iELisaレクサドーパミン検出キット

本キットは応用酵素結合免疫吸着試験技術的に開発された薬物残留検出製品,計器分析技術と比較して、経済的、迅速に筋肉を検出することができる組織、飼料、尿などのサンプル中のレクドーパミン含有量。

三、交差反応率

類似物との交差反応率：

レクドーパミン…………………………………100%

サルブチルアルコール……………………………………﹤1%

塩酸ドバアン………………………………﹤1%

クロントロ ………………………………﹤1%

四、キット組成

酵素スケールプレート1ブロック、96穴/板（いた）

標準液5瓶（1mL/ボトル）：

0 ppb、0. 110億分の1、0.310億分の1、0.910億分の1、2.710億分の1

酵素マーカー ………………………………………7米L

抗体作動液 ………………………………………10メートルL

基質液A.7米L

基質液B………………………………………7米L

ていしえき……………………..…………………7米L

10×濃縮洗浄液………………………………40ミリリットル

2×のうしゅくふくそようえき………………………………50米L

取扱説明書……………………..………………1部

五、使用単位が持参する必要のある設備及び試薬

（1）きぐ

マイクロポソームゲージ(450 nm）;窒素ガス乾燥装置、はっしんき；えんしんき;渦巻き計、でんしてんびん0.01 g）。

（2）器材（きざい）

容量ボトル：100ミリリットル，500ミリリットル，1000ミリリットル

シングルトラック微量ピペット：20 μL～200 μL，100 μL~1000 μL

マルチパス微量ピペット：30 μL～300 μL

（3）試薬

メタノール、アセトニトリル、n−ヘキサン、*、濃塩酸、脱イオン水

六、溶液の調製

サンプル前処理には調製が必要：

はいすい1：1M 水酸化ナトリウム溶液

秤取4.0 g水酸化ナトリウム加脱イオン水溶解して、許容範囲100ミリリットル。

はいすい2：0.1M HCl

はかる0.83ミリリットル濃塩酸を脱イオン水に添加許容範囲100ミリリットル。

はいすい3：25%メタノール

はかる25mLメタノール75ミリリットル脱イオン水に、よく混ぜます。

はいすい4：25%メタノール-0.1MHCL溶液

はかる20mL 0.1Mえんさん溶液に参加80mL 25%メタノール溶液中によく混ぜます。

はいすい5：サンプル複溶液

2×のうしゅくふくそようえき使用する前に、1：1希釈（1部のうしゅくサンプル複溶液+ 1分脱イオン水）。

はいすい6：せんじょう作動液

10×濃縮洗浄液は使用前に1：9希釈（1ぶぶんのうしゅく洗濯えきたい + 9分の脱イオン水）（必要に応じて配置可能）。

七、サンプル前処理方法

サンプル処理前の注意事項：

（1）実験には使い捨ての吸引ヘッドを使用し、異なる試薬を吸引する際には吸引ヘッドを交換しなければならない。

（2）実験前に各種実験器具が清潔であるかどうかを検査し、汚染が実験結果に干渉しないように清潔な実験器具を使用しなければならない。

サンプル前処理手順：

（A.）組 おりものしょり/肝臓、卵、魚、エビなど）

処理方法1：

1、正確秤取2.0±0.02 グラムむらがないサンプル＃サンプル＃50 米L遠心管中

2、加入0.5mL希釈後のサンプル複溶液（配液5）、十分振動2分間、加入8mL アセトニトリルたっぷりうずしんどう3～5分、室温4000回転/分遠心10分；

3、取る2.5ミリリットル上層液から別の遠心管，50~60℃窒素ガス乾燥、

4、加入1 ミリリットル ノルマルヘキサンは残留物を溶解し、さらに加える1mLサンプルふくごうえき5)、よく混ぜて30秒、室温4000回転/分遠心10分；

5、上層ノルマルヘキサンを除去し、20 μL分析のための下層液。

処理方法2：

1、正確秤取2.0±0.02 グラムむらがないサンプル＃サンプル＃50 米L遠心管中

2、加入6mL25%メタノール-0.1MHCL溶液、しんどうむらがない3～5分，室温4000回転/分以上遠心10分（注：組織サンプル中の油脂含有量が高い場合、振動後に入れることができる85℃水浴10 min後に遠心分離）；

