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アドレス
上海市嘉定区墨玉路185号1階J
概要
臨床レベルの凍結保存液は、凍結保存する細胞をはく離溶液で収集し、細胞数を計数した。
製品詳細
CP-1細胞凍結保存液（臨床レベル凍結保存液）
・日本再生医学等の製品材料の資格取得
1.1992年から製品の普及応用
2.日本国内のGMPデバイスで製造
3.非臨床試験を行った
5.−80℃の冷蔵庫で冷凍保存可能
6.動物由来成分を含まない
7.成分公開透明
8.日本原薬登録証（MF）を持つ
インスタンスの適用
I懸濁細胞及び壁貼り細胞の凍結方法
II CP-1 HGを用いた造血幹細胞の凍結保存/解凍方法
III。CP-1 HG間充てん幹細胞を用いた凍結保存/解凍方法
冷凍保存液の調製
・1.CP−1高レベル、25%HSA、媒体を4℃に冷却する。
・2.CP-1高級6.8 mL、25%HSA 3.2 mLと10.0 mL培地を遠心管に加え、均一に混合する。
・3.使用する前に、4℃で保存してください。
細胞凍結保存
・1.凍結保存する細胞をストリップ溶液で収集し、細胞数を計数する。
・2.上澄み液を遠心分離除去する。
・3.4℃に冷却したCP−1高品位/25%HSA/培地（凍結保存液−2の調製）を予め添加し、1×106細胞/mLに均一に懸濁する。
・4.各1 mLを冷凍管に入れ、冷凍容器に入れ、−80°Cでゆっくり冷凍する。
・5.翌日、液体窒素または−150℃の深冷キャビネットに移動する。
解凍細胞
・1.遠心管に9 mLの培地を用意しておく。
・2.凍結した冷凍管を液体窒素から取り出し、37°Cの温水浴で急速に溶かす。
・3.解凍したすべての細胞を培地に添加し、遠心分離する。
・4.上清を除去し、適量の培地を添加する。
・5.使用される細胞タイプごとに最適な条件下で培養する。IV評価結果（間葉質幹細胞凍結保存）
CP−1 HGを用いたiPS/ES細胞の凍結保存と評価
Ⅰ．懸濁細胞及び壁貼り細胞の凍結方法
二、CP-1®上級冷たい凍る保存/解凍る造血乾燥細い細胞の方法三、CP-1®上級間に適用充てるしつりょうやる細い細胞冷凍る保存/解凍る方（かた）法
冷凍保存液の調製
・1.CP−1高レベル、25%HSA、媒体を4℃に冷却する。
・2.CP-1高級6.8 mL、25%HSA 3.2 mLと10.0 mL培地を遠心管に加え、均一に混合する。
・3.使用する前に、4℃で保存してください。
細胞凍結保存
・1.凍結保存する細胞をストリップ溶液で収集し、細胞数を計数する。
・2.上澄み液を遠心分離除去する。
・3.4℃に冷却したCP−1高品位/25%HSA/培地（冷凍保存液−2の調製）を予め添加し、
1×106細胞/mLに均一に懸濁した。
・4.各1 mLを冷凍管に入れ、冷凍容器に入れ、−80°Cでゆっくり冷凍する。
・5.翌日、液体窒素または−150℃の深冷キャビネットに移動する。
解凍細胞
・1.遠心管に9 mLの培地を用意しておく。
・2.凍結した冷凍管を液体窒素から取り出し、37°Cの温水浴で急速に溶かす。
・3.解凍したすべての細胞を培地に添加し、遠心分離する。
・4.上清を除去し、適量の培地を添加する。
・5.使用される細胞タイプごとに最適な条件下で培養する。
Ⅳ．評価格結果（間充てるしつりょうやる細い細胞冷凍る保存）
［目的］将来の再生医学への応用が期待されるヒト葉質幹細胞（hMSCs）について、CP-1の高レベルに冷凍保存でき、安価で便利なドライアイスにより安定的に長期輸送できるか。
［方法］ヒト脂肪由来の間葉性幹細胞（MSC−AT）またはヒト骨髄由来の間葉性幹細胞（MSC−BM）をCP−1 High Gradeまたは対照（下図のA）（1 x 106細胞）／mL）に凍結し、液体窒素タンクに貯蔵する。液体窒素タンクに貯蔵した後、ドライアイス輸送（−80°C・7日、−60°C・3日、60°C・7日）を仮定し、融解後直ちに生存率と翌日培養した各条件下で血管への付着率（付着率＝生細胞数／接種した生細胞数）を貯蔵して確認しなければならない。
［結果］すべての条件下で、融解後の生存率は90%以上であり、差異は観察されなかった（下図B）。しかし、凍結hMSCを対照として、解凍後の翌日に−60°C保存時に培養箱に付着していない多くの死細胞が観察されたが、CP−1で凍結したhMSCでは死細胞はほとんど観察されず、すべての死細胞はほとんど観察されなかった。結合細胞（下図のBとC）。
［結論］ドライアイス自体の温度は約−80°Cであるため、CP−1 High Gradeで凍結したhMSCはドライアイスを用いて安定かつ長期輸送が可能であると考えられる。
