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中関村生命科学園北清創意園2-4階2階
ターゲットテクノロジー(北京)有限公司
中関村生命科学園北清創意園2-4階2階
フローサイトメトリーは重要な細胞分析技術であり、細胞計数、細胞表現型分析、細胞配列などに用いることができる。フローサイトメトリーを行う前に、実験の正確性と信頼性を確保するために品質制御を行うことは非常に重要である。本論文では、フローサイトメトリーの品質制御方法を詳細に紹介する。
流体システムは流量計と圧力センサを含む。まず、実際の流速と圧力を測定することによって流量計と圧力センサを較正する。標準流体を流量計に注入し、流速を測定し、校正した。標準圧力を圧力センサに注入し、出力値を測定し、キャリブレーションします。
2.レーザーシステムの較正
較正レーザシステムは、試料容器内で正しい光学読取を得るためにレーザビーム位置を決定することを目的とする。キャリブレーションビーズを用いてフローサイトメータ試料管に固定し、レーザー照射を用いてビーズをキャリブレーションし、レーザービーム位置を決定した。
3.光学系校正
光学系のキャリブレーションは、サンプル分析時の光学的読み取りの正確さを確保するための鍵である。検出器はサンプル中の免疫染色粒子の数と大きさを測定する責任がある。シンクロナイザは、検出器がサンプルを測定する際に正確な周波数で測定することを保証する責任がある。
4.標準粒子較正
フローサイトメータ較正の最後のステップは、標準微粒子較正器を用いてサンプルを標準化することである。広いサンプルチューブを用いて、異なる濃度で標準微粒子を試験した。標準曲線を較正した後、フローサイトメータはサンプル中の特定の免疫染色粒子の数と特徴を正確に計算することができる。
フローサイトメータ較正
1.フローサイトメータの試料室を洗浄し、レーザと光路システムが正常に動作しているかどうかを検査する。
2.粒子標準物質を用いて細胞計の散乱、蛍光及び時間パラメータの正確性を検査する。
フローサイトメータの性能の品質制御
a.散乱感度、蛍光検出感度、時間分解能を含む、フローサイトメータの性能パラメータを定期的に検査する。
b.較正粒子を用いて流速の正確性と一致性を検査し、
c.実験の必要に応じて、適切な品質検査粒子を用いて分解能と強度の調整を行う
サンプル準備
1.細胞の凝集と堆積を避けるために、細胞サンプルを均一に懸濁する。試料を遠心分離および再懸濁することによって達成することができる。
2.品質の信頼できる細胞染色方法を用いて、染色の正確性と一致性を確保する。
サンプル純度の品質管理
a.染色の純度を評価するために適切な負の対照及び正の対照を使用する。例えば、負の対照として未染色細胞、正の対照としてヘキソ陽性標識細胞を用いる
b.染色結果の一致性を定期的に検査し、負対照細胞に陽性標識がないことを確保正対照細胞に予想される陽性標識があることを確保する
CytoFLEX即使用型日常QC品質制御蛍光微小球計器較正品中国語の紹介
CytoFLEX即使用型毎日QC蛍光微小球は3μm蛍光微小球の懸濁液であり、フローサイトメータの光学アラインメントと液流システムの日常検証に用いることができる。この製品は予備希釈された即使用型の形で提供され、以下の波長で励起すると、蛍光発光波長は355 nmから800 nmの間:355 nm、375 nm、405 nm、488 nm、561 nmと638 nmである。混合物を界面活性剤と安定剤を含む水媒体に懸濁する。C 65719はCytoFLEX日常QC蛍光球B 53230に取って代わり、CytoFLEX細胞計プラットフォームに適している。
CytoFLEX即使用型日常QC品質制御蛍光微小球計器較正品英語の紹介
CytoFLEX即用型日常QC蛍光微小球は3µm蛍光微小球の懸濁液であり、フローサイトメータの光学アラインメントと流体システムの日常検証に用いることができる。この製品は、355 nm、375 nm、405 nm、488 nm、561 nm、638 nmで励起されると、355 nmから800 nmの間に蛍光発光する予備希釈された即使用型の形態で提供される。混合物を界面活性剤と安定剤を含む水性媒体中に懸濁させた。CytoFLEX即使用型QC蛍光球の日常的な使用方法については、ここをクリックしてください。
CytoFLEX即使用型日常QC品質制御蛍光微小球計器較正品操作の流れ
1メーカー推奨のフィルターセットを使用して適切な蛍光パラメータを検出します(CytoFLEXプラットフォームの取扱説明書を参照)。
2特定ロットのCytoFLEX即使用型毎日質量制御蛍光球の目標値ファイルがフローサイトメータソフトウェアにロードされていることを確認します。ロット固有の目標値ファイルのインポート方法については、CytoFLEXプラットフォームの取扱説明書を参照してください。
3CytoFLEX即使用型日常QC蛍光球バイアルを渦混合器を用いて2〜3秒間激しく混合した。
4.追加:
4.半自動(試験管)試料注入モードを使用する場合、試験管にフッ素球を10滴添加する。
b.標準96オリフィスプレートまたは深井戸プレートについて、プレートローダ射出モードで、オリフィスに3〜4滴のフッ素球を滴下する。
5。CytoFLEXプラットフォーム(IFU)の説明に従って品質制御(QC)プロトコルを実行する。
CytoFLEX即使用型日常QC品質制御蛍光微小球計器較正品注意事項
1.製品は即使用型製品であり、追加の調合を必要とせず、そのまま使用する。
3.蛍光微小球を長時間静置すると、自然に沈降する。使用する前に蛍光球を十分に再懸濁させます。
4.試料ボトルラベル上の有効期限を超えた蛍光球を使用しないでください。
5.製品の冷蔵は凍らないでください。
6.この試薬を処理する場合は、良好な実験室仕様(GLP)を使用してください。
7.本剤には防腐剤が含まれており、皮膚や目の接触が発生した場合は、水で適時に深く洗浄してください。
フローサイトメータ較正報告書の目的は、すべてのフローサイトメータ較正プロセスの詳細を記録することである。レポートには次の情報が含まれている必要があります。
1.日付と時刻
3.レーザシステム校正データ
4.光学系校正データ
5.標準微粒子校正データ
6.ビーズ較正データ
7.キャリブレーション中に発見された問題や異常
8.キャリブレーションを実行する技術者の名前と署名