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上海市楊浦区国定東路275号8号棟815
上海徂徠同生物科学技術有限公司
上海市楊浦区国定東路275号8号棟815
T 0 P 10受容体細胞*
製品品名:*0 Chemically Competent Cell
製品貨物番号:G 6015-20(20本100 ul)、G 6015-100(100本100 ul)
仕様/概要:G 6015-20(20本100 ul)、G 6015-100(100本100 ul)
遺伝子型(かた)
F-mcrA△(mrr hsdRMS--mcrBC)φ80 lacZ△M15△lacX 74の回収△139△(ara leu)7697 galU galK rpsL(StrrR)端子A 1 nupG
簡単な説明:
T 0 P 10菌株はMC 1061菌株に由来し、現在実験室で使用されている感受性細胞の一つであり、遺伝子型はDH 10 Bと高度に類似している(DH 10 Bはgale 15型、T 0 P 10はgal U型)。CLBio*0は成長速度が速く(DH 5 aより速いが、Mach 1-T 1より成長速度が遅い)、10時間可視クローン、recA 1とenda 1の突然変異は挿入DNAの安定と高純度プラスミドDNAの抽出に有利である。クローンの構築、青白斑スクリーニングなどの実験に使用でき、鎖**抵抗性がある。CLBioシリーズT 0 P 10受容体細胞は特殊な技術により作製され、pUC 19プラスミドにより転化効率>108 cfu/μgを検出した。
操作の説明:
1.CLBio*0感受性細胞を氷に入れて溶かす(または手のひらまたは室温でしばらく放置し、菌体が氷水混合状態にある時に迅速に氷に挿入する)、目的のDNA(プラスミドまたは連結産物)を加え、EP管底を手で軽く混ぜ、25分間氷上で静置する。
2.42°C水浴は45秒間熱刺激し、迅速に氷に戻し、2分間静置し、揺れは転化効率を低下させる。
4.5000 rpmは1分間遠心分離して収菌し、100μ1前後の上清を残して重懸濁菌塊を軽く吹き付け、対応する抗生物質を含む2 YTまたはLB培地に塗布した。
5.プレートを37°C培養箱に逆さにして一晩培養した。青白斑のスクリーニング操作を行う場合、平板を37°Cで少なくとも13 h培養する.
注意事項:
1.CLBio受容体細胞が氷の上で融解する。氷の上に約5分置くと溶け、溶けてから8分以内にプラスミドを加えると転化効率に影響を与える。
2.プラスミドを混入したり、製品を接続したりする場合は、柔らかく操作しなければならない。
3.高濃度プラスミドまたは高効率結合生成物を形質転換することは、それに応じて塗布プレートに最終的に使用される菌の量を減少させることができる。
T 0 P 10受容体細胞*