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江蘇省蘇州市緑地大道1355号
蘇州千舎生物科技有限公司
江蘇省蘇州市緑地大道1355号
ヒトホジキンリンパ腫細胞Hs 611.T
概要:Hs 611.T人ホジキンリンパ腫細胞は48歳女性ホジキン病患者のリンパ節組織に至った。NBL細胞株の一部。この細胞株はATCCによって産生または特性化される。私たちはそれが継代後に特定の形態、純度、その他のいかなる特性を維持することを保証しません。
品番:WS-S14667
仕様:1×10ラテックス細胞/T 25培養瓶
一、細胞基本情報
-細胞由来:リンパ節
-細胞形態:リンパ母細胞様、壁貼り成長、懸濁成長
-細胞含有量:>1×10ラテックス細胞/瓶
-包装規格:T 25培養瓶/1 mL凍結保存管
-製品用途:科学研究用のみ、
二、培地と培養条件
1.培地
DMEM培地、10%ウシ胎児血清、1%デュアルリアクタンス
推奨血清:WinSera FBS500-WP-002
2.培養条件
−気相:95%空気+5%COタンパ温度:37℃、培養箱の湿度:70~80%
3.凍結保存と貯蔵
−凍結保存液:90%ウシ胎児血清+10%DMSO(現配合)
二、 常温細胞受入当日処理細則
ステップ:受入と検査
・実行部(汎用フロー)のステップ1、2。
ステップ2:培地交換と細胞収集
・ボトルの後ろを消毒し、超清浄テーブルでキャップを開ける。
・同梱培地への交換。
・特に注意:顕微鏡下で多くの細胞懸濁が発見された場合、瓶内のすべての培地を無菌遠心管に移し、遠心(例えば1200 rpm、5 min)で細胞を収集し、古い培地を廃棄する必要がある。
・交換または収集が完了したら、培養瓶を培養箱に入れて2〜3時間静置を続ける。
ステップ3:静置後処理(細胞密度による)
密度 > 80% |
行う継代。推奨継代スケール1:2~1:3。不明な場合はテクニカルサポートにお問い合わせください。 |
密度 < 80% |
継続培養。キャップを緩めたり、ガス交換を保証するために通気キャップを使用したりしてください。 |
全培地中の細胞を遠心分離して収集し、新鮮な培地で再懸濁した後、培養を続ける必要がある。 |
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大量の壁細胞浮遊 |
遠心的に細胞を収集した後、遠心管で消化継代を試みたり(下の特別な処理を参照)、すぐに技術サポートに連絡したりすることができます。 |
三、 細胞継代操作手順
A.壁貼り細胞の継代
1.準備:古い培地を吸引・廃棄する。
2.洗浄:培養瓶の側壁に沿ってゆっくりとPBSなどの洗浄液を添加し、軽く揺動した後に吸引し、残留血清を除去する。
3.消化:予熱したyi酵素(例えばT 25に1 ml加える)を加え、yi酵素がすべての細胞を覆うように軽く揺動させる。
4.インキュベーション:室温で約2分間消化する(時間は細胞によって異なる)。
到達していない場合は、30秒ごとにチェックすることができます。
6.終了:細胞を充分解した後、直ちに2倍のyi酵素体積の予熱培地を添加して消化を終了する。
7.吹き付け:ピペットで瓶の壁を軽く吹き付け、細胞を脱落させ、単細胞懸濁液に分散させる。
8.遠心分離:細胞懸濁液を遠心管に移し、200×gを3〜5分間遠心分離し、清を廃棄する。
9.再懸濁と接種:少量の新鮮培地で細胞沈殿を再懸濁し、適切な割合で希釈した後、新しい培養瓶に接種する。
10.培養:培養箱に入れる。通常のキャップを使用する場合は、キャップを緩めてガス交換を行う必要があります。
1.収集と遠心分離:細胞懸濁液をすべて遠心管に移し、1000 rpmで5分間遠心分離し、清を廃棄した。
2.再懸濁:1−2 mlの新鮮培地を添加し、細胞を柔らかく再懸濁した。
3.接種:細胞懸濁液を1:2の割合で新T 25培養瓶に移し、総培地量を5−8 mlに補充した。
4.培養:培養箱に入れて培養を続ける。
四、 特殊問題処理:輸送中に脱落した壁貼り細胞
壁に張り付いていない細胞の一部は輸送中に脱落し、正常な現象であり、以下の手順で処理する:
1.収集:瓶内のすべての培地を無菌遠心管に移し、遠心(1200 rpm、3-5 min)して上清を捨てる。
2.洗浄:PBSを用いて細胞を再懸濁し、再び遠心分離(1200 rpm、3−5 min)してPBSを廃棄した。
3.消化:約1 mlの0.25%yi酵素を加え、軽く混ぜ(激しく吹き付けない)、培養箱に入れて1-2分間消化する。
5.再懸濁と接種:5 ml培地の再懸濁を添加し、新しい培養瓶/皿に比例して接種した。
6.観察:鏡下観察。細胞が単粒または3〜5個の細胞のみの小塊であれば、正常に培養され、壁にくっついて成長することができる。--
状況 |
処理ポリシー |
前提条件 |
細胞状態が悪い/活着率が低い |
ネゴシエート可能な再送 |
写真を記録してテクノロジーに連絡する/販売サポート。 |
微生物汚染 |
無料再送 |
受け取り24時間以内クリアな写真(未開封ボトルの外観及び鏡下状態)を提供する。 |
マイコプラズマ汚染 |
無料再送 |
受け取り48時間以内に、次の手順に従います。(英語)。(英語):(英語):(英語):(英語):(英語):(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語)(英語陽性と検出された。注意:上澄みを凍結保存する48時間後に検出された結果は無効です。 |
液漏れ |
ネゴシエート可能な再送 |
出荷日写真記録。原瓶培地を保存して無菌容器で培養する場合、3日以内に汚染。 |
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無料再送なし |
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非推奨外因性試薬の使用 |
無料再送なし |
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非質量問題細胞死 |
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出荷日から1ヶ月以内。 |
実験データが理想的ではない |
退かない/交換 |
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重要なヒント:異常な問題、時間撮影そして、私たちに連絡することがアフターサポートを受ける鍵です。