ヒト膠腫細胞U 373

ヒト膠質腫細胞U373

概要：問題のある細胞系：認識ミス/汚染。U−251 MG誘導体として示されている。この細胞系は1973年にウプサラ大学で設立された原始星細胞腫細胞系ではない。原始U-373 MG細胞系はウプサラU-373 MG（Cellosaurus＝CVCL _ 2818）を参照

品番：WS-S1465

仕様：1×10ラテックス細胞/T 25培養瓶

一、細胞基本情報

-細胞由来：脳

-細胞形態：上皮細胞様、壁貼り成長

-細胞含有量：＞1×10ラテックス細胞/瓶

-包装規格：T 25培養瓶/1 mL凍結保存管

-製品用途：科学研究用のみ、

二、 常温細胞受入当日処理細則

ステップ：受入と検査

・実行部（汎用フロー）のステップ1、2。

ステップ2：培地交換と細胞収集

・ボトルの後ろを消毒し、超清浄テーブルでキャップを開ける。

・同梱培地への交換。

・特に注意：顕微鏡下で多くの細胞懸濁が発見された場合、瓶内のすべての培地を無菌遠心管に移し、遠心（例えば1200 rpm、5 min）で細胞を収集し、古い培地を廃棄する必要がある。

・交換または収集が完了したら、培養瓶を培養箱に入れて2〜3時間静置を続ける。

ステップ3：静置後処理（細胞密度による）

三、 細胞継代操作手順

A.壁貼り細胞の継代

1.準備：古い培地を吸引・廃棄する。

2.洗浄：培養瓶の側壁に沿ってゆっくりとPBSなどの洗浄液を添加し、軽く揺動した後に吸引し、残留血清を除去する。

3.消化：予熱したyi酵素（例えばT 25に1 ml加える）を加え、yi酵素がすべての細胞を覆うように軽く揺動させる。

4.インキュベーション：室温で約2分間消化する（時間は細胞によって異なる）。

5.観察：顕微鏡下で観察し、≧90%細胞が丸くなり、脱落するまで。到達していない場合は、30秒ごとにチェックすることができます。

6.終了：細胞を充分解した後、直ちに2倍のyi酵素体積の予熱培地を添加して消化を終了する。

7.吹き付け：ピペットで瓶の壁を軽く吹き付け、細胞を脱落させ、単細胞懸濁液に分散させる。

8.遠心分離：細胞懸濁液を遠心管に移し、200×gを3〜5分間遠心分離し、清を廃棄する。

9.再懸濁と接種：少量の新鮮培地で細胞沈殿を再懸濁し、適切な割合で希釈した後、新しい培養瓶に接種する。

10.培養：培養箱に入れる。通常のキャップを使用する場合は、キャップを緩めてガス交換を行う必要があります。

B.懸濁細胞の継代

1.収集と遠心分離：細胞懸濁液をすべて遠心管に移し、1000 rpmで5分間遠心分離し、清を廃棄した。

2.再懸濁：1−2 mlの新鮮培地を添加し、細胞を柔らかく再懸濁した。

3.接種：細胞懸濁液を1：2の割合で新T 25培養瓶に移し、総培地量を5−8 mlに補充した。

4.培養：培養箱に入れて培養を続ける。

四、 特殊問題処理：輸送中に脱落した壁貼り細胞

壁に張り付いていない細胞の一部は輸送中に脱落し、正常な現象であり、以下の手順で処理する：

1.収集：瓶内のすべての培地を無菌遠心管に移し、遠心（1200 rpm、3-5 min）して上清を捨てる。

2.洗浄：PBSを用いて細胞を再懸濁し、再び遠心分離（1200 rpm、3−5 min）してPBSを廃棄した。

3.消化：約1 mlの0.25%yi酵素を加え、軽く混ぜ（激しく吹き付けない）、培養箱に入れて1-2分間消化する。

4.終止と分散：取り出した後に軽く吹きつけて細胞団を分散させ、迅速に3-5 mlの培地を加えて消化を停止し、遠心分離（1200 rpm、3-5 min）して上清を捨てる。

5.再懸濁と接種：5 ml培地の再懸濁を添加し、新しい培養瓶/皿に比例して接種した。

6.観察：鏡下観察。細胞が単粒または3〜5個の細胞のみの小塊であれば、正常に培養され、壁にくっついて成長することができる。--

五、 アフターサービス政策の概要

重要なヒント：異常な問題、時間撮影そして、私たちに連絡することがアフターサポートを受ける鍵です。