鶏卵胞基膜細胞

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製品名：鶏卵胞基膜細胞

組織ソース：鶏卵胞組織

製品仕様：5×105細胞/T 25細胞培養瓶

育成情報：

培地含有量子牛血清、成長添加剤、ペニシリン、ストレプトマイシン等

液交換周波数毎2-31日1回液体を交換する

せいちょうとくせいへき

細胞形態線維芽細胞様

でんだいとくせい2-3代

しょうかえき0.25%

培養条件気相：空気、95%；二酸化炭素，5%

細胞の概要：

鶏卵胞基膜は鶏卵胞組織から分離され、成熟卵胞は卵巣の組織構造成分の一つであり、卵胞腔が大きく、卵丘が明らかである。卵胞内膜細胞は卵胞粒子層に隣接しており、粒子層細胞との間には1層の基膜が隔てられており、内膜細胞は多角形を呈し、細胞質は清明で、細胞核は円形であり、細胞間には多くの毛細血管が見られ、外膜細胞は最外層に位置し、多くは糸状を呈し、周囲の結合組織との境界は明らかではない。卵胞（毛嚢）において卵母細胞の周囲に菱形または扁平細胞の層が取り囲んでおり、卵胞が発育し始め、卵細胞が成長すると同時に、周囲の菱形細胞が立方形に変化し、単層から複層を増殖させ、その細胞漿内に粒子が含まれているため、粒子細胞と呼ばれる。一次卵胞の顆粒細胞は単層である、二次卵胞の顆粒細胞は複層に増殖し、成熟卵胞の顆粒細胞は展開してまた単層になる。粒子細胞の細胞核は大きくて丸く、着色が深く、細胞の遊離面には細長い突起が放射帯の凹部に伸びていることが多い。

メソッドの概要：

会社の実験室で分離した鶏卵胞基膜は先に機械的に分離した後、コラーゲン繰り返し消化法を採用し、そして専用培地培養スクリーニングによって製造し、細胞総量は約5×10細胞/瓶。

品質検査：

会社の実験室で分離された鶏卵胞基膜経3β-HSD免疫蛍光鑑定、純度は90%以上、かつ含まないHIV 1型、B型肝炎ウイルス、C型肝炎ウイルス、マイコプラズマ、細菌、酵母、真菌など。

培養手順：

一、蘇生細胞：1 mLの細胞懸濁液を含む凍結保存管を37℃の水浴中で急速に揺動解凍し、5 mLの培地を加えて均一に混合する。1000 RPM条件下で5分間遠心分離し、上清を捨て、培地4-6 mLを補充した後、均等に吹き付けた。その後、すべての細胞懸濁液を一晩培養瓶に加え（または6 cm皿に細胞懸濁液を加え）、一晩培養した。翌日に液を交換し、細胞密度を検査した。

二、細胞継代：細胞密度が80〜90%に達すると、継代培養を行うことができる。

a）、壁貼り細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.消化液1−2 ml（0.25%Trypsin−0.53 mM EDTA）を培養瓶に加え、37℃培養箱に入れて1−2 min消化した後、顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり脱落した場合、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいた後、10%血清を含む培地を5 ml以上加えて消化を停止した。

3.細胞を軽く吹き付け、脱落後に吸引し、1000 RPM条件下で8-10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1-2 mLの培養液を補充した後、均等に吹き付ける。

4.培養液を5−6 ml/瓶で補充し、細胞懸濁液を5−6 mlの培養液を含む新しい皿または瓶に1：2の割合で分けた。

b）、懸濁細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

方法1：細胞を収集し、1000 RPM条件下で8〜10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1〜2 mlの培養液を補充した後、均等に吹き、細胞懸濁液を1：2〜1：5の割合で新しい8 ml培地を含む新しい皿または瓶に分けた。

方法2：半数の液交換方法を選択し、半数の培地を捨てた後、残りの細胞を懸濁し、細胞懸濁液を1：2から1：3の割合で新しい8 ml培地含有新しい皿または瓶に分けることができる。

受信細胞はどのように処理しますか。

1、まず、細胞培養瓶が完全かどうか、培養液が液漏れ、濁りなどの現象があるかどうかを観察する。もしあれば、写真を撮って、すぐに技術サポートに連絡してください（写真は後続のサービスの根拠になります）。

2、75%アルコールで細胞培養瓶の表面を拭き、顕微鏡下で細胞状態を観察する。輸送問題のため、一部の壁貼り細胞は瓶の壁から少量脱落することがある。培養キャップを開けずに細胞を細胞培養箱内に2〜4時間静置培養し、細胞状態を安定させた。