3、取る1ミリリットル上層液から別の2mL遠心管中，加入20μL 1M*溶液を十分に混和（混和後測定pH値値、約7-8）；

4、4000回転/分遠心3～5分;上澄み液を取る20 μL解析用。

（B）尿、血清

取る20 μL清明尿サンプルまたは血清の直接測定（尿サンプルまたは血清濁りなど）

フィルタまたは4000回転/分に15℃遠心10分清めるまで

明るい）、しばらく使用しないサンプルは冷凍保存しなければならない。

八、酵素結合免疫検査ステップ

測定前の注意事項：

1、 使用前にすべての試薬と必要な微孔板を室温に戻した。

2、 使用直後にすべての試薬を戻します2~8 ℃。

3、 使用中は微孔を乾燥させないでください。

4、 に酵素結合免疫吸着試験分析中の繰り返し性は、洗濯板の一致性に大きく依存し、正しい洗濯板の操作は酵素結合免疫吸着試験測定手順における要点。

5、 すべての恒温培養中に、光の照射を避け、カバー枚板膜は微孔板を覆っている。

測定手順：

1、必要な試薬を及び微孔板冷蔵環境から取り出し、室温で平衡30 分、各液体は使用前に均等に振らなければならない。注意標準液はすべてしなければならない2個の平行試験。

2、標準品を加える/サンプル：加入る標準品/サンプル20 μL穴，加入酵素マーカー50 μL穴、再投入抗体作動液80 μL穴，びしょうしんどうこんごう，用いるカバープレート膜の蓋ができて、室温25℃かこうぼうしはんのう30分。

3、洗濯板：カバーフィルムを慎重に外して、穴の中の液体を乾かして、せんじょうえきを加える 250 μL/穴、毎回浸す15~30 s、十分に洗濯する4~5回、吸水紙でたたく乾く。

4、発色：穴ごとに別々に入れる基質液A. 50 μL、それぞれ参加基質液B 50 μL、軽くしんどう混合し、室温25℃下遮光反応10~15分。

5、測定：穴ごとに加算50 μL停止液、びしょうしんどうこんごう酵素スケール450 ナノしょそくていディスク値（推奨450/630 ナノ二波長検出、5 分内でデータを読み終える）。

九、結果の分析

測定した標準液または試料の吸光度の平均値（B）を第

標準液（0標準液）の吸光度（B₀）値の再乗算100%，

100%吸光度値が得られた。

パーセント吸光度値（%）＝

標準品濃度での10底の対数は十、軸、100%吸光値はY軸、標準曲線を描画します。サンプルの100%吸光値を標準曲線に代入し、標準曲線からサンプルに対応する値を読み出し、10のべき乗に希釈倍数を乗じたもの、すなわちサンプルに含まれるレクドーパミンの量です。

キット専門分析ソフトを利用して計算することで、大量のサンプルの正確かつ迅速な分析が容易になる。

十、サンプル希釈倍率

どうぶつそしき：2倍（方法一）、4倍（方法2）

尿、血清サンプル：1倍

十一、キット感度、精度、精度

キット感度：0. 110億分の1

サンプル検出限界：

組織サンプル（方法1）…………………0.210億分の1

組織サンプル（方法2）…………………0.4 10億分の1

尿、血清サンプル………………………0.110億分の1

回収率：

組織サンプル …………………………75±20%

尿、血清サンプル………………………95±20%

精度：キットの変異係数はすべて以下10%

十二（に）、注意事項

1、室温が低い20 ℃あるいは試薬やサンプルが室温に戻らなかった（20~25 ℃）すべての標準的なディスク値が低い。

2、洗濯中に板穴が乾燥する場合、標準曲線が線形にならず、繰り返し性が悪い現象が現れる，だから洗濯板が乾いたらすぐに次の操作をしなければならない。

3、有効期限が過ぎたキットを使用しないでください。有効期限を過ぎたキットの中のいかなる試薬も使用しないでください、有効期限を過ぎたキットをドープして使用すると感度の低下を引き起こすことができます、異なるロット番号のキットで試薬を交換して使用しないでください。

4、キットを保存2~8 ℃、冷凍しないで、使わない微孔板を密封袋に入れて再密封する；標準物質や無色の発色剤は光に敏感なので、直接光にさらさないようにしましょう。

5、発色試薬発色剤が変質することを示す色があれば、廃棄すべきであるの

6、参加中基質液後、一般的な発色15 分をオフにします。色が薄い場合は、反応時間を20 分（またはそれ以上）、ただし超えてはならない30 分；逆に反応時間を短くする。

十三、貯蔵条件及び保存期間

貯蔵条件：2~8 ℃キットの保存。

保存期間：本キットの有効期間は12ヶ月です。