豚大動脈内皮細胞

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製品名：豚大動脈内皮細胞

組織ソース：大動脈組織

製品仕様：5×105細胞/T 25細胞培養瓶

育成情報：

パッケージ被条件フェーズロックリング（0.1mg/ml)、ゼラチン（0.1%）

培地含有量子牛血清、成長添加剤、ペニシリン、ストレプトマイシン等

液交換周波数毎2-31日1回液体を交換する

せいちょうとくせいへき

細胞形態内皮細胞様

でんだいとくせい2-3代

しょうかえき0.25%

培養条件気相：空気、95%；二酸化炭素，5%

細胞の概要：

豚大動脈内皮分離自主動脈組織、大動脈は体循環の動脈主幹である。その運行経路は：大動脈上昇は左心室から始まり、右側第2胸肋骨関節高度移動大動脈弓、弓行左後から第4胸椎体下縁移挙動降下大動脈、第12胸椎体高度穿孔の大動脈開孔移動は腹大動脈、以上は胸大動脈、第4腰椎体下縁は左、右腸骨総動脈である、腸骨総動脈は仙腸関節の高さで腸骨内、外動脈に分けられる。大動脈内皮細胞は大動脈内面を覆う単層細胞であり、血管の安定状態を維持するために一連の血管活性物質を分泌することができ、炎症や他の要因に刺激された後に安定状態が破壊され、心血管疾患の発生を引き起こすことができる。そのため、大動脈内皮細胞はすでに心血管疾患の発病機序及び治療薬を研究するツールとなっている。内皮細胞または血管内皮は、扁平細胞の層からなる薄い層の専門上皮細胞である。血管の内壁を形成し、血管管腔内の血液及びその他の血管壁（単層鱗状上皮）のインターフェースである。内皮細胞は心臓から最小の微小血管まで循環系全体に沿っている。

メソッドの概要：

会社の実験室で分離した豚大動脈内皮の採用-コラーゲン合成消化法は差速壁貼り法を結合し、内皮細胞専用培地培養スクリーニングにより調製し、細胞総量は約5×10細胞/瓶。

品質検査：

会社の実験室で分離された豚大動脈内皮経CD31免疫蛍光鑑定、純度は90%以上、かつ含まないHIV 1型、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、マイコプラズマ、細菌、酵母、真菌など。

培養手順：

一、蘇生細胞：1 mLの細胞懸濁液を含む凍結保存管を37℃の水浴中で急速に揺動解凍し、5 mLの培地を加えて均一に混合する。1000 RPM条件下で5分間遠心分離し、上清を捨て、培地4-6 mLを補充した後、均等に吹き付けた。その後、すべての細胞懸濁液を一晩培養瓶に加え（または6 cm皿に細胞懸濁液を加え）、一晩培養した。翌日に液を交換し、細胞密度を検査した。

二、細胞継代：細胞密度が80〜90%に達すると、継代培養を行うことができる。

a）、壁貼り細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.消化液1−2 ml（0.25%Trypsin−0.53 mM EDTA）を培養瓶に加え、37℃培養箱に入れて1−2 min消化した後、顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり脱落した場合、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、10%血清を含む培地を5 ml以上加えて消化を停止した。

3.細胞を軽く吹き付け、脱落後に吸引し、1000 RPM条件下で8-10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1-2 mLの培養液を補充した後、均等に吹き付ける。

4.培養液を5−6 ml/瓶で補充し、細胞懸濁液を5−6 mlの培養液を含む新しい皿または瓶に1：2の割合で分けた。

b）、懸濁細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

方法1：細胞を収集し、1000 RPM条件下で8〜10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1〜2 mlの培養液を補充した後、均等に吹き、細胞懸濁液を1：2〜1：5の割合で新しい8 ml培地を含む新しい皿または瓶に分けた。

方法2：半数の液交換方法を選択し、半数の培地を捨てた後、残りの細胞を懸濁し、細胞懸濁液を1：2から1：3の割合で新しい8 ml培地含有新しい皿または瓶に分けることができる。

受信細胞はどのように処理しますか。

1、まず、細胞培養瓶が完全かどうか、培養液が液漏れ、濁りなどの現象があるかどうかを観察する。もしあれば、写真を撮って、すぐに技術サポートに連絡してください（写真は後続のサービスの根拠になります）。

2、75%アルコールで細胞培養瓶の表面を拭き、顕微鏡下で細胞状態を観察する。輸送問題のため、一部の壁貼り細胞は瓶の壁から少量脱落することがある。培養キャップを開けずに細胞を細胞培養箱内に2〜4時間静置培養し、細胞状態を安定させた。

