EZ-ECL便かがくはっこうえき

製品説明

EZ ECL Flyg化学発光液は現在*高感度の増強型化学発光である（ECL）HRP免疫印影解析中のユーザーの低フェムト級タンパク質検出を支援する基質(<1×10^-13、-14g）、抗体を極めて節約する。シフィモ基質は、ワサビペルオキシダーゼを用いることができる（HRP）カップリングの免疫印影実験は明るい信号とフェムトレベル検出感度を提供する。そのECL基質は各種の膜、閉鎖液と広い範囲の抗体希釈液と互換性があり、優れた性能、汎用性と高い価格比で、ユーザーの免疫印影応用の需要を満たすことができる。

シフィモ基質の特徴：

•感度が高い：ニトロセルロース膜又はPVDF膜上にフェムト級のタンパク質ストライプがある。

•ロングシグナル持続時間：条件最適化の場合、基質培養された印影テープは持続的に出力することができる6～8時間の検出可能な光信号である。

希釈濃度の推奨：

•いちたいこうのうど：推奨1µg/mLちょぞうえき希釈1:5,000まで1:100,000倍数

•にこうのうど1µg/mLちょぞうえき希釈1:100,000まで1:500,000倍数

注文情報

プロダクトコンポーネント

輸送と保存

ブルー・アイス輸送4℃遮光乾燥保存、有効期間12ヶ月です。

使用方法

1. 印膜を取り出し、適切な閉鎖液を加えて温室下でインキュベートする20~60 min、同時に振動して、膜上の非特異的蛋白結合部位を閉鎖する。

2. 膜を閉鎖液から取り出し、温室で1対の作動液とインキュベートする1時間または28℃で一晩インキュベートし、振動しなかった。

3. 十分な量の洗浄緩衝液を膜に加え、緩衝液が膜*を完全に覆うことを保証する。振動インキュベーション≧5分、洗浄緩衝液を交換し、この手順を繰り返す4~6回。洗浄緩衝液の体積、洗浄回数、洗浄時間を増加させることは、背景信号の低減に役立つ。【注】：①インキュベーション前に、洗浄緩衝液中の膜の短いリンスは洗浄効率を高める。②前に提案したHRP二次希釈防止度を標識することは非常に重要である。

4. 将（しょう）HRP標識された二次抗作動液と膜を温室でインキュベートする1時間、同時発振。

5. 手順を繰り返す3を選択して、結合されていないHRP二抗をマークする。【注】：膜とHRP標識二抗孵化後は徹*洗浄を行わなければならない。

6. 将（しょう）A.溶液とB毎センチメートル²フィルム使用0.01～0.1ミリリットル作動液、作動液は温室下で安定する8時間。【注】：実験室の一般的な照明は作動液を損なうことはありません。

7. 印字膜を作動液中でインキュベートする5分。作動液から印フィルムを取り出し、プラスチックシートまたは清潔なプラスチック紙（フィルム）に入れ、1枚の吸水紙で余分な液体を吸い取り、印とプラスチック紙の間から気泡を慎重に押し出す。

8. プラスチック紙（フィルム）に包まれたプリントフィルムをフィルムカセットに入れ、タンパク質を上向きにして、フィルム露光に適したランプ（赤色安全ランプなど）を除いて、すべてのランプをオフにします。【注】：①フィルムは露光中に乾燥させなければならない、②余分な基質をフィルムとプラスチック紙から*完全に除去することを確保する。③フィルム処理全体の間、手袋を使用する。

9. 将（しょう）十、推奨*1回の露出60秒。その後、露出時間を調整して*良い結果を得ることができます。5～30分期間は*強烈です。この反応は数時間持続することができますが、強度は時間とともに低下します。もし基質が孵化してから長い時間後に露光すると、露光時間はより強い信号を得るために延長する必要があるかもしれません。リン光記憶撮像装置（例えばアメリカの分子イメージャシステム）またはでんかけつごうそしカメラは長い露光時間を必要とする場合があります。【注】：フィルムとフィルムとの間の任意の移動は、フィルム上に人為的な非特異的な信号をもたらす可能性がある。

10. 適切な現像剤及び定着剤を用いてフィルムを現像する。信号が強すぎる場合は、露光時間を短縮するか、印字膜をはく離し、抗体濃度を下げて再検出する。

注意事項

1. 本製品は科学実験研究に使用され、臨床診断、治療などの分野に使用されてはならない。

2. *優れた効果を得るためには、試料量、一抗及び二抗濃度、並びに膜及び閉鎖試薬の種類を含むシステムの全成分を最適化する必要がある。

3. HRP基質検出に必要な抗体濃度は低い。抗体濃度を最適化するために、システムのドットインプリント分析を行ってください。

4. すべてのシステムにとって好ましい封止試薬は1つもないので、免疫印影検査システムごとに最適な封止緩衝液を見つけるためには非常に必要です。閉鎖剤は抗体と交差反応する可能性があり、非特異的なシグナルを引き起こす可能性がある。ある基質から別の基質に変換すると、閉鎖緩衝液が新しい検出システムに適していない可能性があるため、信号減衰や背景の増加が発生することがあります。

5. 親和性要素の使用/ビオチン検出システムの場合、牛乳には不定量の内因性ビオチンが含まれているため、閉鎖試薬として牛乳を使用することは避けられ、背景信号が高い。

6. 洗浄緩衝液、閉鎖緩衝液、抗体溶液と基質作動液の使用体積を保証し、全実験過程において印字膜が完全に液体に覆われ、膜が乾くのを避けることを確保する。閉鎖緩衝液及び洗浄緩衝液の使用量を増大させることは、非特異的な信号を低減することができる。

7. *良い効果を得るためには、インキュベーションステップでロッキングベッドを使用してください。

8. 将（しょう）トウェイン20（しゅうのうど0.05~0.1%)非特異信号を低減するために、閉鎖緩衝液と希釈抗体溶液を添加した。洗浄剤などの高品質な製品を使用します。アンプルに保存され、過酸化物やその他の不純物の含有量は低い。

9. 緩衝液の防腐剤としてアジドナトリウムを使用しないでください。ナトリウムアジドはHRPの抑制。

10. 手と膜の直接接触を避け、実験過程で手袋を着用するか、清潔なピンセットを使用しなければならない。

11. すべての設備は外部物質に汚染されずに清潔でなければならない。金属器具（はさみのような）は目に見えるさびを持ってはならない。さびは斑点の形成と高背景を引き起こす可能性がある。

12. 8時間。日光またはその他の強い光の下では基質を損なう可能性があり、*良い結果を得るために、基質作動液を琥珀色のボトルに保存し、長期的な強い光の下での漏れを回避し、短時間で実験室の通常の照明に漏れても作動液を損なうことはない。

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