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北京市昌平区城北街道鼓楼東街33号6号棟6428室
北京雲ペプチド生物科学技術有限公司
北京市昌平区城北街道鼓楼東街33号6号棟6428室
アラジン R301899-100ml RIPAぶんかいえき
アラジンRIPA分解液(強)-常備現品
製品番号:R301899-100ml
製品名:RIPAぶんかいえき
製品仕様:100ml
製品概要:
規格または純度:抑制剤なし
英語名:RIPA分解緩衝液(強)
保管温度:2-8摂氏度保存
輸送条件:氷嚢輸送
RIPA溶解液は伝統的な組織及び細胞急速溶解液であり、主に動物組織と哺乳動物細胞から可溶性蛋白質を抽出するために用いられ、壁貼り細胞と懸濁細胞を溶解するために用いることができる。その分解液の強度に応じて強、中、弱の3種類に分けることができ、実験の需要に応じて相応の製品を選択することができる。RIPAぶんかいえき(強い)細胞核、細胞膜、細胞質タンパク質を効果的に抽出することができ、抽出されたタンパク質はタンパク質定量、たんぱくしるし、IPなどの検出分析を行う。
具体的な製品のパラメータは製品説明書を受け取ったパラメータを基準とする
アラジンRIPA分解液(強)-常備現品
使用方法
(一)壁貼り培養細胞
1.本品を室温に置いて溶解混合し、実験要求に応じて酵素阻害剤を添加した。
2.壁貼り細胞の培養液を除去し、公共放送サービス、信号なしまたは無血清培養液洗浄1回、低速遠心分離、上清を捨て、沈殿物を残す。
3.従って 6 オリフィスプレートを穴ごとに入れる150~250マイクロリットル酵素阻害剤を含む溶解液の割合は、本品に加える。ピペットは軽く吹きつけ、溶解液と細胞を十分に接触させる。氷の上に置くか、4℃細胞に作用する分解液 1~3秒内では、細胞が分解されます。通常(つうじょう) 6 オリフィスプレート毎の細胞添加150マイクロリットル溶解液は十分であるが、細胞密度が非常に高ければ、溶解液の使用量を 200~250マイクロリットル。
4.10000~12,000グラム,4℃遠心 5~10分(低温遠心分離機がなければ、室温で遠心分離してもよい)あ、上清を取ります。
5.後のSDSページ、西洋、免疫沈殿と免疫共沈殿などの操作。
(二(に))懸濁培養細胞
1.本品を室温で溶解混合した後、酵素阻害剤を添加した。
2.低速遠心懸濁細胞、上清を捨て、沈殿物を収集する。
3.指で細胞を軽く弾き、ほぐす。従って 6 オリフィスプレート毎の細胞添加150~250マイクロリットル酵素阻害剤を含む溶解液の割合は、本品に加える。通常(つうじょう) 6 オリフィスプレート毎の細胞添加150マイクロリットル溶解液は十分であるが、細胞密度が非常に高ければ、溶解液の使用量を 200~250マイクロリットルまた指で軽く弾いて細胞を十分に分解し、十分に分解した後に明らかな細細胞沈殿がないべきである。
4.10000~12,000グラム,4℃遠心5~10分(低温遠心分離機がなければ、室温で遠心分離してもよい)あ、上清を取ります。
5.後続のSDSページ、西洋、免疫沈殿と免疫共沈殿などの操作。
(三)組織サンプル
1.本品を室温に置いて溶解混合した後、酵素阻害剤を添加した。
2.グループ知細かい破片に切り取るには、小さいほどよい。
3.液体窒素または超低温冷蔵庫に取り込んで冷凍する30分以上の組織は、速やかに液体窒素で研磨し、研磨過程はできるだけ1~2分間を使用して、タンパク質の分解を低減します。
4.に従って20 mg組織への参加 150~250マイクロリットル分解液の割合は、酵素阻害剤を含む分解液を加える。氷上または4℃ぶんかい 15~30分。
5.手順 3、4 次の手順も使用できます。20 mg組織への参加 150~250マイクロリットル分解液の割合は酵素阻害剤を含む本品に加えた。十分に溶解するまでガラスホモジナイザーまたは組織ミルを用いてホモジナイズし、このプロセスはできるだけ 1~2分間を使用して、タンパク質の分解を低減します。
6.10000~12,000グラム,4℃遠心 5~10分(低温遠心分離機がなければ、室温で遠心分離してもよい)あ、上清を取ります。
7.後続のページ、西洋、免疫沈殿と免疫共沈殿などの操作。
注意事項
1.壁貼り細胞の培養液を除去した後、血清中のタンパク質に干渉がなければ、洗浄しなくてもよい。
2.溶解が不十分であれば溶解液の使用量を適切に増加させることができ、高濃度のタンパク質サンプルが必要であれば、溶解液の使用量を適切に減少させることができる。
3.細胞量が多い場合は、分装しなければならない 50~100 万細胞/チューブを遠心分離してから分解します。大団の細胞は十分に分解しにくいが、少量の細胞は分解液が細胞と十分に接触しやすいため、比較的に十分に分解しやすい。
4.組織試料自体が非常に微細であれば、適切にせん断した後に直接溶解液を加えて溶解することができ、強いVorte×サンプルを十分に分解する。そして同様に遠心分離して清を取り、後続の実験に用いた。直接分解の利点は比較的便利で、ホモジナイザーを使う必要はなく、欠点はホモジナイザーを使うほど十分に分解することではない。
5.低温では濁りが発生する可能性があるが、37℃水浴はその溶解を促し、使用効果に影響しない、溶解時間は長すぎず、有効成分の失効を避ける。
6.分解産物にはしばしば透明なコロイド状の塊が現れ、正常な現象である。この透明コロイドは含有ゲノムであるデオキシリボ核酸などの複合体。ゲノムの検出やデオキシリボ核酸特に緊密な蛋白質を結合する場合、直接遠心分離して上清を取って後続の実験に用いることができる、ゲノム結合に特に密接なタンパク質を検出する必要がある場合は、超音波処理により透明なコロイドを砕き、その後、遠心分離により上澄みを取って後続の実験に使用することができる。
7.細胞分解の操作手順は、氷の上に置くか、4℃を行います。
使用範囲
一般生物学及び医学研究に適用する
製品注文情報:
R301899-100ml RIPAぶんかいえき 100ml