷に対してより敏感である。 4、便利 「添加-混合温育-検査」は、実験手順全体が簡単で操作しやすい。 製品構成: プロテアーゼ基質、緩衝液を混合した後、10 mL又は100 mLのブラウンボトル及び2 mlチューブに充填し、規格は以下の通り:
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| 使用方法 |
1、細胞準備:
(1)96ウェルまたは384ウェル細胞培養プレートに適切な密度の被検細胞を敷設する。黒板を使用することをお勧めします(発光試薬と併用する場合は、白板を選択できます)。 (2)被検化合物を準備する。適切な濃度の被検出化合物を細胞板孔に添加した。培養液中の有機溶媒濃度は1〜2%以下に維持した。未添加化合物の対照群を設定した。 2、細胞活力検査: (1)CTF-Lを取り出す商標細胞活性検出試薬は、CTF緩衝液wanが完全に溶解した後、室温まで平衡した。CTF基質渦振動によりche底が均一になり、CTF基質を瞬時に遠心分離して管底に収集する。 (3)測定対象細胞培養プレートを取り出し、各ウェルに等体積のCTF反応液、例えば100μl培養液を100μl 1 x CTF反応液に添加する。 (4)低速振動板を20秒間混合し、遮光37℃で60 min反応した後に蛍光検査を行う。CTF基質に対する細胞の切断速度によって異なり、最適なリードタイムは細胞に応じて最適化される必要がある。最速では試薬を入れてから30分後に読取り板を行うことができる。一般的には、ボードを60分以上後に読み込むと、信号対雑音比が高くなります。リードボード時間は最長3 hrを超えないことをお勧めします。 (5)蛍光読取板計上で蛍光信号を読み取り、励起光Ex 380−400 nm、発光光Em 505 nm。 (6)必要に応じて、Caspases 3/7細胞アポトーシス検出などの下流の多重分析を継続する。 |
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| 注意事項 | 1、初めて使用した後、基質を-20℃に分けて保存することを提案し、毎回新鮮に反応液を調製する。 |
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| 基本情報 | ||||||||||||||||
| 保存/保存方法 | -20℃以下の遮光貯蔵、有効期間12ヶ月。 |