トランスフェクション級線形ポリエチレンイミン（MW 40000）

製品紹介

トランスフェクション級線形ポリエチレンイミン（メガワット40000）はポリエチレンイミンに基づく瞬時トランスフェクション試薬製品であり、高いトランスフェクション効果を有する。ポリエチレンイミンは高陽イオン電荷を有する有機高分子ポリマーであり、負電荷を有する核酸分子を結合しやすく、正電荷を有する複合体を形成する。この複合体は細胞表面アニオンと結合し、内呑み込み作用により細胞に入る。このトランスフェクション試薬は細胞毒性が低く、多種の細胞系に適し、組換え蛋白、アデノウイルスなどの生産を行う。

とMW25000のトランスフェクション試薬と比較して、メガワット40000トランスフェクション試薬は溶解性がよく、直接水に溶解することができ、酸アルカリ性助溶を調節する必要はない、操作がより簡便で、トランスフェクション効果が高い。

基本情報

取扱説明

しやくはいち

必要な材料：

脱イオン水またはそれ以上の生物級水、1モル/リットル*（水酸化ナトリウム)、使い捨て0.1~0.2μm PES真空無菌フィルター、無菌高密度ポリエチレンまたはポリプロピレン貯蔵瓶。

貯蔵液の配置：

⑴ 将（しょう）1グラムトランスフェクション級線形ポリエチレンイミン（40,000メガワット）に溶解900ミリリットル脱イオン水の中で、磁気攪拌器の上で均一に攪拌して溶解する、

⑵ 用いる1モル/リットル*調整pH値まで6.9~7.1（例えばpH値より大きい7.1、塩酸でpH値値をに調整6.9~7.1）；

⑶ 溶液をメスシリンダ（またはメスカップ）に移す水を加える許容範囲1 L；

⑷ 使い捨て0.2µmフィルターを真空ろ過除菌すると、1ミリグラム/ミリリットルの貯蔵液、

⑸ 必要に応じて貯留液を分注し、4℃保存可能1ヶ月です。

トランスフェクション操作フロー

接種細胞：トランスフェクション効率を高めるため、トランスフェクション前日に細胞を接種し、トランスフェクション時の細胞密度に70~80%に適している；

準備DNA-トランスフェクション試薬複合体：

⑴ 将（しょう）デオキシリボ核酸、トランスフェクション試薬と希釈剤は先に室温に回復し、

⑵ 適切な無血清培地で適量を希釈するデオキシリボ核酸；

⑶ 一定の割合で（毎1μg DNA必要1-5μL試薬をトランスフェクションし、自分で配合比を模索することを提案）希釈後のトランスフェクション試薬を装着するまで滴下するデオキシリボ核酸溶液の試験管（追加順序を逆にしない）を選択し、そっと渦巻き、十分に混ぜる、室温静置10~25分インキュベーション。

トランスフェクション細胞：

⑴ 無血清条件下でトランスフェクションする場合、細胞培地を除去し、無血清培地に置換する、

⑵ 細胞に適量を加えるDNA-トランスフェクション試薬複合体、軽く混ぜる、トランスフェクション6-8時間後、新鮮に予熱した培地を交換する；

⑶ に適切な条件中培養、トランスフェクション後24時間転入遺伝子の発現を検出することができる（適切な検出時間を自己決定することができる）。

輸送及び貯蔵条件

輸送条件：室温輸送

保存条件：粉末は室温または4℃保存、有効期間2年です。

注意事項

1. ほとんどの細胞に対して1μg DNA使用する3μLトランスフェクション試薬は高いトランスフェクション効率を得ることができ、また、1μg DNA使用する1.5~4μLトランスフェクション試薬を最適化する。

2. 安全と健康のために、実験服を着て使い捨て手袋を着用して操作してください。

3. 本製品は科学研究用にのみ使用されている。