プライベートコラム情報
Venusil stachydrine塩酸水ソ塩基専用クロマトグラフィーカラムは、益母草中の塩酸水ソ塩基を分析するために設計されている。この製品はシリカゲルを基質とし、結合相は中性のアミド基を採用しているため、親水作用クロマトグラフィーモードでは強極性、水溶性アルカリ性有機化合物に対して優れた選択性を持っている。
HILICは親水性作用クロマトグラフィーモードであり、その溶出は化合物の親水性/極性が増加する順序で配列され、流動相中の有機相の割合を高めると溶質の保持が増加し、典型的な流動相はアセトニトリル（40%〜97%）／水（または揮発性緩衝塩）であり、同時にそれはより高い揮発性の流動相または緩衝塩を使用することができ、質量スペクトル検出器と蒸発光検出器との併用を容易にする。
塩酸水ソ塩基の試験方法と分析図
2015版中国薬局方一部の益母草含有量測定項目下のクロマトグラフィー条件を参照：
プロピルアミド結合シリカゲルを充填剤とし、アセトニトリル−0.2%氷酢酸溶液（80：20）を流動相とし、蒸発光散乱検出器で検出した。理論段数は塩酸水ソ塩基で計算するには6000を下回らないことが必要である。
カラム：Venusil stachdrine、5μm，4.6*250mm
注文番号：VH 952505-LH
移動相：アセトニトリル：0.2%氷酢酸溶液＝80：20（v/v）
流速：0.5 mL/min
カラム温度：20℃
検出器：ELSD（蒸発発光散乱検出器）
注入量：10μL
保持時間/min |
りろんとうばんすう |
尾引き係数 |
17.888 |
15203 |
1.06 |
インストール
1、カラム包装箱を分解し、カラムのタイプ、規格を確認する。
2、柱の両端のシールプラグを外して包装箱に戻して予備する。
3、カラム管に表示された流動相の流れに応じて、PEEKヘッド及びPEEK管又はステンレス鋼管を用いてカラムを検査装置に接続する。
4、小内径の接続管部品を使用し、分析柱は一般的に内径が0.25 mm（0.010インチ）の管路を使用し、接続管路の長さを短縮し、それによってデッドボリュームを減少させる。
使用とメンテナンス
防護
カラムを接続して使用する際は安全に注意し、手袋、マスク、防護鏡を着用し、いかなる原因（管路の接続がきつくない、管路の老化、PEEKヘッドの老化）による溶剤とサンプルの漏洩が直接操作者に接触すると、操作者の健康に影響を与える。
使用方向
カラムを使用する際には、流動相の方向とカラムに示された矢印の方向を一致させる必要があります。特別な場合がなければ、逆方向の使用はお勧めしません（カラムの前のカラムの汚染物を洗浄する場合は、低流速逆方向洗浄を考慮することができます）
かっせい
新しい塩酸ソーダ専用カラムの出荷時のカラム中の液相はアセトニトリルであり、貯蔵と輸送中にカラムが一時的に枯渇する可能性があり、そのため、新しいカラムを初めて使用する前に、20倍カラムの体積より大きいアセトニトリルを使用して0.5 mL/minの流速で活性化した後、実験に必要な操作条件を選択して平衡させる必要があり、実験に必要な流動相に緩衝液が含まれる場合は、流動に等しい割合の有機相と水を遷移させ、塩析現象を避ける。
サンプル前処理
試料または流動相中の微粒子不純物によるカラム前篩板の目詰まりを避けるために、実験に用いたすべての試薬と試料は使用前に0.45μmまたは0.22μmの微孔質濾過膜を用いて濾過しなければならない。マトリックスが複雑なサンプルでは、SPE固相抽出システムを用いた前処理が推奨されている。
移動相とサンプルpH
カラムにより良い寿命と効果を得るために、メーカーが提案したpH範囲内で使用してください。塩酸ソーダ専用カラムのpH適用範囲は2.0-6.0で、pHが高すぎるとシリカゲルが溶解し、pHが低すぎると一部またはすべての結合相が脱落し、カラム性能が低下し、実験結果が再現されないようにしてください。
移動相及び試料溶媒
流動相が高有機相系の下で有機相と不相互溶解のリン酸塩または他の緩衝塩を使用することを避け、塩析によるカラムの損傷を避けるべきである。HILIC分離機構を妨害しないために、トリフルオロ酢酸と他のイオン対試薬を使用しないでください。可能であれば、溶媒効果によるピーク型の劣化を避けるために、できるだけ移動相溶解サンプルを選択し、水やDMSO溶解サンプルを使用しないでください。
カラム温和圧力
最高操作温度は60℃より低くなければならず、長期にわたって高温で使用すると（＞60℃）カラムが破損し、Ph>6.0で最も顕著に現れる。カラムは400 Barの圧力に耐えることができますが、長期にわたって高圧状態にあるとカラムの性能と寿命に影響を与え、正常な操作で使用する場合はカラム圧は200 Barを下回ることをお勧めします。
ほごばしら
マトリックスの複雑なサンプル分析を行う場合、カラムをより良い寿命にするために、カラムの前に保護カラムを使用し、システム中の微粒子を遮断し、サンプルの固定相への化学汚染を遅らせることを提案します。
せんじょうルーチン
カラムの使用が終わったら、50%アセトニトリル、5%アセトニトリル、100%アセトニトリルを順に使用して、少なくとも20倍カラムの体積を0.5 mL/minで洗い流し、カラムの前に接続保護カラムがあれば、カラムと切断してそれぞれ洗い流しなければならない。
ちょぞう
カラムを保存する場合は、カラムに水や緩衝液を残さずに、アセトニトリルをカラムの封止溶媒として使用することができます。長い間使われていなかったカラムは、柱床の干上がりを防ぐために、定期的にカラムを洗浄し、洗浄が終わったらプラグでカラムの2つを塞ぐことをお勧めします
