細胞蛍光染料標識測定実験

細胞蛍光染料標識測定実験

Zenon⑧標識技術は蛍光標識抗体を製造するために迅速で汎用的で信頼性のある実験方法を提供し、この標識方法は各種蛍光染料を利用することができ、出発原料はハイブリドーマ細胞の培養上清液のような極めて少量で未精製の抗体であることができる。Zenon@標識技術を用いて標識された抗体は、すべての直標抗体を使用できる応用分野に適している。Zenon@タグ技術の利点は次のとおりです。

●10分貼り付け時間

●各標識1〜20マイクログラム抗体

●BSA及び他の安定タンパク質と適合

●柔軟な抗体標的

Zenon⑧-マーキング技術はどのように動作するか

Zenon@標識技術は、ヒト及びマウスのIgG 1、lgG 2 a及びlgG 2 b抗体及びウサギgG抗体を標識するための多機能で使いやすい方法を提供する。特殊に設計されたZenon@断片は1対のFc断片だけを結合し、この高速、非共有結合結合方法は少量の1対（図1）Zenon@標識技術を迅速に標識することができ、簡単で効率的である、マーカーステップ全体で10分しかかかりません。

Zenon@抗体カップリングが形成されると安定して保存することができ、使用前に非特異的なlgGを添加して、カラム精製を必要とせずに未結合のZenon⑨フラグメントを閉鎖する必要がある。したがって、Zenon@複合体はサンプルに直接適用することができる。

Zenon@標識技術によって標識された抗体は、観察された直接標識抗体カップリングと同様の蛍光強度または酵素活性を示す（図2）。

Zenon@抗体の非共有結合標識を微量標識キット、モノクローナル標識キット、タンパク質標識キットの共有結合標識と比較した。

図2.Zenon@標識技術により製造された標識抗体の高さは、直接標識抗体よりも高いか、または高い。別藻藍蛋白（APC）共役標識を使用するか、1マイクログラムのZenon⑨APC複合体非共役標識各種リンパマーカー抗体を使用する。そして、マーカーの抗

体はヒト末梢血リンパ球試料の染色に用いられる。Zenon@染色複合体を調製する際、Zenon@標識技術試薬と使用する一級抗体の割合を高めることにより、当該複合体の輝度をさらに高めることができる。

Zenon@タグ技術：エンドタグ柔軟性

マーカーの色を変更したり、特定の蛍光が用途や抗体に適しているかどうかを検出したりする必要がある場合、Zenon@マーカー技術は*のマーカーの柔軟性を提供します。広範囲に選択可能なマーカー、汎用的なマーカー技術により、フローサイトメトリー（図3）と蛍光イメージング（図4と5）で異なる色を組み合わせた多色応用画像を簡単に得ることができます。

図3.フローサイトメトリーにおけるZenon⑧マーキング技術の使用ヒト末梢血白血球は、予めZenon⑧Alexa Fluor@647マウスIgG 1標識キット（Z 25008）で標識された抗CD 3マウスgG 1抗体（A 21330）、予めZenon⑨RアルギンマウスIgG 1標識キット（Z 25055）で標識された抗CD 4マウスgG 1抗体（A 21334）、及び予めZenon⑧AlexaFluor@488図Aと図Bは、オレンジ蛍光信号と緑色蛍光信号または赤色蛍光信号とオレンジ蛍光信号をそれぞれ区別し、細胞を区別することができ、Zenon@標識抗体が同じサンプルで相互に干渉しないことを証明することができることを示している。サンプルを分析するために使用された機器と設定：アルギンとAlexaFluor@488染料は488 nm励起光を用い、AlexaFluor⑧647染料には633 nm励起光を用いた。

図4.蛍光イメージングにおけるZenon@マーキング技術の使用

厚さ14μmのマウス海馬冠状切片を切り取り、対応する。Zenon⑧Alexa Fluor@488マウスgG 1標識キット（Z 25002）で標識された抗a−マイクロチューブ一級抗体（A 11126）で染色した。スライスはNeuroTrace⑨530/615赤色蛍光Nissl染料（N 21482）で再染色してニューロン細胞体を観察し、Hoechst 33258（H 1398、H 3569、H 21491）で染色して細胞核を観察した。

図5.蛍光イメージングにおけるZenon@マーキング技術の使用

微小管タンパク質とミトコンドリアプローブで標識された牛肺動脈内皮細胞微小管タンパク質にZenon@Alexaを用いたFluor@488核酸をDAPI（D 1306、D 3571、D 21490）を用いて染色した。

料金基準/サービスサイクル/提供結果：

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