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アドレス
上海市浦東新区紫萍路908弄
和元李記(上海)生物技術有限公司
上海市浦東新区紫萍路908弄
製品説明
2 x Taq PCR添加混合物 はいポリメラーゼ連鎖反応反応予備混合液には、Taq DNAポリメラーゼ、デオキシヌクレオシド三リン酸、反応緩衝液、添加緩衝液などの成分を配合し、使用時に適量の本製品を取り、テンプレートとプライマーを加え、にじじょうりゅうすい体積を補充し、反応系濃度を 1×で行うことができるポリメラーゼ連鎖反応反応。ポリメラーゼ連鎖反応生成物3'エンドバンド突出A.塩基、精製後直接使用可能T/Aクローン作成。
本製品は複合酵素システムを用いてポリメラーゼポリメラーゼと3'5'エキソザイム活性蛋白質協同作用は、反応緩衝系を最適化する下で高収量増幅を実現でき、増幅≦7 kbのDNAクリップ、互換性30%〜70%ガスクロマトグラフィー含有量のテンプレート。伝統に比べてタッカー酵素(WT Taq)を選択し、その伸び率を向上させる2-4倍となり、反応周期を著しく短縮した。
本製品には2種類の染料が含まれており、ポリメラーゼ連鎖反応反应完成后无需额外添加ロードバッファを選択すると、電気泳動を直接行うことができ、電気泳動中に青と赤の2つのインジケータストリップが表示されます。この染料は影響しないポリメラーゼ連鎖反応増幅効率、ただし必要に応じてポリメラーゼ連鎖反応生成物は吸光度、蛍光などの光学分析の実験を行い、分析前にポリメラーゼ連鎖反応生成物を精製するか、無染料のポリメラーゼ連鎖反応予混合液
注文情報
製品名 |
品番 |
仕様 |
2 x Taq PCR添加混合物 |
アン1828 |
2*1mL |
2 x Taq PCR添加混合物 |
アン11 l 829 |
5*1mL |
輸送と保存
ブルー・アイス輸送-20℃保存、有効期間24ヶ月です。
使用方法
1. 通常ポリメラーゼ連鎖反応はんのうシステム
コンポーネント |
20 μL体系 |
50 μL体系 |
しゅうのうど |
2 x Taq PCR添加混合物 |
10 μL |
25 μL |
1 x |
正向引物(10 μM)(1) |
0.4-0.8μL |
1-2μL |
0.2-0.4μM |
逆プライマー(10 μM)(1) |
0.4-0.8μL |
1-2μL |
0.2-0.4μM |
デオキシリボ核酸テンプレート(2) |
十、μL |
十、μL |
- |
DDH社2お |
-20μL |
-50μL |
- |
(1) プライマー推奨最終濃度は0.2~0.4μM、効果が悪い場合は0.1~1μM濃度範囲内で調整する、
(2) テンプレート*の反応濃度によって異なります。 50 μL体系例:テンプレートはゲノムデオキシリボ核酸の場合、一般的に推奨される使用量は10 ~ 200ナノグラム;テンプレートがプラスミドまたはウイルスの場合デオキシリボ核酸の場合、一般的に推奨される使用量は10ピケ~ 5ナーク。テンプレートの量が多すぎると非特異的な増幅が起こりやすい。
2. さんだんほうポリメラーゼ連鎖反応はんのうプログラム
手順 |
温度 |
時間 |
(3) |
95℃ |
3~5分 |
へんせい |
95℃ |
30秒 |
焼きなまし(4) |
55~65℃ |
30秒 |
延長(5) |
72℃ |
15 ~ 30秒/kb |
30~35サイクル |
||
最終延長 |
72℃ |
5分 |
3. ツーステップ法ポリメラーゼ連鎖反応はんのうプログラム
手順 |
温度 |
時間 |
よへんせい(3) |
95℃ |
3~5分 |
へんせい |
95℃ |
30秒 |
アニールと延長(4) |
60~65℃ |
30秒/kb |
30~35サイクル |
||
最終延長 |
72℃ |
5分 |
(3) この予備変性条件はほとんどの増幅反応に適しており、いくつかの複雑なテンプレート、例えば:菌液、コロニー(特に酵母)のポリメラーゼ連鎖反応増幅、予備変性時間は適切に10分予備変性効果を高めるために、
(4) アニール温度はプライマーに応じてくださいサンショウウオ.値の設定。必要に応じて、温度勾配を確立することによってプライマーがテンプレートと結合する*適温度を探すことをお勧めします。また、アニール温度は増幅特異性を直接決定し、増幅特異性に差が見つかれば、アニール温度を適切に高めることができる。
(5) 延長速度については、デスティネーションクリップの長さが3 kbの場合、使用を推奨15秒/kb;ターゲットクリップの長さがより大きい場合3 kbの場合、使用を推奨30秒/kb。伸び率はテンプレートの複雑さに関係しており、発生率が低い場合は伸び時間を適切に高めることができます。
注意事項
1. 本製品は科学実験研究に使用され、臨床診断、治療などの分野に使用されてはならない。
2. 本製品では2 x Taq PCR添加混合物イオン濃度の不均一を防止するために、融解*全後に使用する必要があります。
3. すべての反応成分を氷の上で調製し、最後に加えることをお勧めします2 x Taq PCR添加混合物。
4. ゲノムテンプレートを用いたより長いフラグメント増幅には高品質精製を用いたデオキシリボ核酸模板,可以提高ポリメラーゼ連鎖反応
5. 本製品の増幅産物は使用可能であるトン/年クローン作成。本製品は添加緩衝液,ポリメラーゼ連鎖反応製品はゴムを切って回収してから十分に除去することができる添加緩衝液。
6. 泡染め法を用いた電気泳動後の染色を提案し、膠染め法は赤色指示帯の分散を招き、条帯指示に不利であり、青色指示帯に影響を与えない。青いリボンは、1%TAE緩衝液中の移動速度は約1500 bp、赤いリボンは1%TAE緩衝液中の移動速度は約100 bp。
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