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上海市金山区
上海瑞番生物科学技術有限公司
上海市金山区
ラット骨架橋素(OPN)ELISAキット詳細:
[仕様]:48 T/96 T
ブランド:瑞番
[検出波長]:450 nm
[保存条件]:2-8°、6ヶ月
[製品用途]:科学研究用のみ
【検査目的】:血清、血漿、胸腹水などの関連液体標本の測定に用いる
【特徴】:感受性が高く、特異性が強く、繰り返し性が良く、試薬が安定し、保存しやすく、操作が簡便である
瑞番が供給する種は、人、鶏、アヒル、魚、馬、ウサギ豚、植物などのELISAキットなどがある
ラット骨架橋素(OPN)ELISAキット標本処理:
1.当社はキット自体にのみ責任を負い、当該キットの使用によるサンプル消費には責任を負いません。使用者は使用前にサンプルの可能な使用量を十分に考慮し、十分なサンプルを予約してください。
2.実験前に標本の含有量を予測し、標本濃度が高すぎる場合、標本を希釈し、希釈後の標本をキットの検査範囲に適合させ、計算時に相応の希釈倍数を乗算する。標本は0.01 mol/LのPBS希釈(PH=7.0-7.2)を用いた。
3.検査したサンプルが明細書に記載されたサンプルに含まれていない場合、事前実験を行ってその有効性を検証し、サンプルを保存することを提案する。
4.化学分解液を用いて調製した組織ホモジナイズまたは細胞抽出液は、いくつかの化学物質の導入によりELISA実験結果のばらつきを引き起こす可能性がある。
5.サンプルが細胞培養上清であれば、細胞状態、細胞数、サンプリング時間など、このようなサンプルの干渉要素が多いため、検出できない場合がある。
6.本製品に使用される検出抗体及び捕捉抗体と一致しないため、検出されない可能性がある原核及び真核組換えタンパク質を含む特定の天然タンパク質又は組換えタンパク質。
7.新鮮なサンプルを使用することを提案し、保存時間が長すぎると蛋白質の分解や変性により実験結果の偏差が生じる可能性がある。
操作手順:
1、試料添加:それぞれ空洞(空洞対照孔に試料及び酵素標準試薬を添加せず、残りの各工程の操作は同じ)、標準孔、測定待ち試料孔を設置する。酵素標準被覆プレートに標準品を50μl添加し、測定試料孔に試料希釈液を40μl添加した後、測定試料を10μl添加した(試料の最終希釈度は5倍)。サンプリングしてサンプルを酵素スケールプレートの穴の底に加え、できるだけ穴の壁に触れないようにして、軽く揺れて混ぜます。
2、温育:封板膜で封板後37℃で30分間温育する。
3、配液:30倍濃縮洗浄液を蒸留水で30倍希釈して予備用する。
4、洗浄:封板膜を慎重にはがし、液体を捨て、乾燥させ、穴ごとに洗浄液を満タンにし、30秒静置した後に廃棄し、このように5回繰り返し、乾燥させる。
5、酵素添加:酵素標的試薬を穴ごとに50μl添加し、空白穴を除く。
6、発色:穴ごとに発色剤A 50μlを添加し、さらに発色剤B 50μlを添加し、軽く振動混合し、37℃で光を避けて10分間発色する。
7、終止:終止液を1ウェル当たり50μl添加し、反応を停止する(この時、青色立転黄色)。
8、測定:空白エアコンゼロ、450 nm波長順に各孔の吸光度(OD値)を測定する。測定は終止液添加後15分以内に行う。
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質疑応答:
実験の効果が悪い場合は、発色結果をタイムリーに写真に撮って、使用したスラットと未使用試薬を残して、適切に保存してから、弊社テクニカルサポートに連絡して問題を解決してください。また、次の情報も参照できます。
| 問題は次の通りです。 | 考えられる原因 | 解決策 |
| 1:標準曲線差? | 1吸引及び洗浄が不十分 2液移動が不正確である
| 1十分な吸引及び洗浄 2ピペットの点検と補正 |
| 2:精度が低い? | 1洗濯が不十分 2混和不十分と吸引試薬不足 3吸引ヘッド、容器及び被膜の再利用 サンプリングが不正確である | 1試薬の十分な混和と吸引 2サンプラを使用するには、新しい吸引ヘッドを交換し、新しい容器と被膜を使用する 3ピペットの点検と補正
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| 3:OD値が低い? | 1温育時間が正しくない 2温育温度が正しくない 3酵素マーカーまたは基質の故障 4終止液を添加していない 5読取り時間読取り超過 | 1十分な温育時間を確保する 2試薬を室温に平衡させ、温度を確保する 3酵素マーカーと基質を混合することにより、色が迅速に現れて検査する 4説明書の実験操作手順に従って終止液を添加する 5明細書で推奨された示度時間内に示度する |