鶏骨格筋細胞

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製品名：鶏骨格筋細胞

組織ソース：骨格筋組織

製品仕様：5×105細胞/T 25細胞培養瓶

育成情報：

パッケージ被条件フェーズロックリング（0.1mg/ml）

培地含有量子牛血清、成長添加剤、ペニシリン、ストレプトマイシン等

液交換周波数毎2-31日1回液体を交換する

せいちょうとくせいへき

細胞形態線維芽細胞様

でんだいとくせい2-3代

しょうかえき0.25%

培養条件気相：空気、95%；二酸化炭素，5%

細胞の概要：

鶏骨格筋は四肢筋組織から分離され、骨格筋は横紋筋とも呼ばれ、筋肉のうちの一種で、全身の重さの約40%骨格筋線維は長柱状の多核細胞であり、筋膜の外面には基膜が密着している。横紋筋に属し、横紋筋には心筋と内臓横紋筋も含まれ、その中の骨格筋は主に四肢に分布している。それぞれの筋肉は一定の形態、構造と機能を持つ器官で、豊富な血管、リンパ分布があり、体の神経支配下で収縮したり拡張したりして、自由に運動する。筋肉は、共形状、大きさ、位置、作用点、繊維方向、作用などに基づいて命名することができる。斜方筋、菱形筋、三角筋、梨状筋などの形態によって命名された。骨格筋細胞は線維状を呈し、分岐せず、明らかな横縞があり、核が多く、細胞膜の下に位置している。筋細胞内には細胞長軸に沿って平行に配列された細い糸状の筋原線維がたくさんある。それぞれのフィブリルには相間配列の明帯（I帯）と暗帯（A.帯）。明帯は染色が浅く、暗帯は染色が深い。暗帯の真ん中に明るい線称があるH線。H線の中央にはM線。明帯の真ん中には、暗い線があります。Z線。二つZ線の間の区間は、筋節と呼ばれています。骨格筋細胞は横紋筋細胞とも呼ばれ、細胞は線維状を呈し、分岐せず、明らかな横紋があり、核が多く、細胞膜の下に位置し、細胞は多く進行し、一定の方向性を持っている。骨格筋細胞の初代分離培養3後日、細胞の壁に張り付いて伸び、細胞形態の大きさが異なり、梭形、不規則形、三角形または扇形を呈し、核卵円形、中央に位置している、2周後に細胞が合流し、多数の細胞が伸びて長梭形を呈し、細胞漿が豊富で、分枝状突起があり、細胞が平行に単層あるいは一部の領域に並んで多層に重ねて成長し、高低が起伏している、細胞密度が低い場合、しばしば網目状に交錯する。密度が高い場合は渦巻状または柵状に配列される。継代後の細胞の成長は比較的速く、4-6日で合流し、上述の形態学的特徴と成長特徴を維持することができる。

メソッドの概要：

会社の実験室で分離された鶏骨格筋は混合コラーゲン消化法を用いて差速壁貼り法と結合して製造され、細胞総量は約5×10細胞/瓶。

品質検査：

会社の実験室で分離された鶏骨格筋経α-アクチン免疫蛍光鑑定、純度は90%以上、かつ含まないHIV 1型、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、マイコプラズマ、細菌、酵母、真菌など。

培養手順：

一、蘇生細胞：1 mLの細胞懸濁液を含む凍結保存管を37℃の水浴中で急速に揺動解凍し、5 mLの培地を加えて均一に混合する。1000 RPM条件下で5分間遠心分離し、上清を捨て、培地4-6 mLを補充した後、均等に吹き付けた。その後、すべての細胞懸濁液を一晩培養瓶に加え（または6 cm皿に細胞懸濁液を加え）、一晩培養した。翌日に液を交換し、細胞密度を検査した。

二、細胞継代：細胞密度が80〜90%に達すると、継代培養を行うことができる。

a）、壁貼り細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.消化液1−2 ml（0.25%Trypsin−0.53 mM EDTA）を培養瓶に加え、37℃培養箱に入れて1−2 min消化した後、顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり脱落した場合、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、10%血清を含む培地を5 ml以上加えて消化を停止した。

3.細胞を軽く吹き付け、脱落後に吸引し、1000 RPM条件下で8-10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1-2 mLの培養液を補充した後、均等に吹き付ける。

4.培養液を5−6 ml/瓶で補充し、細胞懸濁液を5−6 mlの培養液を含む新しい皿または瓶に1：2の割合で分けた。

b）、懸濁細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

方法1：細胞を収集し、1000 RPM条件下で8〜10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1〜2 mlの培養液を補充した後、均等に吹き、細胞懸濁液を1：2〜1：5の割合で新しい8 ml培地を含む新しい皿または瓶に分けた。

方法2：半数の液交換方法を選択し、半数の培地を捨てた後、残りの細胞を懸濁し、細胞懸濁液を1：2から1：3の割合で新しい8 ml培地含有新しい皿または瓶に分けることができる。
会社が販売している製品：

