乳酸脱水素酵素活性（WST-8法）微量法説明書

ペプシン乳酸脱水素酵素（乳酸脱水素酵素）活性微量法明細書測定の原理測定によるもの乳酸脱水素酵素触媒ピルビン酸を乳酸に還元する過程でないの生成量を間接的に測定する乳酸脱水素酵素の活性化を図ることができる。

具体的な手順は次のとおりです。

鄒反応原理：に乳酸脱水素酵素の作用の下で、ナド+復元された生成ない。ないとWST-8相互作用により色が発生し、比色測定（λ最大値=450ナノメートル）‌。

鄒反応条件鄒：乳酸脱水素酵素将（しょう）ニコチンアミドアデニン二ヌクレオチドに戻すない，ないとWST-8相互作用により色が生成されます。この反応は氷の上で光を避けて行われ、各成分（例えば測定緩衝液、乳酸、ニコチンアミドアデニン二ヌクレオチド、WST-8、エンハンサー）実験前に冷蔵庫から取り出して室温に平衡させる必要があり、全過程で遮光操作が必要である。

鄒吸光度測定鄒：に450ナノメートル波長における吸光度の測定、吸光度と乳酸脱水素酵素活性は比例し、比色法により測定することができる乳酸脱水素酵素の活性化

‌実験手順と必要な設備：

‌実験手順‌：作動液の準備（1×測定緩衝液、ニコチンアミドアデニン二ヌクレオチド、WST-8、エンハンサー和乳酸均一に混合）し、作動液を添加する96オリフィスプレートまたは微量ガラス比色皿に、測定すべきサンプルを加え、37℃で一定時間恒温培養した後、吸光度を測定した。

必要なデバイス：酵素スケールまたは可視分光光度計（エネルギー測定）450ナノメートルにおける吸光度）、恒温タンク、製氷機、低温遠心機、96オリフィスプレートまたは微量ガラス比色皿、調整可能ピペットおよびガンヘッド、脱イオン水、ホモジナイザー（組織サンプルの場合）

実験上の考慮事項‌：

‌試薬保存‌：各成分（例えば測定緩衝液、乳酸、ニコチンアミドアデニン二ヌクレオチド、WST-8、エンハンサー）氷の上で光を避けて保存し、繰り返し凍結融解を避ける必要がある。

ペプシン乳酸脱水素酵素（乳酸脱水素酵素）活性微量法説明書‑操作上の注意事項‑：全体の実験過程は氷の上で光を避けて行い、光が結果に影響を与えないようにする必要がある‌。

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