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上海奉賢南橋
上海禾午生物科学技術有限公司
上海奉賢南橋
| 名称 | pU 6-Ets 2(マウス)-sgRNA 3-Cas 9-EGFP |
| 別称 | CGACTCTCCAGAGAACGGTG |
| プラスミド宿主 | ほ乳細胞 |
| プラスミド用途 | 遺伝子編集 |
| クリップのタイプ | クラスタ規則間隔の短い回文繰り返しシーケンス |
| フラグメント種 | ネズミ匹 |
| げんしかくていこう | アンペア |
| けいこうひょうしき | 緑 |
| プロモーター | U6 |
| 複製子 | pUC |
| じゅようじょうたい | Stbl3 |
| 温度 | 37度 |
| バックグラウンド担体 | pX458 |
| 正向引物 | U6-F |
注意事項:転化前に、このプラスミドに対応する抗生物質名、抗生物質使用濃度、感受性状態名、培養温度を正確に探してください。
1、プラスミド粉末を受け取ったら5000回転/分遠心1分、再加入20μl~50μl無菌水またはpH8.0の1*TE緩衝液はプラスミドを溶解し、室温で放置する1分;
2、から-80℃冷蔵庫から相応の感受状態を取り出し、氷箱の上に置いて解凍し、標識を作る。
3、取る2μlプラスミド添加100μl体感状態では、氷浴30分;
4、42℃ねつれっか90年代あ、再氷浴2分間;
5、加入900マイクロリットルアンチエイリアスポンド液体培地、180回転/分しんどうばいよう45分;
6、6000回転/分遠心5分、残すのみ100マイクロリットル上清混合菌体沈殿、
7、混合後の菌液を対応する耐性に加えるポンド平板の上に、適量のガラス玉を入れて、液体を塗る。
8、平板を順方向に培養する1時間、再倒置培養12時間~ 16時間;
9、モノクローナルコロニーを選択して対応する耐性のポンド液体培地中、振動培養12時間~ 16時間、実験の必要に応じてプラスミドを抽出する