Fish技術サービス

fish技術サービスの初期は一般的に遺伝子或いは染色体の増幅、欠損、融合或いは断裂の発生を理解するために用いられ、適用：産前診断、産後遺伝病検査、腫瘍診断及び予後評価など。

FISHはまた、組織チップ中の核酸（現在、ncRNA：microrRNA、lncRNA、circRNAの検出によく使用されている）を検出することができ、核酸の数十または数百個の標本における発現の位置付けを知ることができ、癌と癌の傍らにおける核酸の発現差異、核酸発現と生存期の相関、核酸発現と腫瘍の発生発展の関係などを分析することができる。

fish技術サービス実験フロー：

Fish技術サービス（Florescence In-Situ Hybridization：FISH）は、非放射性の蛍光信号を用いてその場ハイブリダイゼーションサンプルを検出する技術である。それは蛍光信号の高感度、安全性、蛍光信号の直観性とその場ハイブリダイゼーションの高精度を結合し、蛍光標識DNAプローブを通じて測定試料のDNAとその場ハイブリダイゼーションを行い、蛍光顕微鏡下で蛍光信号を弁別し、計数し、それによって染色体あるいは遺伝子異常の細胞、組織試料を検出し、診断し、各種遺伝子関連疾患の分類、予前と予後に正確な根拠を提供する。1980年代末、PinkelとHeilesがFISH技術を染色体検査の分野に導入してから、FISH技術は臨床診断と科学研究の仕事の中で広範な運用を得て、いくつかの伝統技術と比較する明らかな優位性を示した。

蛍光insituハイブリダイゼーション技術Fish技術サービスFISHは、従来の免疫組織化学法（IHC）に比べて良好な安定性と再現性を有する。現在、免疫組織化学法は腫瘍など多くの分野の臨床診断に広く応用されている。免疫グループ化の検出対象は疾患関連タンパク質である。また、免疫グループ化検査結果の判断は検査者の発色結果に対する主観的な判断に依存し、いくつかの弱陽性の結果に対して、異なる検査者は分岐しやすい。これらの要因はいずれも医師の病状の最終診断に影響を与える可能性がある。

蛍光insituハイブリダイゼーション技術Fish技術サービスの対象は細胞中のDNAであり、緻密な二重らせん構造はDNAを千百万年にわたって依然として良好に維持することができ、その構造は安定しており、環境条件に影響されにくく、蛍光insituハイブリダイゼーション技術の安定に良好な基礎を提供した。また、蛍光insituハイブリダイゼーション結果の判定は、蛍光の色判定と信号カウントにより、検出結果を客観的に定量化した。Abbott-Vysis社のHybritハイブリダイゼーション装置やVP 2000サンプル前処理システムなどの対応するFISHオペレーティングシステムと染色体イメージングシステムを利用すれば、FISH操作全体の自動化を実現でき、オペレータと検出者の主観的な要素を大幅に低減し、結果の正確性を確保することができる。

PCRは感度が高いため、操作が簡便で迅速であることは近年比較的に多い遺伝子診断技術を応用しているが、PCR診断技術の偽陰性と偽陽性の割合が高く、同一サンプルに対しても1回しか分析できず、実験結果を繰り返すことはできない。プローブ技術の発展に伴い、FISHの現在の感度はPCRのレベルに近づいたり達したりしており、PCR技術の限界を補うことができる。蛍光insituハイブリダイゼーション技術のfish検出は非常に低い偽陽性、偽陰性の割合（Abbott-Vysisの産前診断プローブを例にして、29000例の使用結果は正確率が99.9%に達することを確認した）があるだけでなく、同じサンプルに対して何度もFISH操作を行い、異なる色の蛍光プローブを用いて複数の染色体や遺伝子の異常を一度に検出することができ、検出の時間を大幅に節約した。また、Fish技術サービス染色体または特定遺伝子の数の異常、特定断片の欠落、転位、再配列について診断研究を行うことができる。

蛍光insituハイブリダイゼーション（FISH：Fluorescence in situ hybridization）技術は、非放射性蛍光物質を用いて核酸プローブハイブリダイゼーション原理により核中または染色体上にDNA配列位置を表示する方法である。この技術は迅速、安全、感度が高く、プローブが長期保存できるなどの特徴があり、現在、細胞遺伝学、腫瘍生物学、遺伝子定位、遺伝子作図、遺伝子増幅、産前診断及び哺乳動物染色体進化研究などの分野に広く応用されている。

簡単に言えば、塩基相補的対合の原則であり、外因性核酸（つまりよく言う分子プローブ）と組織、細胞上で検出されるDNAまたはRNAを対合し、核酸ハイブリダイゼーション分子を形成し、さらに一定の手段を経てこのハイブリダイゼーション分子の位置を表示することである。

RNARNA＞DNARNA＞DNADNA

　　Fish技術サービスすでに細胞遺伝学、腫瘍生物学、遺伝子定位、遺伝子作図、遺伝子増幅、産前診断及び哺乳動物染色体進化研究などの分野で広く応用されている。

例えば、植物染色体の非整数体は染色体の挙動異常、すなわち両親媒性リガンド染色体の数と構造の違いによるか、染色体の親縁関係が遠いなどの要因によるものである可能性がある。その場ハイブリダイゼーションを用いて、欠損、付加または置換された染色体を比較的容易に検出することができる。

FISH空間分解能と感受性は、親本と増幅遺伝子の抗ウイルス性虫害細胞中での局在化を可能にする。増幅された遺伝子は主に同じ染色体アーム上にあるが、初期の親遺伝子から一定の距離があり、常に独立して染色体端粒部位に位置している、FISH分析により、細胞破壊は染色体が増幅領域を含む構造再配列に起因する可能性があることが明らかになった。同時にFISHを用いて遺伝子組み換え植物中の外因性遺伝子の位置とコピー数を定位することができ、この方法はトマト、タバコ、大麦、小麦、ライ麦などの作物の中ですでに成功した。FISH技術を用いて、アニリディア疾患患者の欠失遺伝子の検出に成功したなど、遺伝性疾患に関連するいくつかの遺伝子欠損を検出することもできる。

染色体領域におけるPP 2 Ac突然変異型肺癌関連遺伝子の位置付け、蛍光顕微鏡下でのハイブリダイゼーション信号の記録と分析の特徴を観察した。結果：正常ヒトリンパ細胞の染色体5 q 23-31に明らかなハイブリダイゼーション信号が見られ、GLC-82細胞の5号と7号染色体に強い信号が現れた。説明点突然変異はPP 2 Ac活性の変化を引き起こし、それによって遺伝子が転位し、肺腫瘍の発生を招いた。FISH技術は生物化学、コンピュータ、組換えDNA技術と結合してAlu部位を検出し、DNA配列がバンド型と関係があることを表明した。FISH技術を用いたヒトゲノム中のコード遺伝子分布の研究により、遺伝子は主に染色体上のG+C（全ゲノムの35%を占める）のDNAセグメントに集中していることが明らかになった。FISH技術は着糸粒構造の研究に重要な手段を提供した。FISH技術を用いて染色体末端粒子を直接観察することができ、これは核内における染色体の構造と機能研究を簡略化する。