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上海市楊浦区国康路100号2階
上海創凌生物科学技術有限公司
上海市楊浦区国康路100号2階
血液RNA DNA小量抽出キット抽出シリーズ
キット組成は血液RNA&DNA保護液(Buffer BR 1、Cat#RP 601)を含み、サンプルの分別収集、輸送、保存を容易にした。
血液サンプルとBuffer BR 1を1:2.5の割合で混合した後、室温で2時間放置し、サンプル中のDNAとRNAを遠心沈殿しやすい粉末状凝集物に硬化させた。
DNA吸着カラム−RDはDNAを選択的に吸着し、RNAを濾液中に保持する。濾液にエタノールを添加して結合条件を調整した後、RNA吸着カラム−Aは高分子RNA(mRNAとrRNAを含み、tRNAと5 Sに分解した小RNAを含まない)を効果的に吸着する。
DNA吸着カラム−RDとRNA吸着カラム−Aをそれぞれ洗浄した後、脱イオン水または低塩溶液を用いてDNAとRNAをそれぞれ溶出し、後続の実験に直接使用することができる。
本キットは≦1 mlの新鮮なヒトまたは哺乳動物の全血、≦3 mlの凍結保存されたヒトまたは哺乳動物の全血からそれぞれDNAとRNAを抽出するのに適しており、処理に適した血液はEDTA−K 2抗凝血であり、ヘパリンまたはクエン酸抗凝固の血液の処理には適していない。
小溶出体積15μl。ほとんどのtRNAが除去され、5 Sに分解された小さなRNAは、5 ` RACEと3 ` RACEに直接使用できます。
DNA収量と応用:5-10μg DNA/ml血液、小溶出体積50μl。血液ゲノムDNA抽出キットよりも純度が低く、酵素カットや通常のPCRに使用できる。
本キットはまた、動物の糞便及び軟体動物の腸管内容物からウイルスRNA及びDNAを抽出するのに適している。
生理食塩水はサンプルを分散し、遠心上清にはウイルスRNAとDNAが含まれている。遠心上清とBuffer BR 1を1:2.5の割合で混合した後、室温で2時間放置し、サンプル中のDNAとRNAを遠心沈殿しやすい粉末状凝集物に硬化させ、この過程でPCR抑制成分のほとんどを除去することができる。その後の操作は血液サンプルの処理と同じである。
溶出体積25μl、電気泳動体積2μl、1×TAE、2%agarose、6.7 V/cm 15 min
新鮮な血液から得られたRNAには明らかなゲノムDNAと5 S RNAはなかった。
非変性アガロースゲルにおいて、28 S RNA、18 S RNA及び5 S RNAはそれぞれ2000 bp DNA、750 bp及び100 bp DNA移動度と類似している。
血液RNA DNA小量抽出キット抽出シリーズ創凌生物現物供給!