KMS-21 BM _ヒト多発性骨髄腫細胞

KMS-21BM_ヒト多発性骨髄腫細胞

製品情報

細胞名：KMS-21 BM _ヒト多発性骨髄腫細胞

ジェネリックソース： 人

性別年齢： 女性、67歳

組織ソース： 胸腔貯液

成長特性： けんだくせいちょう

細胞形態： リンパ球様

細胞規格： 1 X 10⁶cells/T 25または1 mL凍結貯蔵管

培養条件：RPMI 1640+10%ウシ胎児血清，37℃、5%二酸化炭素

とうけつじょうけん： 90%のFBS+10%のDMSO

継代方法： 1：3世代，2～3日に1世代

細胞培養操作

ドライアイス輸送：細胞を受け取ったら直ちに液体窒素に転入して保存するか、-80°C冷蔵庫の短期冷凍保存、または直接回復

じょうおんゆそう：細胞を受け取ったら、直ちに細胞培養瓶を包装箱から取り出し、以下の手順に従って培養継代を行ってください

細胞継代：細胞密度は80%〜90%に達し、継代培養を行うことができる

培養ボトル中の細胞操作手順

壁に貼り付けて培養した細胞については、送付前に培地を培養瓶全体に満たし、製品輸送中の壁に貼り付けた細胞の脱落を減らすことができます。

1. 細胞を受け取ったら、汚染がないか注意して観察してください。培養瓶を倒置顕微鏡下に置いて濁り、細菌汚染の有無を注意深く検査した。輸送中に揺れがあり、温度変化にも敏感な細胞もあるため、一部の細胞が脱落して浮遊する場合があります。これらの細胞はまだ生きている細胞です。捨てないでください。遠心濃縮後に継代して使用することができます。

2. 壁貼り細胞については、生物安全キャビネット環境において、真空ポンプで培養瓶中の余分な培地を残り5 ~ 8 mL程度まで除去し、その後、培地に応じて適切なCO 2含有量の37を選択する℃恒温培養箱で培養し、キャップを緩める。細胞が培養瓶にいっぱい生えている場合は、すぐに継代してください。

3. 懸濁した細胞については、生物安全キャビネット環境において、培養瓶の細胞を遠心管に移し、150 gを5分間遠心分離し、上清を除去した後、5 mL培地で細胞を吹き飛ばし、新しい培養瓶に移し、その後適切なCO 2含有量の37に置く℃恒温培養箱で培養する。

凍結保存管細胞操作工程

注意：細胞の高生存率を保証するために、製品を受け取ったら、すぐに解凍培養してください。

1. 凍結貯蔵管を37に置く℃水浴中にゆらゆらと揺れ、急速に解凍する。汚染を避けるために、凍結貯蔵管の口が水面の上に置かれていることを確保する。解凍には迅速で、約1分かかります。

2. 一旦凍結貯留管中の液体が溶けたら、すぐに取り出し、アルコールスプレーを用いて凍結貯留管表面を拭き取る。このステップから、後続の操作は生物安全キャビネットで行わなければならない。

3. 凍結貯留管中の液体を5 mLの完培地を含む遠心管に移し、150 gを5分間遠心し、真空ポンプで上清を除去した。

4. 培地を使用して細胞を再懸濁し、新しい培養瓶に移した。細胞回復の生存率を保証するために、培地を37℃水浴は予熱して使用する。

5. 細胞を適切なCO 2を含む37に配置する℃恒温培養箱で培養する。

壁細胞継代培養

1. 培養ビン中の培地を吸引し廃棄し、Pを添加するたわごと潤洗1回。

2. 参加1mL 0.25（w/v）トリプシン-EDTA溶液を加え、37℃培養箱で培養し、細胞が壁から脱落して分離するまで培養した。この手順には約3が必要です-5分です。

3. 参加2ミリリットル培地中でトリプシンを中和し、軽く吹きつけて細胞を培養瓶の表面から吹き落とし、細胞を分散させた。

4. 細胞懸濁液を15mL遠心管には、150 gを5分間遠心分離、真空ポンプで上清を除去した。適量の培地を採取して細胞を再懸濁し、新しい培養瓶に移して培養した。

懸濁細胞の継代は以下の方法を参考にすることができる：

一、直接継代法

1. 懸濁細胞が80%〜90%（細胞懸濁液が黄色くなる）に成長すると、継代することができる、

2. 用いるストロー吸蔵細胞懸濁液1/2 ~ 1/3、

3. 適量の新鮮な培地を加え、培養を続けた。

   二、遠心継代法（細胞破片が発見された場合）

4. 細胞懸濁液をえんしんかん内;

5. 150 gは5 min遠心分離し、上層清液を廃棄した、

6. 新鮮な培地を用いて細胞を再懸濁する、

7. ストローは適量の細胞懸濁液を吸い上げ、新しい培養瓶、さらに適量の新鮮な培地を加え、培養を続けた。

細胞凍結保存操作

1. 1000 rpm遠心分離5分で上清を除去した。血清重懸濁細胞1 mLを加え、細胞数に応じて血清とDMSOを加え、軽く混ぜる，DMSO最終濃度は10%、細胞密度は1 x 10以上⁶/mL，各凍結保存管は1 mLの細胞懸濁液を凍結保存し、凍結保存管に注意して標識をしっかりと行う；

2. 凍結貯蔵管をプログラム冷却ボックスに入れ、−80°C冷蔵庫に入れ、少なくとも2時間後に液体窒素灌漑貯蔵に移す。

一部の関連細胞は以下の通りである：

細胞の詳細については、癌中皮腫（肺原発）NCI-H 226肋膜積腋窩（転移）鱗細胞