ヒト肺微小血管内皮細胞の規格

一、細胞基本属性

組織由来：肺組織

種属源：人

細胞の概要：ヒト肺微小血管内皮細胞肺組織から分離する、肺には分葉、左二右三、計五葉がある。肺経肺系（気管支、気管支などを指す）は喉、鼻とつながっているので、喉を肺のポータルと呼び、鼻を肺以外のコツと呼ぶ。微小血管内皮細胞は再生、発育、創傷癒合など一連の生理及び炎症反応に密接に関与している。細胞は糸状または多角形を呈し、単層を形成した後に玉石様または舗装石様の配列を呈した。肺微小血管内皮細胞は半選択性障壁を構成し、この障壁は肺ガス交換に対して、血液と肺間質の間の液体と可溶物の流動を調節することが重要な意義を持っている。

被覆条件：PLL（0.1 mg/ml）、ゼラチン（0.1%）

培地：FBS、成長添加剤、Penicillin、Streptomycinなどを含む

液交換頻度：2-3日ごとに液交換

成長特性：壁貼り

継代プロパティ：2～3世代までの継代が可能

継代スケール:1:2

消化液：0.25%

培養条件気相：空気、95%、CO2，5%

二、細胞培養状態

出荷時に細胞電子版写真を送信

三、使用方法

ヒト肺微小血管内皮細胞壁貼り細胞であり、細胞形態は内皮細胞様であり、技術部の標準操作プロセスの下で、細胞は2-3世代伝えることができる、

お客様は細胞を受け取ったら、次の方法で操作してください。

1.T 25細胞培養瓶を取り出し、75%アルコールで瓶体を消毒し、封口膜を取り外し、37℃、5%CO 2、飽和湿度の細胞培養箱に3-4時間静置し、細胞状態を安定させる。

2.壁貼り細胞の消化

1）T 25細胞培養ボトル中の培地を吸引し、PBSで細胞を1回洗浄する、

2）0.25%消化液1 mL〜T 25培養瓶に添加し、培養瓶を軽く回して消化液が培養瓶の底全体を覆った後、余分な消化液を吸引し、37℃で1〜3 min温浴する、逆置顕微鏡下で観察し、細胞が収縮して丸くなった後、5 mlの培地を加えて消化を停止した、

3）ストローで軽く吹き混ぜ、継代の割合でT 25培養瓶を接種して継代し、その後新鮮な培地を5 mLまで補充し、37℃、5%CO 2、飽和湿度の細胞培養箱に入れて静置培養する。

4）細胞を壁に貼り付けた後、培養観察、その後、液交換頻度に応じて新鮮な培地を交換した。

3.細胞受入脱落

1）すべての細胞懸濁液を収集し、1000 rpm、5分間遠心分離し、沈殿を保留する、

2）0.25%消化液0.5 mLを遠心管に添加し、再懸濁沈殿し、37℃で3 minを消化する（または4℃冷蔵庫で5-7 min静置）、消化が完了したら遠心管内に5 mlの培地を加えて消化を停止する、

3）1000 rpm、5 min遠心分離し、上清を捨て、5 ml培地で再懸濁沈殿し、新しい培養瓶に接種する。

その後、液交換頻度に応じて新鮮な培地を交換した（37℃予熱）。

5）原瓶内壁貼付細胞を正常消化処理する。

4.細胞実験

元世代細胞の壁貼りの特殊性のため、壁貼りの元世代細胞は消化後に他の実験容器（例えばガラス板、培養板、共焦点培養皿など）に移した場合、細胞貼りの壁貼り性を強化し、細胞がうまく貼られていないために実験に影響を与えないように実験容器を包む必要がある、被覆条件はよくマウスコラーゲンI（2-5μg/cm 2）、ポリウレタンPLL（0.1 mg/ml）、ゼラチン（0.1%）を選択し、細胞種に応じて決定した。懸濁／半懸濁細胞は被覆を必要としない。

四、注意事項

1.培養は4℃条件下で3〜6ヶ月保存できる。

2.細胞培養中、無菌操作を維持することに注意してください。

4.お客様は細胞を受け取ってから3日前に倍数ごとに何枚かの細胞写真を撮り、細胞状態を記録し、技術部とのコミュニケーションを容易にすることを提案する。輸送の原因で、個別の敏感細胞に不安定な状況が発生することがあります。直ちに私たちに連絡して、細胞の具体的な状況を詳しく知らせて、私たちの技術者が問題が解決されるまで追跡して、訪問してください。

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