インターロイキン−6受容体（可溶性）ELISA KITは、双抗サンドイッチELISA法を用いて、血清などのサンプル中の可溶性受容体を正確に定量し、操作が簡便で、広く科学研究に用いられている。
インターロイキン-6受容体（可溶性）ELISA KIT
インターロイキン-6受容体（可溶性）ELISA KIT、生物サンプル中の可溶性インターロイキン−6受容体含有量を定量的に測定するために設計され、科学研究分野で免疫及び炎症研究に重要な意義がある。
けんしゅつげんり：二抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着測定法に基づく。酵素プレートは、可溶性インターロイキン−6受容体に対する特異的抗体で事前にカプセル化されている。試料の添加後、可溶性インターロイキン−6受容体は固相抗体と結合した。その後、酵素標識された抗可溶性インターロイキン−6受容体抗体を加え、「固相抗体−可溶性インターロイキン−6受容体−酵素標識抗体」複合体を形成した。洗浄により未結合物を除去し、TMBなどの基質溶液を加え、酵素触媒下で基質を発色させ、色の濃淡はサンプル中の受容体含有量に比例する。450 nm波長で酵素スケールにより吸光度を測定し、標準曲線と比較してサンプル中の可溶性インターロイキン−6受容体濃度を得た。
キット組成
酵素ボード：96ウェルまたは48ウェルの規格があり、抗体をプリパックし、反応担体である。
標準品：通常は凍結乾燥品であり、標準品希釈液を用いて再溶解し、シリーズ濃度勾配に希釈する必要がある、例えば0、15.6、31.2、62.5、125、250、500、1000 pg/mL、標準曲線を描くために使用する。
サンプルxi放出液：高濃度の測定対象サンプルを希釈し、サンプル濃度をキットの検出範囲に適合させるために使用する。
酵素標準抗体：すなわちHRP標識の抗可溶性インターロイキン−6受容体抗体は濃縮液であり、酵素標識抗体希釈液を必要に応じて希釈する。
酵素標準抗体希釈液：酵素標準抗体の希釈に特化している。
基質溶液：TMB基質のように、酵素標準抗体中のHRPと反応して色変化を生じる。
せんじょうえき：一般的に濃縮液であり、割合によって蒸留水または脱イオン水で希釈した後、酵素プレートを洗浄し、未結合物質を除去し、背景干渉を低減するために用いられる。
ていしえき：多くは強酸溶液（硫酸など）であり、基質の発色反応を中止し、反応液の色を安定させて示度を得るために用いられる。
シーリングフィルム：温育時に酵素プレートを覆い、液体の蒸発と外部汚染を防止する。
取扱説明書：使用方法、注意事項、性能指標などを詳しく紹介する。
サンプル要件
血清：血液を採取した後、室温で2時間或いは4℃で一晩放置し、1000×gで20分間遠心分離して上清を採取し、採血には熱原がなく、内毒素がない使い捨て器材が必要である。
血漿：EDTA、ヘパリンなどの抗凝固が使用でき、サンプル採取後30分以内、2-8℃で1000×g遠心15分で上清を採取する。
細胞培養上清：1000×gを20分間遠心分離し、細胞破片と不純物を除去した後、上澄みを取って検査した。
組織均質：予冷PBS（0.01 M、pH＝7.4）で組織を洗浄し、残留血液を除去し、組織を切断した後、1：9（w/v）でPBSを加え、氷の上で十分に研磨し、5000×gで5−10分間遠心分離して清を取った。
サンプル採取後、短期間で検査すれば、4℃で保存することができる。長期保存には-20℃または-80℃の凍結保存が必要であり、繰り返しの凍結融解を回避し、溶血サンプルは一般的に検査に適していない。
操作の流れ
準備作業：冷蔵庫からキットを取り出し、室温（約30分）に平衡させ、濃縮洗浄液を希釈する。
サンプリング：ブランク穴、標準品穴、サンプル穴を設定します。ブランクホールに試料xiを添加して液体を放出し、標準品ホールに異なる濃度標準品を添加し、試料ホールに処理した試料を添加し、1ホール当たりの添加量は通常100μLで、軽く混合し、37℃で90分間インキュベートした。
せんじょう：孔内の液体を捨て、洗浄液で各孔を満たし、1〜2分間浸漬した後に乾燥させ、5回繰り返し洗浄し、未結合物質の洗浄を確保する。
酵素標的抗体：1ウェル当たり100μL希釈された酵素標準抗体作動液を加え、37℃で60分間インキュベートした。
さいせんじょう：上記の洗浄工程を繰り返します。
発色：1ウェル当たり90μLの基質溶液を加え、軽く混合し、37℃で光を避けて15〜30分間発色する（実際の発色状況に基づいて判断する）。
ていしはんのう：1ウェル当たり50μLの終止液を加え、溶液の色を青色から黄色に変更した。
よみとり：終止液添加後15分以内に酵素スケールを用いて450 nm波長で各孔吸光度（OD値）を測定した。
計算結果：標準品濃度を横軸とし、OD値を縦軸として標準曲線を描く。サンプルOD値に基づいて標準曲線から対応濃度を検出し、サンプルを希釈した場合、対応する希釈倍数を乗じて実際の濃度を得る必要がある。
パフォーマンス指標
けんしゅつはんい：一般的には15.6-1000 pg/mLなどの区間であり、多種のサンプル検査の需要を満たす。
感度：7.8 pg/mL以下まで低く、微量の可溶性インターロイキン−6受容体を検出することができる。
特異性：この受容体に対して高度に特異的で、他のサイトカイン受容体などとほとんど交差反応がない。
くりかえしせい：板内変異係数は一般的に10%未満、板間変異係数は15%未満で、検査結果の安定性と信頼性を保障する。
