ブルー舌ウイルス酵素結合抗体ELISA検出キット

ブルー舌ウイルス酵素連合抗健康診断テスターボックス使用説明書

検出原理

本キットはブルー舌ウイルス抗原にプリパックされた酵素標識板、酵素標識物及びその他の組み合わせ剤から構成され、実験時に酵素標識板に対照血清と検査待ちサンプルを添加し、インキュベート後にサンプルにブルー舌ウイルス抗体が含まれていれば、酵素標識板上の抗原と結合し、洗浄により結合していない他の成分を除去した後、酵素マーカーを加え、酵素マーカープレート上の抗原抗体複合体と特異的に結合する、さらに洗浄して未結合の酵素標識物を除去し、穴にTMB基質液を添加し、酵素標識結合物と反応して青色生成物を形成し、発色の深さはサンプル中の特異的抗体含有量と正の相関を形成し、終止液を添加して反応を停止した後、生成物は黄色に変化した、酵素スケールを用いて450 nm波長で各反応孔中の吸光値を測定し、すなわち試料がブルー舌ウイルス抗体を含有しているかどうかを知ることができる。

キット組成

貯蔵及び有効期間

2〜8℃で保存し、有効期間は12ヶ月である。

バッグはプレートに開封された後、湿気を避けて2〜8℃で光を避けて保存してください。使用期間は2ヶ月です。

適用機器

450 nm波長の酵素スケール、37℃恒温設備を含み、微量ピペットを調整することができる。

1.動物の全血を採取して通常の方法で血清を調製し、血清の清明さ、溶血、汚染のないことを要求する。サンプルは1週間以内に2〜8℃で保存でき、長期的には−20℃で保存する必要がある。

2.濃縮洗浄液を使用する前に室温に戻して沈殿物を溶解させ、その後、蒸留水または脱イオン水を用いて20倍希釈して作業洗浄液（例えば、蒸留水19部または脱イオン水に濃縮洗浄液1部を加える）にする。

検査方法

1.使用前にキットを30分間室温に置き、室温に戻した。

2.必要量の酵素標識スラットを採取し、陰性、陽性対照各1孔を設置し、未使用のスラットはできるだけ早く密封し、2〜8℃で保存する。

3.試料孔に5 ulの検査待ち試料を添加し、95 ul試料希釈液を添加し、十分に振動混合した。

4.陰性、陽性対照孔にそれぞれ陰性、陽性対照100μlを添加した。

5.混合し、蓋板膜を被覆し、37℃の温箱で30分間インキュベートした。

7.1ウェル当たり酵素添加マーカー100μl、37℃で30分間遮光反応させた。

8.穴の中の液体を振り切って、穴ごとに250 ulの作業洗浄液を加えて、振動混合で60秒洗浄して捨てて、5回繰り返し洗浄して、*後に一回乾燥液体をたたく。

9.サンプル数に基づいて発色液Aと発色液Bを等体積割合で混合して基質作動液として配置し、現在配合している。1ウェルに100 ulを加え、37℃で10分間遮光反応させ、全体の発色速度が速すぎる場合は、5分前に発色を終了することができ、発色時間*長さは15分を超えない。

10.ウェル当たり終止液100μlを加え、混合し、450 nmで各ウェルの吸光値（OD値）を測定した。

基準値

実験が正常である場合、陽性対照OD−陰性対照OD＞0.2。

検査結果の解釈

1.S／P＝（サンプルOD−陰性対照OD）／（陽性対照OD−陰性対照OD）。

3.0.2＜S/P＜0.4の場合、結果として抗体価不足または疑似感染の可能性が考えられる。

4.S/P＜0.2の場合、結果は陰性と判読される。

1.本キットは定性検査サンプル中のブルー舌ウイルス抗体の大まかな評価としてのみ使用される。

2.本キットは研究用であり、臨床実験や人体実験に使用してはならない。

注意事項

1.実験操作時に手袋を着用し、作業服を着用し、消毒隔離制度を厳格に健全化し、実行しなければならず、各種実験廃棄物はすべて伝染物に基づいて処理しなければならない。

2.終止液は腐食性があり、皮膚や衣類に接触しないようにしなければならない。誤って接触した場合は、すぐに大量の水道水で洗い流してください。

3.酵素プレートを冷蔵環境から取り出す時は室温に戻してから袋を開けることができ、使い終わっていない酵素プレートは乾燥剤の入った密封袋に入れて保存する必要がある。

4.濃縮洗浄液は低温で結晶化しやすく、使用時には室温に戻して溶解する必要がある。

5.検査に使用するサンプルは新鮮なままであること。

6.試験結果の判定は酵素尺度計の示度を基準としなければならない。

7.異なるロット番号の試薬成分は混合してはならない。