こうそくぎゃくりゅうクロマトグラフ再現性
高速逆流クロマトグラフィー(High-speed Countercurrent Chromatography、HSCCCと略称する)は、1982年に米国国立衛生院Ito博士によって開発された新型、連続的な液液分配クロマトグラフィー技術であり、他のクロマトグラフィー技術と異なるのは固体担体を必要としないため、固体担体表面と試料が反応して試料の汚染、失活、変性、不可逆吸着などの悪影響を回避することができる。同時に、適用範囲が広く、迅速で、注入量が大きく、費用が低く、回収率が高いなどの利点もある。そのため、自分は生物、医薬、食品、材料、化粧品と環境保護などの分野で広範な応用を得て、特に天然産物活性成分の分離精製分野で重視されている。
高速逆流クロマトグラフィーは一方向性流体動力平衡システムの上に構築された逆流クロマトグラフィー分離方法であり、回転管の流体動力平衡を研究する際に偶然発見された。螺旋管がゆっくり回転すると、螺旋管の2相は端から端まで分布する。ある相を移動相として一方の端から他方の端へ溶出すると、他方の相のコイル管内の保持値は約50%になるが、この保持量は移動相の流速の増加に伴って減少し、分離効率を低下させる。しかし、螺旋管の回転速度を速めると、二相の分布が変化する。回転速度が臨界範囲に達すると、2相は螺旋管の長さ*に沿って分離され、1相はすべて先端の1段を占め、私たちはこの相を先頭相と呼び、もう1段はすべて末端の1段を占め、末端相と呼ぶ。高速逆流クロマトグラフィーはまさに二相のこの一方向性分布特徴を利用して、高い螺旋管回転速度の下で、尾端から首端相を送り込むと、それは尾端相を通って首端に移動し、同様に、首端から尾相を送り込むと、それは首端相を通って螺旋管の尾端に移動する。分離時には、螺旋管内に最初にその中の1相(固定相)を注入し、次に適切な端から移動相をポンプし、それにサンプルを載せて螺旋管に無限に分配させる。機器の回転速度が速いほど、固定相の保持が多くなり、分離効果が高くなり、分離速度が大幅に向上したため、高速逆流クロマトグラフィーと呼ばれている。
高速逆流クロマトグラフィーの製品優位性を簡単に述べる:
1、溶媒系の組成及び配合比は無限大であることができるため、理論的には任意の極性範囲内のサンプルの分離に適用でき、天然化合物の分離において独自の点がある。ポリテトラフルオロエチレン管中の固定相は液体で固相担体を必要としないため、固−液クロマトグラフィーにおける固相担体の使用による吸着損失を解消することができ、特に極性物質の分離に適している。
2、操作が簡便で、把握しやすい:高速逆流クロマトグラフィーの操作が簡単で、サンプルの前処理に対する要求が低く、一般的な粗抽出物で行うことができる調製分離或いは分析。
3、回収率が高い:固相担体を必要とせず、固相担体上の試料の不可逆吸着と分解による損失を取り除き、理論上の試料の回収率は達成できる。実験では分離条件を調整すれば、一般的に高い回収率がある。
4、再現性が良い:試料が強い界面活性作用を持たなければ、酸塩基性も強くなく、何度も試料を入れても、その分離過程は安定しており、しかも再現性はかなり良い。