3、細胞説明書をよく読み、細胞関連情報、例えば壁貼り特性（壁貼り/懸濁）、細胞形態、使用する基礎培地、血清比率、必要なサイトカイン、継代比率、液交換頻度などを理解する。

4、静置が完了した後、細胞培養瓶を取り出し、鏡検査、写真撮影し、細胞状態を記録する（撮影した写真は後続のサービス根拠とする）、細胞継代培養後、定期的に写真を撮り、細胞成長状態を記録することを提案する。

5、壁貼り細胞：細胞成長密度が80%を超えると、正常に継代できる、80%を超えなければ、細胞培養瓶内の培地を除去し、細胞密度が80%前後になるまで5 ml程度を残して培養を続け、キャップを少し緩めることができる。

6、懸濁細胞：細胞培養瓶内の液体をすべて50 ml無菌遠心管内に移し、1200 rpmで5分間遠心し、遠心した後に上清培地を収集して予備することができ、管底細胞の沈殿に5 ml培地を加えて吹き、再懸濁する。鏡検査時、細胞密度が80%を超える場合、細胞懸濁液を2つの細胞培養瓶に分けて培養し、培地を5 mlに補充することができる。細胞密度が80%を超えない場合、細胞懸濁液を原瓶に移して培養を続け、細胞密度が80%前後に達するまで継代操作を行う

会社が販売している製品：

マウスマトリックス金属プロテアーゼ-2 英語名： maix金属プロテアーゼ2 仕様： 英語の略語： マトリックス金属プロテアーゼ2

マウスマトリックス金属プロテアーゼ-3 英語名： maix金属プロテアーゼ3 仕様： 英語の略語： マトリックス金属プロテアーゼ-3

マウスマトリックス金属プロテアーゼ-9 英語名： maix金属プロテアーゼ9 仕様： 英語の略語： マトリックス金属プロテアーゼ-9

マウスリンゴ酸酵素 英語名： マウスリンゴ酸酵素 仕様： 英語の略語： 私

マウス可溶性血管内皮細胞蛋白質Cじゅようたい（sEPCR）酵素結合免疫吸着試験キット96トン/48トン

ラットマクロファージ由来ケモカイン（MDC/CCL 22）ELISAキットラットマクロファージ由来のケモカイン（MDC/CCL22）キット

Humanai IgAaibodyELISAKitにんげんていこう免疫グロブリンA抗体（ai-IgA-Ab）キット96トン/48トン輸入組立

ヒト由来性相関蛋白質キットマンアゴイそうかんたんぱくしつ（AGRP）キットの仕様：96トン/48トン

植物Nグリコシド樹脂法化キット5次

マウスの成長と金属プロテアーゼ9，ADAM 9 ELISAKitマウス分解整合素様金属プロテアーゼ9（九）キットの仕様：96トン/48トン

Pせんたくそ/白血球内皮細胞接着分子3組換えウサギモノクローナル抗体

マトリックス金属プロテアーゼ21抗体

ハ新型インフルエンザの組換え新型H 1 N 1インフルエンザ（A/Ohio/07/2009）ヘモグロビン（セロトニン/HA）タンパク質タンパク質

組換えEGFP蛋白質組換え強化型緑色蛍光100 ug組換えEGFPタンパク質組換え強化型緑色蛍光

IL3RAリストラ人IL3RA/CD123タンパク質タンパク質

DCUN 1 D 2蛋白質ヒトリストラ人DCUN1D2タンパク質

FZD 5蛋白質ヒトリストラ人Frizzled-5/FZD5タンパク質（His&Fcラベル)

組換えEGFP蛋白質組換え強化型緑色蛍光100 ug組換えEGFPタンパク質組換え強化型緑色蛍光

DCUN 1 D 2蛋白質ヒトリストラ人DCUN1D2タンパク質

ハ新型インフルエンザの組換え新型H 1 N 1インフルエンザ（A/Ohio/07/2009）ヘモグロビン（セロトニン/HA）タンパク質タンパク質

FZD 5蛋白質ヒトリストラ人Frizzled-5/FZD5タンパク質（His&Fcラベル)

IL3RAリストラ人IL3RA/CD123タンパク質タンパク質

鶏卵胞基膜細胞ラット非対称ジメチルアルギニン酸（ADMA）キット、英語名：ADMA ELISAキット

マウスp 53（p 53）ELISAキットネズミ匹p53キット

酵素結合免疫吸着試験マウスドーパミン（マウスドーパミン） 輸入組立

Cliakimbobp（ヒト多糖脱結合タンパク質）溶体ヒト脂質多糖結合蛋白質

汎用タイプ真実毒素大腸菌志賀氏毒素-2（VTEC-高毒素2）キット20次

エリザベス/ベトナム赤キレート光殻キレート海老卵黄脂0タンパク質