3、細胞説明書をよく読み、細胞関連情報、例えば壁貼り特性（壁貼り/懸濁）、細胞形態、使用する基礎培地、血清比率、必要なサイトカイン、継代比率、液交換頻度などを理解する。

4、静置が完了した後、細胞培養瓶を取り出し、鏡検査、写真撮影し、細胞状態を記録する（撮影した写真は後続のサービス根拠とする）、細胞継代培養後、定期的に写真を撮り、細胞成長状態を記録することを提案する。

5、壁貼り細胞：細胞成長密度が80%を超えると、正常に継代できる、80%を超えなければ、細胞培養瓶内の培地を除去し、細胞密度が80%前後になるまで5 ml程度を残して培養を続け、キャップを少し緩めることができる。

6、懸濁細胞：細胞培養瓶内の液体をすべて50 ml無菌遠心管内に移し、1200 rpmで5分間遠心し、遠心した後に上清培地を収集して予備することができ、管底細胞の沈殿に5 ml培地を加えて吹き、再懸濁する。鏡検査時、細胞密度が80%を超える場合、細胞懸濁液を2つの細胞培養瓶に分けて培養し、培地を5 mlに補充することができる。細胞密度が80%を超えない場合、細胞懸濁液を原瓶に移して培養を続け、細胞密度が80%前後に達するまで継代操作を行う

会社が販売している製品：

ネズミ匹（CH）キット 96トン/48トン

ネズミ匹（CH）キット 96トン/48トン

マウス単核細胞ケモカイン4（MCP-4/CCL13）キット 96トン/48トン

マウス単核細胞ケモカイン3（MCP-3/CCL7）キット 96トン/48トン

マウスの膠質細胞系由来の神経営養因子（GDNF）酵素結合免疫吸着試験キット96トン/48トン

ヒトスラグオリゴコーンプロテイン（COMP）ELISAキットヒト軟骨オリゴマーマトリックス蛋白質（COMP）キット

ヒト高級抗酸化タンパク質製品、AOPPELISAKitヒト晩期オキサイド生成物（AOPP）キット96トン/48トン輸入組立

人道主義問題1カタール、C 1 qキットヒト抗補体1q抗体（C1q）キットの仕様：96トン/48トン

植物活性ミトコンドリア分離キット10次

人α1β糖蛋白、α1β-はい、そうです。ヒトα1β糖蛋白質(α1β-GP）キットの仕様：96トン/48トン

CP-Cy 5.5準拠マーカーCD9モノクローナル抗体

かっせいゆうどうぶんしCD69抗体

CXCL 12リストラ人CXCL12/SDF1bタンパク質（Fcラベル）蛋白質

ヘモグロビン（NGB）くみかえたんぱくしつ組換えニューログロブリン（NGB）

ADPRHリストラ人ADPRH/ARH1タンパク質タンパク質

EGF蛋白質ヒトリストラ人EGF/表皮成長因子タンパク質

HA蛋白質H 7 N 9新型インフルエンザの組換えH 7 N 9鳥インフルエンザ（A/Anhui/1/2013）ヘモグロビン（セロトニン/HA）タンパク質

ヘモグロビン（NGB）くみかえたんぱくしつ組換えニューログロブリン（NGB）

EGF蛋白質ヒトリストラ人EGF/表皮成長因子タンパク質

CXCL 12リストラ人CXCL12/SDF1bタンパク質（Fcラベル）蛋白質

HA蛋白質H 7 N 9新型インフルエンザの組換えH 7 N 9鳥インフルエンザ（A/Anhui/1/2013）ヘモグロビン（セロトニン/HA）タンパク質

ADPRHリストラ人ADPRH/ARH1タンパク質タンパク質

豚大動脈内皮細胞ラット層ブロッキング蛋白質（LN）キット、英語名：LN ELISAキット

マウスマクロファージコロニー刺激因子（M-CSF）ELISAキットマウスマクロファージコロニー刺激因子（M-CSF）キット

マウス硫黄酸素還元蛋白、xELISAKitマウス硫黄酸化還元蛋白質（x）キット96トン/48トン輸入組立

CLIAKitforHumanP 27プロテインELISAキット人P27タンパク質

アイソトープ法デオキシリボ核酸南方ハイブリダイゼーションキット5次

ELISAKitLptn/LTN/XCL1ラットリンパ球ケモカイン