雨蛙素誘導マウスの慢性膵炎動物モデル

雨蛙素誘導マウスの慢性膵炎動物モデル

雨蛙素誘導マウスの慢性膵炎動物モデル：

一、実験動物の選択

• ‌品系と性別鄒：C 57 BL/6雄性マウス（8-10週齢、体重20-25 g）、一部の研究はPRSS 1遺伝子組み換えマウスを用いてヒト慢性膵炎（CP）類似性を増強する
  。

• ‌飼育条件鄒：SPF級環境、実験前に12時間絶食（自由飲水）
  。

二、雨蛙素の調製と投与方案

1. ‌母液調製‌

• 雨蛙素1 mgを生理食塩水1 mLに溶解し、1 mg/mL母液に配合し、濾過除菌後に分装凍結保存する
  。

2. ‌作動液濃度‌

• 使用前に5 ~ 10μg/mL（生理食塩水）に希釈し、常用注射用量は50μg/kg。

3. ‌投与スキーム‌

• ‌鄒：週3回腹腔内注射（50μg/kg）、6-7週間持続
  。

• ‌強化策鄒：LPS（10-15 mg/kg）と連携して繊維化を増強し、最後のアマガエル注射後にLPSを追加する
  。

• ‌急性から慢性へ鄒：複数回の急性誘導（例えば週に複数回の雨蛙素注射）による慢性病歴のシミュレーション
  。

三、モデル評価指標

1. ‌病理学的観察‌

• ‌HE染色鄒：腺胞細胞が小さくなり、炎症性細胞が浸潤し、間質線維化。

• ‌コラーゲン沈着鄒：ク味酸−シリウス赤染色定量線維化度
  。

• ‌免疫グループ化鄒：α-SMA発現を測定し、膵星状細胞の活性化を反映する
  。

2. ‌生化学的指標‌

• 血清定粉酵素、リパーゼレベル
  。

• 炎症因子（IL-6、IL-1β、TNF-α）検出
  。

3. ‌分子機構解析‌

• Western blotによるNF−κB/p 65、IL−6などの経路タンパク質の検出
  。

• qPCRによる線維化関連遺伝子の解析（Smad 3など）

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