間葉性幹細胞無血清培地(HuMSC無血清培地)

製品説明

間葉性幹細胞無血清培地無血清、無動物源成分のヒト臍帯間葉質幹細胞培養製品であり、主要成分はアミノ酸、ビタミン、無機塩、アルブミン、トランスフェリン、インスリン、微量元素、サイトカインなどである。

本製品は間葉質幹細胞の初代培養及び多継代に用いることができ、同時に骨細胞、軟骨細胞及び脂肪細胞に分化する能力などの多方向分化の潜在能力を維持することができ、使用時に血清又は血清代替物を添加する必要はない。

注文情報

プロダクトコンポーネント

輸送と保存

コンポーネントA.ブルーアイス輸送、4コンポーネントBドライアイス輸送、-20℃以下で保存する。有効期間12 ヶ月です。

使用方法

1.培地の調製

取る500ミリリットルコンポーネントA.，加入25メートルL コンポーネントB、均一に混合すると間葉性幹細胞無血清培地。注：必要に応じて、使用者は必要な量を比例して調製することができる。

2. 間葉質幹細胞の初代細胞分離と培養（T75培養瓶を例に）

(1) 臍帯を取り出し、臍帯外面を消毒し、洗浄して血痕を除去し、約2cm~4cmの小さい5mm~10mm的小块，置于T75培地ボトルに整列し、1本あたりの舗装15~20注：臍帯外皮側とワトゴム側を区別し、保証する必要がある華通ゴム側は培養瓶の底に貼ってある。

(2) 培養瓶を反転し、一酸化炭素2培養箱には、37℃静置（せいち）60分。

(3) 培養瓶を取り出し、培養瓶にゆっくりと加える15mL間葉性幹細胞無血清培地を選択し、 37℃ 、5%一酸化炭素2 培養箱で培養する。

(4) 第 7日、それぞれT75間葉性幹細胞無血清培地5mL。

(5) 補液後3日に半交換液を行い、吸い出す10メートルL 培地を捨ててから添加する10メートルL新鮮の間葉性幹細胞無血清培地。

(6) 第13日から、組織ブロックなどの組織ブロックを観察する周囲細胞の融合度が90%あ、受け取ることができます細胞を獲得しなければ3組織塊周囲の細胞融合度が90%。

3. 間葉質幹細胞の継代培養と凍結保存（T75培う

(1) 将（しょう）間葉性幹細胞無血清培地室温に平衡する。

(2) 洗浄：細胞を取り出し、培養瓶の培地を吸引して廃棄し、それぞれT75培養瓶用いる10米L~ 15メートルL公共放送サービス細胞を一度潤洗する。

(3) 消化：添加 3ml消化液，使消化液浸润整个细胞生长表面后，置于 一酸化炭素2 培養箱には、37℃消化（しょうか） 2分間~6分、鏡検査観察、約 80%以上の細胞が収縮する円になって脱落する場合、2倍体積を加える間葉性幹細胞無血清培地消化を停止し、細胞を分散させるために吹き付ける単細胞、細胞計数を行う。

注：細胞の大部分が収縮して丸くなっても落ちない場合は、瓶の壁を軽くたたいて脱落する。細胞が脱落しなければ、消化時間を延長することができる。

(4) 収集：300グラム，5分遠心分離して細胞沈殿を収集し、上清を廃棄する。

(5) 継代/凍結保存：継代操作を行う場合、間葉性幹細胞無血清培地8000個の細胞/センチメートル₂）細胞を室温まで平衡に加えた20mL間葉性幹細胞無血清培地の T75培養瓶に入れて 37℃、5%一酸化炭素2 培養箱で培養を続ける。

細胞を凍結保存する場合は、ステップ（4）で収集した細胞を沈殿させ、凍結保存密度に応じて適量の細胞を添加する凍結貯留液は重懸濁細胞を柔らかく吹き付けて混合し、細胞凍結貯留管に移し、凍結貯留管はプログラム降下に置くで指定します。-80℃夜を明かす、24時間後に液体窒素に移行し長期保存を行った。

4. 間葉質幹細胞の蘇生（ T75培養瓶を例に）

(1) 将（しょう）間葉性幹細胞無血清培地室温に釣り合う、各培養瓶に加える15mL の間葉性幹細胞無血清培地。

(2) 凍結した細胞を取り出し、入れます 37℃水浴鍋の中で急速に解凍する。

(3) 1mlまで 15ml えんしんかんに、滴下して加える 4メートルL 間葉性幹細胞無血清培地、混和してカウントします。

(4) 計数結果により、適切な接種密度（推奨 8000 個の細胞/cm₂）細胞を接種してすでに加入しました 15メートルL 間葉性幹細胞無血清培地の細胞培養容器に入れた。

注：細胞凍結貯留液に含まれていない場合 ジメチルスルホキシド、細胞を直接加えることができます 20メートルL 間葉性幹細胞無血清培地で、翌日に交換する必要はありません液体。

(5) 細胞を 37℃ ,5%一酸化炭素2 培養箱で培養する。

(6) 12h~24時間その後、細胞に正常に壁を貼り付け、培養上清を捨て、添加新鮮な、室温までバランスした 20ml間葉性幹細胞無血清培地。細胞の成長状況に応じて毎に 3細胞融合度到達までの日交換液 80%~90%。

注意事項

1. 本製品は科学実験研究に限られ、臨床診断、治療などの分野に使用してはならない。

2. 本製品には抗生物質が含まれておらず、抗生物質の添加は推奨されていません。抗生物質を添加しなければならない場合は、培養条件を最適化すべきである。

3. 本製品はフェノールレッドを含まず、血清及び動物由来成分を含まず、必要に応じて追加できるようにする。

4. また、細胞タイプや研究ニーズに応じて、必要な細胞成長因子やホルモンなどを追加添加してもよい。

5. ほん製品培養細胞の効果は細胞源、貯蔵条件、サンプルによる可能性がある品質、操作者経検査によって差がある。

6. 製品は指定された貯蔵条件の下で保管し、有効期間内に使用しなければならない。

関連製品の推奨

高速細胞凍結保存液（無血清、無蛋白）（品番：AC05L033）

特級胎児牛血清（胎牛血清）（貨物番号：AC03L055）