HEC-1-Bヒト子宮内膜腺癌細胞

製品名：HEC-1-Bヒト子宮内膜腺癌細胞

ブランド：上海研尊生物
細胞数：1 x 10 ^ 6 cells
細胞活力：95%（Viability by Trypan Blue Exclusion）
細胞継代：1：4〜1：6継代、週に2～3回液交換をする
成長条件：気相：空気、95%、二酸化炭素、5%温度：37℃
細胞検査：細胞はHIV-1、HBV、HCV、マイコプラズマ、細菌、酵母及び真菌を含まない
培養条件：DMEM（高糖類）+10%FBS+1%P/S、37℃，5% CO2
継代方法：1：2-1：3の2日に1回液体交換を提案する
凍結保存条件：無血清細胞凍結保存液
凍結保存条件：90%FBS+10%DMSO
細胞凍結保存：液体窒素凍結保存

細胞の後処理

細胞を培養瓶で良好な状態に培養した後、培養液を充填し、瓶の口を密封するのは細胞輸送の方法である。細胞を受け取って自分の実験室に戻ったら、まず外装を開けて、75%アルコール散布瓶全体を消毒した後、超浄台内に置き、厳格に無菌操作する、培養箱の静置2～4時間。鏡下観察：超えていない合流度80%の場合、瓶詰めの培養液を遠心管に集め、加える培地6 ml、投入37℃、5%CO 2インキュベーションタンク培養、80%の合流度を超える場合、状況に応じて継代または凍結保存し、具体的な操作は細胞培養ステップを参照する。（注意出荷されているのが密封培養瓶の場合は、培養箱に入れて培養瓶の蓋を緩め、継代後に1本は原瓶の中の培地を、もう1本は自分で配合した培地を使うことをお勧めします）

HEC-1-Bヒト子宮内膜腺癌細胞培養手順

一、ふっきゅうさいぼう:を含む1 mL細胞懸濁液の凍結保存管を37℃水浴中で急速に揺動解凍し、5 mL培地を加えて均一に混合した。1000 RPM条件下で5分間遠心分離し、上澄み液を捨て、補充する4−6 mL培地後に均等に吹き付けた。その後、すべての細胞懸濁液を培養瓶に一晩添加して培養する（または細胞懸濁液を添加する）6 cm皿)、一晩培養する。翌日に液を交換し、細胞密度を検査した。

二、細胞継代：細胞密度が80%〜90%で、継代培養を行うことができる。

a）、壁貼り細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

1.培養上清を廃棄し、カルシウム、マグネシウムイオンを含まないPBSで細胞を1〜2回潤洗した。

2.消化液1−2 ml（0.25%Trypsin−0.53 mM EDTA）を培養瓶に入れ、37℃培養箱に入れて1−2 min消化し、その後顕微鏡下で細胞消化状況を観察し、細胞の大部分が丸くなり脱落した場合、速やかに操作台に戻し、培養瓶を数回軽くたたいてから加える5 ml以上含む10%血清の培地は消化を停止する。

3.細胞を軽く吹き付け、脱落後に吸引し、1000 RPM条件下で8-10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1-2 mLの培養液を補充した後、均等に吹き付ける。

4.培養液を5−6 ml/瓶で補充し、細胞懸濁液を5−6 mlの培養液を含む新しい皿または瓶に1：2の割合で分けた。

b）、懸濁細胞の場合、継代は以下の方法を参照することができる：

方法1：細胞を収集し、1000 RPM条件下で8〜10分間遠心分離し、上澄み液を捨て、1〜2 mlの培養液を補充した後、均等に吹き、細胞懸濁液を1：2〜1：5の割合で新しい8 ml培地を含む新しい皿または瓶に分けた。

方法2：半数の液交換方法を選択し、半数の培地を捨てた後、残りの細胞を懸濁し、細胞懸濁液を1：2から1：3の割合で新しい8 ml培地含有新しい皿または瓶に分けることができる。

に言及お客様が受信した場合2 mlの小管細胞は、細胞を受け取った後、75%のアルコールをスプレーして管全体を消毒した後、超浄台または安全棚に入れ、厳密に無菌操作する。小管細胞をT 25培養ビンまたは6 cmシャーレ、5 ml前後の培地を加えて混和し、培養箱に入れて一晩培養した後、細胞密度を確認した：もし密度が80%を超えていなければ、液を変えて培養を続け、状況に応じて継代または凍結保存する。密度が80%を超えると、直接継代を行うことができます（方法は同じです）。

三、細胞凍結保存：（注：無血清凍結貯留液凍結貯留細胞の方法は弊社を参考にしてください）

1、細胞は培養瓶を覆うまで成長する80%面積の場合、25 cm 2培養瓶の培養液を捨て、PBSで細胞を1回洗浄する。

2、追加0.25%消化液は約1 mlを培養瓶に入れ、逆さま顕微鏡下で観察し、細胞が収縮して丸くなったら培養液を加えて消化を中止し、細胞を軽く吹きつけて脱落させ、その後懸濁液を15 ml遠心管に移し、1000 rpm遠心5 min ;

3、適量の凍結貯留液を用いて細胞を再懸濁し、凍結貯留管に放置する。

4、まず細胞凍結保存管を−20℃で1.5 h、次いで−80℃に移した

一部の関連細胞は以下の通りである：