ポリペプチド合成と修飾技術サービス

実験技術概要：ポリペプチド合成は固相合成順序が一般的にC端（カルボキシル基端）からN端（アンモニア基端）へ合成される。従来のポリペプチド合成は、溶液中で行われる液相合成法と呼ばれていた。ポリペプチド合成は総じて2種類に分けられる：固相合成と液相ポリペプチド合成。

実験技術原理：

ポリペプチド合成器は固相合を反応原理とし、密閉された防爆ガラス反応器にアミノ酸を既知の順序（配列、一般的にはC端-カルボキシル基端からN端-アミノ端へ）で絶えず添加、反応、合成させ、操作は最終的にポリペプチド担体を得た。固相合成法は、ステップごとの製品精製の難しさを大幅に軽減した。副反応の発生を防ぐために、反応に参加するアミノ酸の側鎖はすべて保護されている。カルボキシル末端部は遊離しており、反応前に活性化しなければならない。

実験操作フロー：

1、脱保護：Fmoc保護のカラム及びモノマーは、−種塩基性溶媒（piperidine）を用いてアミノ基の保護基を除去しなければならない。

2、活性化及び架橋：次のアミノ酸のカルボキシル基は活性化剤により活性化される。

キーを押します。このステップでは、反応を完了させるために大量の超濃度試薬を使用する。循環：この2ステップの反応は合成が完了するまで繰り返し循環する。

3、溶出及び脱保護：ポリペプチドがカラムから溶出され、その保護基が脱保護剤（TFA）により溶出及び脱保護される。

ポリペプチド修飾タイプ：

1、C端マーキング技術：

C末端アミド化（Amidation，C-termainal）

アルデヒド化（Aldehydes）、アルコール化（Alcohols）、pNA（P−Nitronailide）

AMC、AFC、メルカプトエチルアミン化（Cysteramide）、エステル化（Ester）、N−アルキル化（N−AlkyI Amides）など

2、N端タグ技術：

アセチル化Acetylated（Acetylated）、Palmytolyl、HYNIC、ビオチン標識（Biotinylated）、Brアセチル化（Bromoacetylated）、および、（Acetylated）を含む）。（Acetylated）、（Palmytolyl、HYNIC、ビオチン標識（Biotinylated）、（Broアセチル化）を含む）。（Brom

3、蛍光標識修飾：

N端修饰:Bodipy FL、Cy 3、Cy 5、ドクサスレッド、5-Tamra、5-odoacetamidoフルオレセインローダミン110、ローダミンB Luciferin、EDANS

FAM、FITC、MCA、Rox、スルホローダミン101、5−TAMRA

4、環化反応：

首尾がリングになり、中間がリングになり、特殊がリングになる（N->C or Head to Tail）

2対のジスルフィド結合、3対のジスルフィド結合（S-S bond formation）.Trillide formation）天然生成物活性ペプチド環形成（Cyclic-natural peptides）

5、メチル化修飾：

Lys(For),LysS(Me), Lys(Me)2, Lys(Me)3, Arg(Me)2 symmetrical, D-Tyr(Me),D-Tyr(Et)Nエンドメチル化（N−Me Arg，N−Me−Asp，N−Me−Glu，N−Me−Leu，N−Me−Nle，N−Me−Nva，N−Me−Phe，N−Me−S N−

Me Ser、N-Me-Trp、N-Me-Thr、N-Me-Val）

6、いくつかの特殊修飾：

各種カップリング（BSA，KL H conjugated peptides for antibody production）、リン酸化（Phosphoserine，Phosphothreonine，Phosphotyrosine）、スルホン化（Sulfated Tyrosine or Serine）、MAPS（MultipleAntigenic Peptide）、グリコペプチド（Glycopeptides）PEG修飾（PEGylation）

実験上の注意：

顧客提供：

1、ポリペプチド配列、数量、純度及び特殊要求

2、凍結乾燥ポリペプチドは-20度保存または室温保存できる

3、溶液ペプチドは凍結乾燥よりもはるかに不安定であり、溶液は中性PH（5-7）-20度で保存すべきである。

4、サンプルの繰り返し凍結融解を避けるため、いい小分けにして保管する。

提供基準：

台成ポリペプチド、データ.

その他：

軒（のき）溶媒は超純抽気水であり、希薄Z酸またはアンモニア水はそれぞれアルカリ性または酸性ポリペプチドの溶解にも役立つ。これらの方法を使用しても溶解しないポリペプチドの場合は、DMF、尿素、guanidiam、chloride、acetonitnleで溶解することをお勧めします

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