インターロイキン7受容体（可溶性）ELISA KITは、生物サンプル中の可溶性インターロイキン7受容体含有量を定量的に測定するためのツールであり、免疫学研究などの分野で広く応用されている。
インターロイキン7受容体（可溶性）ELISA KIT
インターロイキン7受容体（可溶性）ELISA KIT生物サンプル中の可溶性インターロイキン7受容体含有量を定量的に測定するためのツールであり、免疫学研究などの分野で広く応用されている。
検出原理：二抗体サンドイッチELISA法を用いた。キット中の微多孔質プレートは、可溶性インターロイキン7受容体に対する特異的抗体にプリパックされている。試料を添加すると、試料中の可溶性インターロイキン7受容体は固相抗体と結合する。その後、酵素標識された抗可溶性インターロイキン7受容体抗体を加え、それは固相に結合された受容体と「固相抗体−可溶性インターロイキン7受容体−酵素標識抗体」複合体を形成する。洗浄工程を経て未結合物質を除去し、TMBなどの基質溶液を加え、酵素の触媒作用の下で基質は発色反応を起こし、色の深さはサンプル中の可溶性インターロイキン7受容体の含有量に比例する。酵素スケールを用いて特定の波長（一般に450 nm）で吸光度を測定し、標準曲線と比較することにより、サンプル中の当該受容体の濃度を算出することができる。
キット組成
酵素ボード
標準品：通常は凍結乾燥品で、2本あります。使用前に標準品希釈液を再溶解し、異なる濃度勾配に希釈する必要があり、例えば0、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mLなど、標準曲線を描くために用いられる。
サンプルxi放出液：高濃度の測定対象サンプルを希釈し、その濃度がキットの検出範囲内であることを保証するために使用する。
酵素標準抗体：すなわちHRP標識の抗可溶性インターロイキン7受容体抗体は濃縮液であり、使用時に要求に応じて酵素標識抗体希釈液で希釈する必要がある。
酵素標準抗体希釈液：酵素標準抗体の希釈に特化している。
基質溶液：TMB基質のように、酵素標的抗体中のHRPと反応して色変化を生じることができる。
せんじょうえき：一般的に濃縮液であり、使用する際には割合に応じて蒸留水または脱イオン水で希釈し、酵素プレートを洗浄し、結合していない物質を除去し、背景干渉を低減する必要がある。
ていしえき：多くは強酸溶液（硫酸など）であり、基質の発色反応を中止し、反応液の色を安定させ、読みやすい。
シーリングフィルム：インキュベーション中に酵素プレートを覆い、液体の蒸発と外部汚染を防止するために使用する。
取扱説明書：キットの使用方法、注意事項、性能指標などを詳しく紹介する。
サンプル要件
血清：血液を採集した後、室温で2時間或いは4℃で一晩放置し、1000×gで20分間遠心分離し、清を取って予備する。採血には、熱原、内毒素のない使い捨て器材を使用しなければならない。
血漿：EDTA、ヘパリンなどの抗凝固剤を用いることができる。サンプル採取後30分以内に、2−8℃で1000×gを15分間遠心分離し、上清を採取した。
細胞培養上清：細胞培養上清1000×gを20分間遠心分離し、細胞破片と不純物を除去した後、上清を採取した。
組織均質：予冷したPBSで組織を洗浄し、残留血液を除去し、組織を切断した後、1：9（w/v）でPBSに加え、氷の上で十分に研磨した。さらに5000×gで5〜10分間遠心分離し、検査用に上清を取った。
サンプル採取後、短期間で検査すれば、4℃で保存することができる。長時間保存する場合、−20℃または−80℃で凍結保存し、繰り返し凍結融解を回避する必要があり、溶血サンプルは一般的に検査に適していない。
操作の流れ
準備作業：冷蔵庫からキットを取り出し、室温まで平衡にする（約30分）。濃縮洗浄液を希釈する。
サンプリング：ブランク穴、標準品穴、サンプル穴を設定します。
洗濯：孔内の液体を捨て、洗浄液で各孔を満たし、1〜2分間浸漬した後に乾燥させ、5回繰り返し洗浄し、未結合物質の洗浄を確保する。
酵素標的抗体：1ウェル当たり100μL希釈された酵素標準抗体作動液を添加し、37℃で60分間インキュベートした。
さいせんじょう：上記洗浄工程と同じ。
発色：穴ごとに90μLの基質溶液を加え、軽く混ぜ、37℃で光を避けて15〜30分間発色する（実際の発色状況に基づいて判断する）。
ていしはんのう：1ウェル当たり50μL終止液を添加し、この時溶液の色は青色から黄色に変化した。
よみとり：終端液添加後15分以内に酵素スケールを用いて450 nm波長で各孔の吸光度（OD値）を測定した。
計算結果：標準品濃度を横座標、OD値を縦座標とし、標準曲線を描画する。サンプルのOD値に基づいて標準曲線から対応する濃度を検出し、サンプルが希釈された場合、対応する希釈倍数を乗じて実際の濃度を得る必要がある。
パフォーマンス指標
検出範囲：よく31.2-2000 pg/mLなどの異なる区間であり、多種のサンプル中の可溶性インターロイキン7受容体含有量の検査要求を満たすことができる。
感度：15.6 pg/mL以下まで下げることができ、サンプル中の微量のこの受容体を検出することができる。
特異性：可溶性インターロイキン7受容体に対して高度な特異性があり、他のサイトカイン受容体などの物質と明らかな交差反応がない。
くりかえしせい：板内変異係数は一般的に10%未満、板間変異係数は15%未満であり、検査結果の安定性と信頼性を保証した。
注意事項
説明書に厳格に従って操作すると、異なるロットのキット試薬を混合することはできません。
操作中に使い捨て吸込ヘッドを使用し、交差汚染を回避し、添加は正確でなければならない。
基質溶液は光に敏感であり、遮光保存と使用が必要であり、発色反応は遮光条件下で行わなければならない。
終止液は腐食性があり、操作時に皮膚と目に触れないように保護に注意する。
標準品とサンプルはいずれも複孔検査を行い、結果の正確性を高めることを提案する。このキットは科学研究用にのみ使用され、臨床診断には使用できない。