ウサギミオシン（ウサギミオシン） 機能： 酵素結合免疫吸着試験 仕様： 輸入組立

ウサギ単核細胞ケモカイン-1（ウサギMCP-1） 機能： 酵素結合免疫吸着試験 仕様： 輸入組立

ウサギ基質金属プロテアーゼ-1（ウサギMMP-1） 機能： 酵素結合免疫吸着試験 仕様： 輸入組立

ウサギ基質金属プロテアーゼ-2（ウサギMMP-2） 機能： 酵素結合免疫吸着試験 仕様： 輸入組立

ネズミ匹デオキシリボ核酸メチル転移酵素1（DNMT1）キット96トン/48トン

ラットビタミンD（VD）ELISAキットラット匹（VD）キット

結合グロブリン、shbgelistを見つけ、ヒトホルモン結合グロブリン（SHBG）キット96トン/48トン輸入組立

ヒト結腸癌特異性抗原−2、CCSA−2キット大腸癌特異抗原2（CCSA-2）キットの仕様：96トン/48トン

組織ARG/abl 2キナーゼ活性定量キット（A/B/C）20次

ヒトピルビン酸キナーゼ，M 2 PKELISAキットヒト同酸キナーゼM2型ホモ酵素（M2-k）キットの仕様：96トン/48トン

PRELPたんぱく抗体

筋細胞増強因子2C抗体

VP0ヒト腸内ウイルスを組み替える71型（かた）VP0タンパク質（His&GSTラベル）蛋白質

TLR 4/CD 284（Toll様受容体4 0.5 mgTLR 4/CD 284）サンプル受容体4抗原

細胞周期蛋白依存性キナーゼ2リストラ人CDK2/p33タンパク質タンパク質

ヒトHS 3 ST 1タンパク質リストラ人HS3ST1タンパク質

TCN 2蛋白質ヒトリストラ人TCN2タンパク質

TLR 4/CD 284（Toll様受容体4 0.5 mgTLR 4/CD 284）サンプル受容体4抗原

ヒトHS 3 ST 1タンパク質リストラ人HS3ST1タンパク質

VP0ヒト腸内ウイルスを組み替える71型（かた）VP0タンパク質（His&GSTラベル）蛋白質

TCN 2蛋白質ヒトリストラ人TCN2タンパク質

細胞周期蛋白依存性キナーゼ2リストラ人CDK2/p33タンパク質タンパク質

鶏骨格筋細胞ラットラミニン（ラミニン）キット、英語名：ラミニンELISAキット

マウス代替マクロファージ活性化関連化学因子1（AmAC-1）ELISAキットマウスマクロファージ置換活性化関連化学因子1（AmAC-1）キット

マウス蛋白ホスファターゼマウス蛋白酸酵素（PP）キット96トン/48トン輸入組立

ヒト卵巣癌マーカーCA 125 ELISAキットヒト卵巣癌マーカー癌抗原125

同位素核酸（PCR生成物)蛋白結合メチル化干渉足跡法分析キット10次

ELISAKitGM-CSFラット粒細胞マクロファージコロニー刺激因子

受信細胞はどのように処理しますか。

1、まず、細胞培養瓶が完全かどうか、培養液が液漏れ、濁りなどの現象があるかどうかを観察する。もしあれば、写真を撮って、すぐに技術サポートに連絡してください（写真は後続のサービスの根拠になります）。

2、75%アルコールで細胞培養瓶の表面を拭き、顕微鏡下で細胞状態を観察する。輸送問題のため、一部の壁貼り細胞は瓶の壁から少量脱落することがある。培養キャップを開けずに細胞を細胞培養箱内に2〜4時間静置培養し、細胞状態を安定させた。

3、細胞説明書をよく読み、細胞関連情報、例えば壁貼り特性（壁貼り/懸濁）、細胞形態、使用する基礎培地、血清比率、必要なサイトカイン、継代比率、液交換頻度などを理解する。

4、静置が完了した後、細胞培養瓶を取り出し、鏡検査、写真撮影し、細胞状態を記録する（撮影した写真は後続のサービス根拠とする）、細胞継代培養後、定期的に写真を撮り、細胞成長状態を記録することを提案する。

5、壁貼り細胞：細胞成長密度が80%を超えると、正常に継代できる、80%を超えなければ、細胞培養瓶内の培地を除去し、細胞密度が80%前後になるまで5 ml程度を残して培養を続け、キャップを少し緩めることができる。

6、懸濁細胞：細胞培養瓶内の液体をすべて50 ml無菌遠心管内に移し、1200 rpmで5分間遠心し、遠心した後に上清培地を収集して予備することができ、管底細胞の沈殿に5 ml培地を加えて吹き、再懸濁する。鏡検査時、細胞密度が80%を超える場合、細胞懸濁液を2つの細胞培養瓶に分けて培養し、培地を5 mlに補充することができる。細胞密度が80%を超えない場合、細胞懸濁液を原瓶に移して培養を続け、細胞密度が80%前後に達するまで継代操作を行う