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上海市奉賢区環城東路323号
上海語純生物科学技術有限公司
上海市奉賢区環城東路323号
トリグリセリド(TG)含有量検出キット
注意:本測定前に必ず取る2-3個の予想差異の大きいサンプルを予測して決定する。
試薬内容:
可視分光光度法
試薬一:自己準備、採取 100ミリリットル ガラス張りの空き瓶 45ミリリットルn−ヘプタン、45ミリリットルイソプロピルアルコールは、蓋をして混合し、4℃保存。
試薬二:液体 7mL×1ボトル、4℃保存。試薬三:液体 30mL×1ボトル、4℃保存。
試薬四:液体 10mL×1ボトル、4℃遮光保存。試薬五:液体 30mL×1ボトル、4℃遮光保存。試薬六:液体 30mL×1ボトル、4℃遮光保存。
標準品:粉剤×1ボトル、臨用前加 5mL试剂一,即 1mg/mLトリグリセリド標準溶液、4℃保存。
製品の説明:
TG長鎖脂肪酸とグリセリンから形成される脂肪分子であり、細胞膜の主成分であるだけでなく、重要な呼吸基質でもある。 測る定理: イソプロパノールによる抽出 TG,KOH皂化 TG後に加水分解するグリセリン及び脂肪酸を生成し、過ヨウ素酸グリセリンを酸化するホルムアルデヒドを生成し、 塩素イオンの存在下でホルムアルデヒドとアセチルアセトンが縮合する黄色物質が生成し、 420ナノメートル特徴的な吸収ピークがあり、その色の濃淡と TG含有量は正比例する。
自己準備機器と用品:
可視分光光度計、水浴釜、可変式ピペット、1mLガラス比色皿、二重蒸水及び 100mLガラス張りの空き瓶。
操作手順:
一、TGの抽出:
1、 組織:組織品質による(グラム):試薬一体積(mL)ために1:5~10のスケール(約定を取ることを提案する0.1g組織する1mL試薬一)氷浴の均質化を行い、8000グラム,4℃遠心分離10分、上清を取って測定を待つ。
2、 細胞、細菌:まず収集する 400-500万細胞または細菌を遠心管内に入れ、清を捨て、 1mL試薬一、超音波破砕
1分n(強度 20%超音波 2sあ、止まる 1s),8000g, 4℃遠心分離10分、上清を取って測定を待つ。
3、 血清(スラリー)などの液体サンプル:直接測定。二、測定操作:
1. 分光光度計予熱 30分、波長を 420ナノメートル、蒸留水をゼロに調整する。
2. 水浴鍋を予熱する 65℃。
試薬名(µL) |
ひょうじゅんかん |
そくていかん |
|
にじゅうじょうはつすい |
200 |
||
1mg/mL標準液 |
200 |
||
TGしけんえき |
200 |
試薬1 |
625 |
625 |
625 |
試薬二 |
125 |
125 |
125 |
試薬を加えてから十分に混合し、さらに試薬を加えて2、激しい振動 30秒,静置,待分层后取上层溶液 75µL、新規に配置の EPチューブの中。
3. トリグリセリド含量測定:
試薬名(µL) |
くうかん |
ひょうじゅんかん |
そくていかん |
上層溶液 |
75 |
75 |
75 |
試薬3 |
250 |
250 |
250 |
試薬四 |
75 |
75 |
75 |
よく混ぜて、65℃水浴3分 | |||
試薬5 |
250 |
250 |
250 |
試薬6 |
250 |
250 |
250 |
よく混ぜて、65℃水浴15分 | |||
取出 EP チューブ、冷却後、 420ナノメートルとして記す A.空、A.ひょうわ A.測定。注意:空管と標準管は1回測定するだけでよい。
三、計算式:
1. 血清(スラリー)中のトリグリセリド含有量:
TG 含有量(ミリグラム/リットル)=C標準品×(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)×100
=100×(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)
C 標準品:標準品濃度、1mg/mL;100:単位換算係数、1リットル=100ミリリットル。
2. 組織中のトリグリセリド含有量:
(1)
TG 含有量(mg/mgタンパク質)=C 標準品五、(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)÷(心肺蘇生術 ×五、)
=(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)÷Cpr
(2)サンプルの鮮重で計算する
TG 含有量(ミリグラム新鮮な重量)=C標準品五、(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)÷W
=(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)÷W
C标准品:1mg/mL;心肺蘇生術:サンプルタンパク質濃度、mg/mL;W:サンプルが新鮮で重い、g;V:試薬1の体積を加える、 1mL。
3. 細胞、細菌中のトリグリセリド含有量:
TG 含有量(ミリグラム/104 細胞)C 標準品×(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)÷細菌または細胞密度
=(A.測定-A.空)÷(A.標準-A.空)÷細菌または細胞密度
C 標準品:標準品濃度、1mg/mL;細菌または細胞密度:104 細胞/mL
注意事項:
1. 試薬キットには揮発性物質があり、実験中は手袋とマスクを着用する必要があり、試薬キャップを開けた後は速やかに蓋をする必要がある。
2. 試薬2を加えた後は激しく振動し、測定対象液中のトリグリセリドを十分に抽出する必要がある。
3. チェックアウト制限 100µ モル。
上海語純生物科学技術有限公司は、*生命科学、生物技術の背景を持つ人が共同で設立した技術企業です。会社は元世代細胞、腫瘍細胞及び細胞培養関連試薬製品に専念し、大学、食品、医薬、生物研究などの分野に関連技術サポートとサービスを提供している。
会社は設立以来、絶えず科学技術革新、製品開発を通じて、すでに顧客にオーダーメイド化細胞製品及び完全な細胞培養ソリューションを提供し、積極的に製品を探索、研究開発、深化と豊富にすることを通じて、現在基礎培地製品の種類は200種類以上に達し、細胞系は300種類以上、初代細胞は600種類近くに達している。私たちは一貫して「科学技術を発展させ、公衆の生命の健康に関心を持つ」ことを原動力として、技術革新を通じて、ハイテク人材を幅広く吸収し、絶えず*製品体系、豊富な製品チェーン、積極的に市場を開拓し、応用分野を拡充し、市場競争力のある「語純」ブランドを確立しました。
注意事項
1、あなたの安全と健康のために、実験服を着て使い捨て手袋とマスクをして操作してください。
2、本製品の優れた使用効果を維持するために、必ず提案された貯蔵条件に従って保存してください。
トリグリセリド(TG)含有量検出キット
