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上海奉賢南橋
上海禾午生物科学技術有限公司
上海奉賢南橋
| 名称 | pCMV-3×FLAG-EFDD(ブタ)-Myc-Neo |
| 別称 | XM_021090459.1; |
| 遺伝子長 | 840 bp |
| プラスミド宿主 | ほ乳細胞 |
| プラスミド用途 | 蛋白発現 |
| クリップのタイプ | 読取りボックスを開く |
| フラグメント種 | 豚 |
| げんしかくていこう | アンペア |
| フィルタマーク | Neo/G418 |
| プロモーター | 巨細胞ウイルス |
| 複製子 | pUC |
| じゅようじょうたい | DH5a |
| 温度 | 37度 |
| バックグラウンド担体 | pCMV-T7-3×FLAG MCS Neo |
| 正向引物 | CMV-F |
注意事項:転化前に、このプラスミドに対応する抗生物質名、抗生物質使用濃度、感受性状態名、培養温度を正確に探してください。
1、プラスミド粉末を受け取ったら5000回転/分遠心1分、再加入20μl~50μl無菌水またはpH8.0の1*TE緩衝液はプラスミドを溶解し、室温で放置する1分;
2、から-80℃冷蔵庫から相応の感受状態を取り出し、氷箱の上に置いて解凍し、標識を作る。
3、取る2μlプラスミド添加100μl体感状態では、氷浴30分;
4、42℃ねつれっか90年代あ、再氷浴2分間;
5、加入900マイクロリットルアンチエイリアスポンド液体培地、180回転/分しんどうばいよう45分;
6、6000回転/分遠心5分、残すのみ100マイクロリットル上清混合菌体沈殿、
7、混合後の菌液を対応する耐性に加えるポンド平板の上に、適量のガラス玉を入れて、液体を塗る。
8、平板を順方向に培養する1時間、再倒置培養12時間~ 16時間;
9、モノクローナルコロニーを選択して対応する耐性のポンド液体培地中、振動培養12時間~ 16時間、実験の必要に応じてプラスミドを抽出する